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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】研制抗人BLyS 单克隆抗体, 以进一步探讨人BLyS 与自身免疫性疾病的关系。【方法】将人BLy S 基因 克隆到融合蛋白原核表达载体pGEX-4T-1 中, 构建重组质粒pGEX-4T-1/hBLyS , 用此重组质粒转化大肠杆菌BL21, 加IPTG 诱导大肠杆菌表达GST-hBLy S 融合蛋白, 用此融合蛋白免疫BALB/c 鼠, 取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合, 用ELISA 法筛选阳 性克隆, 用免疫印迹和流式细胞仪进一步鉴定抗体的特异性。【结果】重组质粒双酶切结果和DNA ...
张志方
doaj
Involvement of Abnormal MicroRNA Expression in the Mechanism of Drug Resistance with Acute Myeloid Leukemia [PDF]
, 2016 目的：分析miRNA-98的表达异常在急性髓系白血病化疗耐药机制的作用，通过靶向过表达miRNA-98的表达水平探讨以miRNA-98为靶点增加化疗药物敏感性的可能性并分析其可能作用的机制。评价异常表达的血清miRNA-155是否可作为急性髓系白血病的预后标志。 方法：离体实验中，采用qRT-PCR方法检测K562和其耐药株K562/A02中miR-98、E2F1基因表达情况。通过瞬时转染miR-98mimic处理耐药细胞K562/A0248h后，通过qRT-PCR法检测miR-98表达情况；通过qRT-
黄英丹
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Establishment of monoclonal antibody-based immunoassay of two bio-active components from some compound prescriptions of traditional Chinese medicines [PDF]
, 2008 通过杂交瘤技术制备中药主要生物活性成分的单克隆抗体，利用单克隆抗体对中药成分进行测定等应用研究，是一种很有意义的研究中药的方法。这种方法拥有免疫反应的高特异性、高灵敏度、方便快捷等优点。 本研究将复方中药“芍药甘草汤”中主要成分芍药苷和甘草酸分别与蛋白载体连接，制成人工抗原。将合成的抗原免疫Balb/c小鼠，然后以杂交瘤技术制备单克隆抗体，并通过小鼠腹水大量生产抗体。得到的单抗经初步鉴定，证明其具有高效价、高敏感性以及高特异性。利用这两种单克隆抗体建立了竞争性ELISA方法 ...
林纪昀
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基于立即早期蛋白IE62建立水痘-带状疱疹病毒感染性滴度检测方法 [PDF]
, 2018 目的:基于水痘-带状疱疹病毒(VZV)立即早期蛋白IE62与酶联免疫斑点检测技术(ELISpot)建立一种新型的VZV感染性滴度的快速检测方法。方法:应用生物信息学方法设计并合成VZV-IE62蛋白的多肽抗原,牛血清白蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠,筛选和制备抗VZV-IE62单克隆抗体,应用Western blot和免疫荧光法等开展抗体性能评价,继而应用酶联免疫斑点技术(ELISpot)结合生物素-亲和素放大法建立新型的VZV感染性滴度检测方法,并与经典空斑计数法进行比较。结果:获得抗VZV ...
付文锟 +7 more
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Development and Application of a Novel Neutralization Test for Echovirus 25 [PDF]
, 2016 目的:建立一种新型的快速、高通量的埃可病毒25型(ECHO25)中和抗体检测方法,并初步评价其在ECHO25中和抗体筛选和血清流行病学调查中的应用价值。方法:应用免疫荧光方法筛选ECHO25高亲和性抗体并将其作为检测单抗,结合酶联免疫斑点检测技术(ELISPOT)建立ECHO25中和抗体检测方法;使用不同效价的血清评价该方法的准确性;采用所建立的中和方法对ECHO25单克隆抗体、临床血清样品进行检测。结果:建立了快速检测ECHO25中和抗体的Nt-ELISPOT方法 ...
万俊凯 +8 more
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抗人肝癌相关基因LAPTM4β胞内肽段单克隆抗体的制备与鉴定及其表达的检测
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的制备和鉴定鼠抗人肝癌相关基因溶酶体相关四次跨膜蛋白β胞内99个氨基酸残基（LAPTM4β-IC-N1-99）的单克隆抗体,检测LAPTM4β在肝癌中的表达,为深入研究其结构和功能奠定基础。方法利用本实验室构建原核表达质粒pGEX-KG-LAPTM4β-IC-N1-99,在大肠杆菌中表达融合蛋白GST-LAPTM4β-IC-N1-99。用纯化的蛋白LAPTM4β-IC-N1-99免疫雌性BALB/C小鼠,以常规杂交瘤技术制备鼠抗人LAPTM4β-IC-N1-99单克隆抗体（LAPTM4β-IC-N1 ...
张瑞娟 +5 more
doaj
The Clinical Signifcance of Expression of ERCC1 and PKCalpha in Non-small Cell Lung Cancer [PDF]
, 2010 Background and objective Excision repair cross-complementing 1 (Excision-Repair Cross-Complementing 1, ERCC1), an important member of the DNA repair gene family, plays a key role in nucleotide excision repair and apoptosis of tumor cells.
Guangming LI +6 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】制备抗食管癌细胞核仁抗原单克隆抗体,用于寻找肿瘤的标志物和癌的病理诊断。【方法】以食管癌组 织核基质为抗原,采用足垫法免疫 Balb/c 小鼠,运用杂交瘤技术建立分泌特异性单抗的杂交瘤细胞株, 制备食管癌细胞抗原 片和食管癌冰冻切片,采用免疫组化检测并采用蛋白印迹法(Western blotting)分析, 鉴定是否为特异性单克隆抗体。【结果】 获得一细胞株( 1 -7/E)能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,1-7/E 能与食管癌细胞和其他 10 种癌细胞的核仁反应, 不与正常食 管上皮细胞核仁反应。
刘乐和, 沈忠英
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Development of Novel Immunoassays for Varicella Zoster Virus (VZV) Vaccine and Preliminary Study on Functional Domain of ORF7 protein [PDF]
, 2016 水痘-带状疱疹病毒(Varicella-ZosterVirus，VZV)是水痘和带状疱疹的病原体。VZV具有高度传染性，初次感染可引发水痘，并可潜伏于患者背根神经节，在年老或免疫力低下时可能激活导致带状疱疹，具有严重的危害性。接种疫苗是预防VZV感染的有效方式，但目前使用的VZV减毒活疫苗株v-Oka仍具有感染和潜伏人神经系统的能力，安全隐患不容忽视，因此，亟需研制更为安全有效的新型疫苗。高效、精确的免疫分析技术体系是研制新型疫苗的重要基础。VZV是一种基因组约125Kb，拥有70个ORF ...
刘剑
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9 9mTc-C50-F(ab′)2 放射免疫显像早期诊断卵巢癌的实验研究
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】探讨单克隆抗体(McAB)的F(ab′)2 片段在卵巢癌放射免疫显像诊断中的应用价值。【方法】利用胃蛋 白酶消化抗癌胚抗原单克隆抗体(C50), 酶切产物经SDS-PAGE 电泳鉴定后, 经Sephadex G-100 凝胶柱纯化, 获得F(ab′)2 片 段。分别将99mTc 标记的C50 , F(ab′)2 及正常鼠I gG 行荷人卵巢癌裸鼠移植瘤放免显像, 并比较其结果。【结果】①片段F (ab′)2 的产率为33 %±3.2 %, 其最大理论产率的49 ...
张丙忠 +3 more
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