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人uPA基因克隆和单克隆抗体的制备及其在乳腺癌中表达的检测

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,
赵桂梅   +3 more
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Functional Analysis of Gametocyte-Specific Genes in the Rodent Malaria Parasite Plasmodium yoelii [PDF]

open access: yes, 2016
疟疾是由疟原虫感染导致的蚊媒传染性疾病,每年导致全球上亿人口的感染和上百万人口的死亡,严重危害人类健康。疟原虫具有宿主交替和世代交替的特点,有脊椎动物和按蚊两个宿主,无性生殖和有性生殖两种生殖方式。配子体状态的疟原虫被按蚊吸食后,先后经历雌雄配子体—雌雄配子—合子—动合子—卵囊等发育阶段,这是一个多步骤、多基因调控的复杂过程,是疟疾传播的必须阶段。迄今为止,关于疟原虫配子体阶段特异表达基因的研究相对较少,本研究将重点分析约氏疟原虫配子体阶段特异表达基因的生物学功能 ...
凌渊
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克隆浅释 附视频

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 1997
克隆浅释于永利作者单位:130021长春,白求恩医科大学免疫学教研室关于克隆羊的报道在全世界引起了轩然大波,一时间“克隆”成了一个十分风行的词。本文将从医学的角度对克隆做一简要的解释。克隆(clone)一词来源于希腊文(Klon),指从一个个体经无性...
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肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2016
目的从单克隆抗体水平研究同种异体肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性,探讨多反应性抗体是否为HLA抗体尤其是非供体特异性抗体产生的原因之一。方法从肾移植患者外周血细胞及手术切除的移植肾组织中分离出B淋巴细胞,并于体外永生化培养获得单克隆B细胞,分别检测B细胞分泌的抗体对HLA抗原及凋亡细胞的反应性。结果共获得107个B细胞克隆,检测发现每个B细胞克隆在体外培养过程中均分泌抗体。其中有4个单克隆B细胞分泌的抗体可以与多种HLA抗原发生反应,而这些HLA抗原之间并非都有共用的抗原决定簇。进一步研究发现,
荣春书, 王伟刚, 连鑫, 高宝山
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斑马鱼窖蛋白-1基因cDNA克隆及功能初步研究 [PDF]

open access: yes, 2010
窖蛋白-1(Cav-1)是胞膜窖的主要结构蛋白,可与多种信号分子相互作用,调节细胞的增殖、分化和凋亡,其异常表达与多种人体疾病的发生和发展密切相关,而在斑马鱼发育中的功能尚不很清楚。研究克隆出斑马鱼窖蛋白-1基因两个亚型的全长cDNA,与其他物种窖蛋白-1的氨基酸序列进行比较,发现该蛋白在脊椎动物中非常保守。利用逆转录多聚酶链反应检测发现,在斑马鱼多个成年组织中窖蛋白-1的两个亚型均有转录表达。利用胚胎整体原位杂交检测组织或器官特异基因的时空表达变化发现,过表达或利用Morpholino反义寡聚核苷酸(
厉洁   +4 more
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单克隆多克隆抗体不同标记ELISA技术对HBeAg/抗-HBe检测评估

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1993
采用抗-HBe单克隆和多克隆抗体进行生物素或酶标记作酶免疫试剂检测HBeAg及抗-HBe,结果显示单克隆抗体(McAb)敏感性高于多克隆抗体(PcAb)。生物素试剂在检测HBeAg的稀释度为1:5000,比酶标法ELISA高1倍多,与RIA相当,且稳定性优于RIA。生物素标记抗体至少1年内保持效价不变,1年内批间变异系数为5.8%,相同标本重复检测变异系数为5.94%,是一种较理想的检测e系统的方法之一。另外,研究发现一孔一期法同时测HBeAg/抗-HBe时,无论标记抗体为单克隆或多克隆 ...
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人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007
[目的]克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。[方法]采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序。[结果]人PAH基因cDNA正确克隆入pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致。[结论]成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒 ...
张志   +8 more
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Identification of Rice Dwarf Mutant and Fine Mapping of mhd1 Gene [PDF]

open access: yes, 2016
株高是水稻株型重要的组成因子,直接关系到水稻的产量,株高过高易引起植株倒伏导致减产,适当矮化则可以达到抗倒、增产的目的。虽然目前已经鉴定不少与水稻矮秆相关的基因,但是能够在生产上实际应用的矮秆主基因仍以sd1为主。因此,寻找和创造能在生产上利用的矮秆种质资源以及研究矮化相关机制具有重要的理论和实践意义。 本研究的材料源于籼稻品种闽恢3301经EMS诱变产生的小粒矮秆突变体,暂命名为mhd1(Minhui3301dwarf1)。mhd1表现出多个异常表型,包括植株矮化、叶片直立变宽、叶色深绿、穗和谷粒较小,
陈伟刚
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Host location behavior of Aedes albopictus and Empoasca vitis: olfactory and visual effects on their orientation [PDF]

open access: yes, 2015
在昆虫宿主定位行为中,嗅觉与视觉究竟哪个更为重要至今尚无定论。本研究选择福建地区广泛分布、并且具有重大危害的白纹伊蚊(Aedesalbopictus)和假眼小绿叶蝉(Empoascavitis)为研究对象,以干扰害虫对宿主生物的定向通讯行为为研究思路,整合形态学、分子生物学和行为学方法试图揭示嗅觉和视觉在昆虫宿主定位行为中的作用。以期深入理解昆虫的宿主定位行为机制并为害虫防治提供新思路。研究结果如下: (1)应用RACE技术获得白纹伊蚊嗅觉共受体基因(AalbOrco)全长编码序列 ...
章旭日
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tTS/rtTA系统下调目的基因基础表达的细胞模型研究

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006
[目的]构建带有肝脏特异性启动子和tTS沉默子的四环素调控系统,观察其在人HepG2细胞内的表达,建立严密型四环素调控系统的HepG2细胞模型.[方法]通过二次分子克隆构建重组真核表达质粒载体pliv7-rtTA-tTS-Neo,用脂质体法将质粒pliv7-rtTA-tTS-Neo及pliv7-rtTA-Neo转染人HepG2细胞,经G418筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化,克隆扩增后瞬时转染pTRE-Luc质粒,强力霉素(1 mg/L)诱导表达后检测荧光素酶活性 ...
张若霜, 帅丽芳, 赵勇, 陈系古
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