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目的探讨利用PCR-SSCP分析技术进行粪便脱落细胞中p53基因突变检测用于大肠癌早期筛选诊断的可能性。方法对40例大肠癌患者留取手术切除的癌组织及术前保存的粪便。分别从肿瘤组织及粪便中提取DNA。应用基因扩增-单链多态性分析-溴乙锭(PCR-SSCP-EB)染色方法检测两种标本中p53基因扩增情况及第5、6、7、8外显子突变情况,进行对照分析。结果p53基因特异性扩增产物及58外显子突变在肿瘤组织及粪便脱落细胞中广泛存在。肿瘤组织中p53基因突变27例,粪便中24例,其p53突变检出的敏感性为60 ...
张纯海, 马冲, 盖宝东, 王巍
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视黄酸对胃癌细胞生长和p53及c-myc基因表达的影响 [PDF]
目的:探讨视黄酸对胃癌细胞生长和基因表达的影响。方法:以MTT法测定细胞生长,软琼脂集落形成实验测定癌细胞恶性程度,Northernblot测定p53及cmyc基因表达水平。结果:10-6mol/L全反式视黄酸(ATRA)能够有效地抑制MGc803和BGC823细胞生长,但不能抑制MKN45细胞生长;ATRA还能够降低3株胃癌细胞形成集落的能力。MGc803和BGC823细胞经ATRA诱导后,p53基因的表达水平提高,cmyc基因的表达水平下降 ...
吴乔, 苏文金, 陈正明, 陈玉强
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菠萝蛋白酶诱导K562细胞分化及其对P53基因表达的影响 [PDF]
为进一步证实菠萝蛋白酶对肿瘤细胞的诱导分化作用,采用形态观察计数、血红蛋白定量测定、发光法测定细胞吞噬能力和Northern原位杂交法观察和检测了菠萝蛋白酶诱导K562细胞分化及其p53基因表达变化.结果显示,菠萝蛋白酶可诱导K562细胞向红系和粒/巨噬系两个方向分化;在菠萝蛋白酶作用下,p53基因于给药后8h转录表达增强,24h达高峰,此后又下降,其时相变化先于分化发生.这些结果提示p53基因在Bromelain诱导K562细胞分化过程中可能起启动分化的重要作用 ...
张铮 +4 more
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贵州地区汉族妇女p53PIN3基因遗传多态性与乳腺癌相关性研究
目的探讨p53PIN3基因多态性与贵州地区汉族乳腺癌遗传易感性之间的关系。方法采用序列特异性引物,以PCR技术分析117例乳腺癌患者和123例健康对照个体外周血DNA p53基因第3内含子多态性的分布情况。结果在117例乳腺癌患者和123例对照中,均未发现A′/A′基因型,由于A′/A′基因型较少,无法进行统计学处理,因此将A/A′、A′/A′两种基因型合并,与A/A基因型比较,乳腺癌组与对照组基因型频率分布有显著性差异 ...
马洪亮, 朱岷, 黄铁生
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人肝癌裸鼠移植瘤株HHC_4、HHC_(15)的分子病理学研究 [PDF]
厦门市同安地区已成为中国肝癌死亡率第二的高发区。作者对由来自该地区肝癌病人的人肝癌所建立的裸鼠移植瘤株(HHC_4、HHC_(15)细胞所提取的dnA进行分子生物学研究。应用PCr方法发现了HHC_4、HHC_(15)癌细胞dnA都有HbVdnA整合。通过dnA测序,证明了HHC_4dnA有P53基因第250密码子的C→A突变;HHC_(15)有P53基因第249密码子的g→T突变。这为本地区肝癌死亡率与高HbV感染率和 ...
周红 +5 more
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摘 要 为了解肝细胞癌(HCC)中p53 基因的突变情况, 收集86 例HCC 手术切除标本, 采用聚合酶链反 应-单链构象多态性(PCR/ SSCP)、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR/ RFLP)和DNA 序列分析, 研 究了p53 基因的突变情况。86 例HCC 中, p53 基因的突变率为36 %, 其中, 密码子249 的突变率为33 .7 %, 1 例 SSCP 和RFLP 均提示密码子249 存在突变者经DNA 序列分析显示密码子249 的第三个碱基发生了AGG/Arg →
彭晓谋 彭文伟 周元平
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细胞凋亡是一种细胞自主生理性死亡 ,对多细胞动物机体的正常发育和自身稳定具有极其重要的作用 ,细胞凋亡失衡与许多疾病尤其是与肿瘤的发生发展有关。近几年来 ,有关细胞凋亡分子机制的研究进展较快 ,对细胞凋亡在放疗、化疗等肿瘤治疗措施中的作用也有了进一步的认识 ...
李祺福, 欧阳高亮, 洪水根
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The interaction between gold nanoparticles with DNA and application in the detection of human p53 gene mutation [PDF]
纳米金由于具有独特的理化性质及良好的生物亲和效应,不仅在催化、自组装、微电子、传感器等领域表现出广阔的应用前景,而且在生物医学领域,如生物标记、核酸检测、药物传输、转录调控、酶活性调控等方面都有重要的潜在应用价值,因此受到越来越广泛的关注。纳米金已成为基因工程重要的工具之一。本文主要对纳米金与核酸的相互作用及在人p53基因突变检测中的应用进行研究和探讨。纳米金的制备是其应用的基础。由于影响因素很多,要制备大小、形状可控,粒径分布均一的纳米金并不容易 ...
张建锋
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共表达p53及siRNA-VEGF质粒的构建及其在PC-3细胞中的表达
目的构建可同时表达野生型p53(wt-p53)及siRNA-VEGF的重组真核表达载体用于激素非依赖性前列腺癌的联合基因治疗。方法利用亚克隆、T-A克隆和PCR技术合成并构建pcDNA3.1-p53,siRNA-VEGF,p53/siRNA-VEGF及siRNA-scramble重组质粒。以脂质体法将上述重组质粒转染至PC-3细胞,PCR鉴定p53,VEGF基因的表达。结果克隆出wt-p53全长及带有U6启动子的siRNA-VEGF序列,经DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建上述五种真核重组表达载体。
刘亚男 +10 more
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dHPlC用来检测dnA突变和单核酸多态性,可以取代传统分子生物学技术,不需要制备凝胶,检测dnA片段做到了全自动、高效、快速、准确,在疾病相关基因突变检测方面提供了有效的技术手段 ...
蒙世佼
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