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Construction of CHO cell lines for high-efficient expression of recombinant proteins [PDF]
作为抗体药物的主力军,单克隆抗体(Monoclonalantibodies,简称mAbs)已成为世界生物制药行业的研究热点。本实验室已研制出具有开发为创新药物潜力的抗体需要进行大量表达用于临床前研究。抗体药物在开发阶段以及产业化阶段需要以稳定表达的方式进行生产,因此建立一个高效快速的稳定细胞株筛选平台对推进抗体药物的研发进程具有重要意义。 本研究首先构建了真核细胞表达质粒pNIDVD-GFP&mCherry,以绿色荧光蛋白GFP与红色荧光蛋白mCherry为荧光报告蛋白,将细胞株筛选流程可视化;以CHO-
杨奕
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Preparation and Characterization of Anti-Neuropilin2 Monoclonal Antibody and Its Preliminary Application [PDF]
研究背景和目的 Neuropilin2(NRP2)是一种多功能的新型受体,在神经系统发育、心血管系统、免疫系统及淋巴管生成等过程中发挥重要作用。最新研究表明,NRP2受体广泛表达于肿瘤细胞表面,与肿瘤血管形成以及肿瘤的发生发展、凋亡、粘附、侵袭和转移等生物学行为密切相关。多种肿瘤细胞均高表达NRP2,提示NRP2可能成为一种新型肿瘤标志物。NRP2通过多种机制调控肿瘤进展,NRP2-b1b2是其发挥作用的重要结构域,NRP2-b1b2结构域可以结合配体Ⅲ型Semaphorin和VEGF ...
杨芸
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USP4 inhibits p53 and NF-κB through deubiquitinating and stabilizing HDAC2 [PDF]
蛋白泛素化/去泛素化修饰的异常与多种肿瘤的发生存在密切相关。作为去泛素化酶家族中的重要一员,USP4在一些肺癌细胞及其它人类癌细胞中呈现出高表达,说明USP4可能作为癌蛋白(oncoprotein)参与到对肿瘤细胞发生发展的调控。而目前对USP4参与肿瘤细胞发生的分子机制尚不清楚。我们的前期研究发现,USP4可以与去乙酰基转移酶HDAC2结合。初步研究表明USP4可以去泛素化并稳定HDAC2。进一步的研究发现,USP4通过HDAC2抑制p53的转录活性及NF-κB信号通路。在本项申请中 ...
李增鹏
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克隆浅释于永利作者单位:130021长春,白求恩医科大学免疫学教研室关于克隆羊的报道在全世界引起了轩然大波,一时间“克隆”成了一个十分风行的词。本文将从医学的角度对克隆做一简要的解释。克隆(clone)一词来源于希腊文(Klon),指从一个个体经无性...
于永利
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Development of a novel fast immunoassay for HBV genotyping and study on the clinical significance of the quantitative hepatitis B core antibody level [PDF]
乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV)感染是一个严重的,世界范围内的公共卫生问题,可以导致肝炎,肝硬化(LC)和肝细胞癌(HCC),每年可以引起100万以上的人死亡。在HBV感染的临床诊断中,不同的HBV相关标志物指示了病毒产生,病毒多态性以及宿主免疫反应三个方面,从而全面了解HBV感染者的疾病状态,预测自然转归和治疗应答,监测疾病进展和治疗效果,对HBV感染者的管理和治疗起到关键的指导作用。目前在指示病毒产生的标志物方面,HBsAg,HBVDNA和HBeAg的检测手段相对成熟 ...
宋浏伟
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目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,
赵桂梅 +3 more
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Thalidomide combined with co-stimulatory molecules blockade prolongs survival of cardiac allografts in alloantigen-primed mice [PDF]
目的:体内预存的各种记忆细胞是器官移植中的重要障碍。记忆细胞对侵入的病原体产生强烈的免疫反应,但同时会导致移植物发生排斥。研究发现,沙利度胺在初次器官移植中具有抑制免疫排斥反应的作用,但其作用机制仍不明确。沙利度胺在器官移植中的潜在作用,很有可能使其成为作用于新靶点、高效低毒的免疫抑制剂。这里,我们拟研究沙利度胺联合共刺激分子阻断剂对皮肤预致敏小鼠心脏移植物生存期的作用,并探讨其在免疫记忆中的作用机制。 方法:首先通过同种异体皮肤移植得到预致敏小鼠,然后随机将皮肤预致敏小鼠分成4组,每组6只。对照组 ...
朱茂述
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目的从单克隆抗体水平研究同种异体肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性,探讨多反应性抗体是否为HLA抗体尤其是非供体特异性抗体产生的原因之一。方法从肾移植患者外周血细胞及手术切除的移植肾组织中分离出B淋巴细胞,并于体外永生化培养获得单克隆B细胞,分别检测B细胞分泌的抗体对HLA抗原及凋亡细胞的反应性。结果共获得107个B细胞克隆,检测发现每个B细胞克隆在体外培养过程中均分泌抗体。其中有4个单克隆B细胞分泌的抗体可以与多种HLA抗原发生反应,而这些HLA抗原之间并非都有共用的抗原决定簇。进一步研究发现,
荣春书, 王伟刚, 连鑫, 高宝山
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目的表达和纯化降钙素原(PCT)基因的融合蛋白,制备PCT融合蛋白的鼠源性单克隆抗体。方法根据GenBank数据库中降钙素原氨基酸序列设计引物,从TT细胞中扩增出降钙素原的全长片段,将其克隆至pEASYE1原核表达载体,构建重组表达质粒pEASY-E1-PCT;利用大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞转化阳性克隆质粒中,以IPTG作为诱导剂诱导表达融合蛋白,通过His镍离子亲和层析纯化目的蛋白,纯化的目的蛋白免疫BALB/c小鼠,获取单克隆抗体并纯化,ELISA法检测抗体效价及交叉鉴定 ...
孙晶莹 +5 more
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Applying TALEN and CRISPR/Cas9 Technique to Knock out the PD1 Gene in Human Primary T Lymphocytes [PDF]
过继性细胞免疫治疗(adoptivecellularimmunotherapy)是将患者自体免疫细胞在体外处理,然后筛选并大量扩增具有高度特异性的肿瘤杀伤性免疫效应细胞,再回输到患者体内杀灭肿瘤的一种治疗方法,过继性T细胞治疗是一种很有前景的癌症治疗方法。体内T细胞在进行免疫应答时,T细胞活化需要双重信号的协同作用,分别是抗原呈递信号和协同刺激信号。协同刺激分子通过为淋巴细胞提供正性或负性的调控信号参与机体的免疫调控。肿瘤细胞会利用体内免疫调节过程,表达或分泌的一些分子,对T细胞进行负向调控 ...
李剑
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