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以免疫印迹法分析登革病毒感染的鼠脑抗原和白纹伊蚊细胞抗原,用单克隆抗体及多克隆抗体作探针。结果显示:登革病毒的非结构蛋白NV5存在有群及型特异的抗原决定簇。
林波
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激活素受体相互作用蛋白ARIPzip真核表达载体的构建及表达
目的构建激活素受体相互作用蛋白(activin receptor interacting protein zip,ARIPzip)真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从小鼠成纤维细胞3T3中提取RNA,并利用ARIPzip特异性引物通过RT-PCR方法扩增了ARIPzip cDNA,并克隆入pcDNA-Flag载体中,构建重组载体pcDNA-F-ARIPzip。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测ARIPzip的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功 ...
裴颖 +7 more
doaj
THE ROLE OF PROTEIN KINASE B IN THE APOPTOSIS OF GASTRIC CANCER CELLS INDUCED BY 12-O-TETRADECANOYLPHORBOL-1,3-ACETATE [PDF]
目的探讨佛波酯(TPA)诱导胃癌细胞系凋亡过程中蛋白激酶B(PKB)的作用。方法通过BrdU处理,流式细胞术检测以及DAPI染色,荧光显微镜观察分析TPA对胃癌BGC-823细胞的影响;免疫印迹法检测TPA对PKB蛋白表达水平、磷酸化的影响;核浆分离获得核浆蛋白,用于免疫印迹法检测TPA对胃癌细胞内PKB和其Ser 473位点磷酸化的核浆表达影响,以及激光扫描共焦显微镜观察TPA是否改变胃癌细胞内PKB的分布。结果TPA诱导BGC-823细胞凋亡;TPA下调BGC-823细胞内PKB蛋白表达 ...
夏春, 张兵
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【目的】为探索XIAP 相关因子1( Xaf1) 调节肿瘤细胞凋亡的机制, 利用基因开关调节系统( Teton) , 拟建立由doxycycline 调控表达的Xaf1 诱导细胞株。【方法】将pTREHA-Xaf1 和pWZL-Hyg 质粒用基因 转染技术转入稳定表达rtTA 的Saos-2 细胞中。经过hygromycin 的抗性筛选, 挑出并扩增表达Xaf1 的细胞株。 在8 例实验组中加入doxycycline, 和不加doxycycline 的8 例对照组比较, 重复3 ...
夏焱 +6 more
doaj
The effect of overexpressing SNX8 on the phenotype of Alzheimer’s mice [PDF]
阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是最为常见的神经退行性疾病。神经元胞外Aβ(Amyloidβ,Aβ)聚集形成的淀粉样斑是AD的一个重要的病理特征,而Aβ是由淀粉样前体蛋白APP(AmyloidPrecursorProtein,APP)经β-分泌酶(β-secretase)和γ-分泌酶(γ-secretase)依次切割后生成的(即淀粉样蛋白途径),而APP的另一条剪切途径是α-分泌酶(α-secretase)和γ-分泌酶依次对其进行剪切,释放有神经保护作用的sAPPα ...
纪成香
core
目的探讨cyclin/DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白质印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白表达的可行性、科学性和优越性,为肿瘤的细胞周期分析提供科学有效的技术支持。方法运用cyclin/DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白的表达,并与传统的免疫组织化学切片法进行比较。结果流式细胞术可以准确地对细胞周期蛋白在临床实体瘤中的表达进行定性、定量、定位的分析 ...
何小军 +9 more
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TRPC3 Protein Expression in Rabbit Left Atrium and Pulmonary Vein Sleeves [PDF]
目的:实验以新西兰大耳白兔左心房和肺静脉肌袖为研究对象,了解TRPC3通道蛋白在左心房和肺静脉肌袖两个部位是否有表达,同时检测TRPC3通道蛋白表达量,为肺静脉肌袖参与快速性心律失常提供分子生物学方面的理论依据。 方法:健康新西兰大耳白兔,雌雄不拘,体重0.8-1.5KG。经乌拉坦麻醉后取左心房和肺静脉肌袖进行组织包埋,连续切片行TRPC3通道蛋白免疫荧光染色;另外提取左心房和肺静脉肌袖组织蛋白行蛋白免疫印迹检测蛋白表达量。制备兔快速心房起搏模型,提取肺静脉肌袖组织蛋白行蛋白免疫印迹检测蛋白表达量 ...
曾松
core
目的构建核转录因子κB抑制蛋白激酶(inhibitor of kappa B kinase,IKK)β真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从人正常肝细胞L02中提取RNA,并利用IKKβ特异性引物通过RT-PCR方法扩增了IKKβcD-NA,并克隆入pcDNA3载体中,构建重组载体pcDNA3-IKKβ。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测IKKβ的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;免疫印迹结果显示 ...
张冬梅 +6 more
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Quantitative Detection of Genetically Modified Insecticidal Maize by ELISA [PDF]
应用纯化的Bt1杀虫晶体蛋白质作为标准蛋白和免疫抗原 ,通过抗体 抗原 酶标抗体反应 ,建立了间接酶联免疫吸附测定法 (ELISA) ,以快速检测转基因抗虫玉米中的Bt1表达蛋白 .用建立的ELISA法对 4种进口玉米实物样品进行了测定 ,实验结果得到了免疫印迹分析的验证 ,并与进口试剂盒方法的定量分析结果相一致Based on the reaction among antibody antigen enzyme antibody, using purified Bt1 insecticide ...
刘光明, 苏文金
core
目的用人工合成的内切磷硫酰寡脱氧核糖核苷酸(ODN-PSs)对星形胶质细胞进行体外干预培养,分析硫酸软骨素蛋白聚糖表达,探讨ODN-PSs与神经损伤修复的关系。方法采用星形胶质细胞体外诱导培养技术,制备得到ODN-PSs条件培养的细胞;利用斑点杂交、免疫印迹和RT-PCR方法对细胞表达的硫酸软骨素蛋白聚糖和木糖基转移酶-1(XT-1)mRNA进行分析。结果制备的星形胶质细胞采用抗GFAP抗体进行免疫细胞化学染色法进行鉴定,纯度在95%以上;条件培养星形胶质细胞的免疫印迹和RT-PCR分析结果表明,XT ...
沈哲, 刘永茂, 杨有赓
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