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, 2011 本发明公开了一种抗鳜鱼弹状病毒糖蛋白的单克隆抗体及其制备方法和应用,以及产生 该单克隆抗体的杂交瘤细胞株SCRV-G-1B2,CCTCC No：C200918。其制备步骤是：以纯化的 鳜鱼弹状病毒为抗原,免疫BALB/c小鼠,经细胞融合,产生融合的杂交瘤细胞,再经间接 ELISA筛选和有限稀释法单克隆化,获得稳定分泌抗鳜鱼弹状病毒糖蛋白单克隆抗体的杂交 瘤细胞株。本发明能获得活性更高、特异性更强、数量更多的鼠脾脏淋巴细胞,以保证所 获得的融合杂交瘤细胞效果更好 ...
张奇亚, 陈中元
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的从单克隆抗体水平研究同种异体肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性,探讨多反应性抗体是否为HLA抗体尤其是非供体特异性抗体产生的原因之一。方法从肾移植患者外周血细胞及手术切除的移植肾组织中分离出B淋巴细胞,并于体外永生化培养获得单克隆B细胞,分别检测B细胞分泌的抗体对HLA抗原及凋亡细胞的反应性。结果共获得107个B细胞克隆,检测发现每个B细胞克隆在体外培养过程中均分泌抗体。其中有4个单克隆B细胞分泌的抗体可以与多种HLA抗原发生反应,而这些HLA抗原之间并非都有共用的抗原决定簇。进一步研究发现,
荣春书, 王伟刚, 连鑫, 高宝山
doaj
, 1986 鱼类细胞克隆培养技术,属于A01K,鱼类、鱼类细胞工程.用单细胞显微操作法分离单个细胞进行克隆培养,并以罗非鱼肾原代细胞作克隆培养细胞的饲养细胞,经复制、扩增,能在短期内获得大量细胞克隆,一般可使克隆率,一般可使克隆率达50%以上,最高可达92%.该技术可广泛用于研究鱼类的细胞形态、细胞遗传、细胞一病毒关系及分离突变体等 ...
杨兴棋, 邓初夏, 陈宏溪
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, 2009 在青藏高原和四川盆地过渡带,分别于618m和1800m两个海拔高度上研究匍匐茎克隆植物过路黄(Lysimachia christinae)在资源交互斑块性生境中的克隆内资源共享及其对生长的影响。结果显示,在海拔1800m处,与资源的空间同质性处理(Ⅰ)和(Ⅱ)相比,资源的空间异质性处理(Ⅲ)和(Ⅳ)下过路黄整个克隆片段的生物量和分株数均获得显著增加;在海拔618m处,与资源的空间同质性处理(Ⅰ)和(Ⅱ)相比,资源的空间异质性处理(Ⅲ)和(Ⅳ)下过路黄整个克隆片段生物量显著增加 ...
刘庆, 陈劲松, 刘鹏
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 [目的]构建带有肝脏特异性启动子和tTS沉默子的四环素调控系统,观察其在人HepG2细胞内的表达,建立严密型四环素调控系统的HepG2细胞模型.[方法]通过二次分子克隆构建重组真核表达质粒载体pliv7-rtTA-tTS-Neo,用脂质体法将质粒pliv7-rtTA-tTS-Neo及pliv7-rtTA-Neo转染人HepG2细胞,经G418筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化,克隆扩增后瞬时转染pTRE-Luc质粒,强力霉素（1 mg/L）诱导表达后检测荧光素酶活性 ...
张若霜, 帅丽芳, 赵勇, 陈系古
doaj
, 2006 本文运用抑制性差减杂交技术，构建了灭活大菱鲆弹状病毒诱导的牙鲆囊胚培养细胞和正常对照细胞间差异表达基因的差减cDNA文库。通过构建SMART-cDNA文库并结合RACE技术，从该细胞模型系统中克隆、鉴定了10个Hsp家族基因一个鱼类蛋白质精氨酸甲基转移酶基因的全长cDNA序列和PoCctz基因的部分cDNA序列。 进一步利用Real-time PCR对11个热休克蛋白家族基因在热休克和灭活病毒诱导下的表达时序的研究表明：在灭活病毒诱导下，牙鲆Hsp基因表达特征与在热休克状态下的表达特征相似 ...
董彩文
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, 2011 鱼类中IRF-1基因的克隆测序目前仅局限于辐鳍鱼类[1,2],而在软骨鱼类中未见报道。IRF-1是干扰素调节因子家族的成员之一[3]。除作为干扰素的转录调节因子外[4],还具有其他功能[5—10]。作为天然免疫重要的调节因子其基因在哺乳类中得到了广泛的克隆和分析。IRF-1与其他家族成员一样,在氨基末端前115个氨基酸都具较高同源性 ...
甘小妮, 陈新文
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的制备呼吸道合胞病毒（RSV）多克隆抗体,为RSV的检测提供条件。方法用RSV颗粒抗原免疫新西兰家兔3只,采用细胞病变中和实验检测RSV多克隆抗体。结果细胞病变中和实验结果显示,本研究制备的RSV多克隆抗体在1∶1102的稀释度能保护50%的Hela细胞免受RSV的攻击,而阴性对照血清不能保护细胞对病毒的感染。结论RSV颗粒抗原免疫新西兰家兔可成功制备RSV多克隆抗体,1∶1102稀释的血清可保护50%的细胞不产生病变。
范清, 李洪源, 田文静
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue目的 筛选鉴定与胃组织交叉反应的抗H7N9流感病毒的单克隆抗体，初步探讨流感病毒感染会引发肠道相关疾病的可能致病机制。方法 利用H7N9流感病毒制备了大量的单克隆抗体，对制备的单克隆抗体运用ELISA方法进行亚型和效价测定，免疫组化对制备的单克隆抗体与组织的反应性进行筛选，巢式PCR分子生物学技术克隆单克隆抗体轻重链可变区序列。结果 制备的单克隆抗体H7N9-71和H7N9-78均能与H7N9抗原特异性结合，抗体效价达1∶10～5,免疫组化结果表明H7N9-71、H7N9 ...
孙晶莹 +6 more
doaj
, 2005 用RACE PCR获得了鳜白介素-1β(IL-1β)的全长cDNA.鳜IL-1β的cDNA全长为1298 nt(核苷酸),其5′非编码区包含UTR 93 nt;3′非编码区包含452 nt;其开放阅读框内包含753 nt,翻译成251个氨基酸.将鳜IL-1β克隆到原核表达载体pET-32a上,在大肠杆菌Rosetta- gami(DE3 ...
王改玲,孙宝剑,王高学,聂品
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