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Construction of sST2 Double Antibody Sandwich ELISA Kit and the Application in Heart Failure [PDF]
目的: 构建sST2重组蛋白以制备单克隆抗体,利用sST2单克隆抗体构建双抗体夹心ELISA试剂盒,用于临床人血清中sST2的检测。评估sST2在心力衰竭中的诊断价值,并比较sST2、NT-proBNP与肾功能的相关性。 方法: 1.对人sST2基因进行PCR扩增,将目的片段和PET-30a载体连接,构建重组质粒。将重组质粒转入到大肠杆菌中进行原核表达,并通过镍离子亲和柱对sST2蛋白进行纯化。然后用sST2蛋白免疫BALB/c小鼠,制备sST2高亲和力的特异性单克隆抗体。 2.采用生物素亲和素系统 ...
叶春蕾
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目的探讨流式细胞术免疫分型在多发性骨髓瘤(MM)诊断中的价值。方法应用多参数流式细胞仪检测35例MM和10例继发性单克隆免疫球蛋白血症骨髓细胞免疫表型。结果 35例MM患者表达CD38、CD138强阳性,平均荧光强度(MFI)分别为695.2±120.69、56.23±436.2。CD45阴性或弱阳性。33例MM患者CD19阴性。32例MM患者表达CD56强阳性,MFI为779.9±241.0。10例继发性单克隆免疫球蛋白血症患者表达CD38、CD138强阳性,MFI分别为621.3±82.8、549 ...
丁润生, 秦燕, 陆伟, 刘红
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Study on Gene Cloning, Expression and Characterization of Stylicin and Invertebrate Lysozyme in Marsupenaeus japonicus [PDF]
日本囊对虾(Musupenaeusjaponicus)是我国沿海重要养殖对虾品种,具有非常高的经济价值。近年来日本囊对虾养殖规模受病害影响停滞不前,尤其是白斑综合症病毒(WSSV)等病毒性对虾病对日本囊对虾养殖产业造成严重的经济损失。目前,对虾病毒病的预防和治疗的方法效果均十分有限,而滥用乱用药物易诱发水质污染和药物残留等严重问题。因此,尽快找到环保高效的治疗方法与策略,成为当前海水对虾养殖产业迫切需要解决的重要科学问题。抗菌肽(AMPs)是对虾抵御病原入侵的一类重要的非特异性免疫成分,其抗细菌、真菌 ...
刘洪涛
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【目的】 制备均一性和特异性高的抗组氨酰-tRNA 合成酶抗体,为研究皮肌炎和多肌炎的检测提供方法,为制备检测试剂盒提供原料?【方法】 采用常规融合和间接ELISA检测法,获取杂交瘤细胞株;Protein G Sepharose 4FF和Sephadex G50结合对含有单克隆抗体的腹水进行纯化;SDS-PAGA电泳技术进行单克隆抗体的鉴定?【结果】 筛选获得了2株稳定分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为W001和W002;杂交瘤细胞克隆后,100%的检测孔保持了分泌抗组氨酰-tRNA合成酶抗体的能力;
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抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的特异性及其识别抗原表位的初步鉴定 [PDF]
为了明确抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体的特异性,并鉴定其识别表位,首先在E.coli中表达了人类冠状病毒229E(HCoV-229E)和OC43(HCoV-OC4)N蛋白,用Westernblotting和间接免疫荧光方法分别检测了4株抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体(1-1C2、1-1D6、2-8F11和2-2E5)与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白的交叉反应情况,而后应用12种重组截短型SARS-CoVN蛋白对上述4种单克隆抗体的识别表位进行了初步定位。结果显示:(1 ...
夏宁邵 +8 more
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从两例萄糖一6一磷酸脱氢酶变异型——台湾客家型[Gd(-)Taiwan-Hakka]患者基因组DNA中,回收经EcORⅠ完全酶解的3~5 kb片段,与载体λgt10插入重组,用SMR10单菌种系统制备包装提取物,对重组的λgt10进行体外包装,构建成两个基因组基因文库。用32P中标记的G6 PDcDNA成功地从文库中初选出12个阳性克隆,挑选其中4个阳性克隆再次杂交予以证实,提取其中2个克隆DNA,经限制酸酶切电泳及斑点杂交鉴定,分离到该变异型基因的插入片段,并将其克隆到M13 mP19噬菌体,完成Gd(
doaj
[Monoclonal B-lymphocytosis complicated with chronic myelomonocytic leukemia and immune thrombocytopenia: a case report]. [PDF]
Qiu JY, Sha YQ, Shen H, Li JY, Zhu HY.
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单克隆抗体(MCAb)在科研及影像诊断等领域应用十分广泛,鼠源性单克隆抗体,由于其抗原性,在人体疾病治疗应用受到限制,利用dnA重组技术,构建各种重组抗体基因,表达制备重组抗体,可降低其抗原性,前提是必须获得其可变区基因,我们利用设计合成的一对鼠抗体 ...
史依仁, 郭先健, 颜江华
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9 9mTc-C50-F(ab′)2 放射免疫显像早期诊断卵巢癌的实验研究
【目的】探讨单克隆抗体(McAB)的F(ab′)2 片段在卵巢癌放射免疫显像诊断中的应用价值。【方法】利用胃蛋 白酶消化抗癌胚抗原单克隆抗体(C50), 酶切产物经SDS-PAGE 电泳鉴定后, 经Sephadex G-100 凝胶柱纯化, 获得F(ab′)2 片 段。分别将99mTc 标记的C50 , F(ab′)2 及正常鼠I gG 行荷人卵巢癌裸鼠移植瘤放免显像, 并比较其结果。【结果】①片段F (ab′)2 的产率为33 %±3.2 %, 其最大理论产率的49 ...
张丙忠 +3 more
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目的建立ELISA测定血清S100B蛋白的方法。方法制备S100B单克隆和多克隆抗体,以双抗体夹心法测定血清S100B蛋白。结果方法的平均回收率为93.7%-104%,批内及批间平均变异分别为3.7%和5.9%,方法的线性为0-12.5μg/l,参考值范围为0.14-0.38μg/l。结论该法简便、快速、特异、敏感,适于临床常规应用。
孙志, 荣墨克, 金淑杰, 单桂芬
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