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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen activator,uPA）基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞（SP2/0）融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,
赵桂梅 +3 more
doaj
Thalidomide combined with co-stimulatory molecules blockade prolongs survival of cardiac allografts in alloantigen-primed mice [PDF]
, 2015 目的：体内预存的各种记忆细胞是器官移植中的重要障碍。记忆细胞对侵入的病原体产生强烈的免疫反应，但同时会导致移植物发生排斥。研究发现，沙利度胺在初次器官移植中具有抑制免疫排斥反应的作用，但其作用机制仍不明确。沙利度胺在器官移植中的潜在作用，很有可能使其成为作用于新靶点、高效低毒的免疫抑制剂。这里，我们拟研究沙利度胺联合共刺激分子阻断剂对皮肤预致敏小鼠心脏移植物生存期的作用，并探讨其在免疫记忆中的作用机制。 方法：首先通过同种异体皮肤移植得到预致敏小鼠，然后随机将皮肤预致敏小鼠分成4组，每组6只。对照组 ...
朱茂述
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 1997 克隆浅释于永利作者单位：１３００２１长春，白求恩医科大学免疫学教研室关于克隆羊的报道在全世界引起了轩然大波，一时间“克隆”成了一个十分风行的词。本文将从医学的角度对克隆做一简要的解释。克隆（ｃｌｏｎｅ）一词来源于希腊文（Ｋｌｏｎ），指从一个个体经无性...
于永利
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Affinity Maturation of Human Immunodeficiency Virus Diagnostic Antibody [PDF]
, 2012 9E8是本实验室筛选获得的一株针对人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus，HIV）的鼠源抗体，其亲和力为3.23×10-10M，目前已经成功应用到本实验室开发的HIV诊断试剂盒中，但其灵敏度和特异性都还有待提高。 本研究的目的就是利用噬菌体展示技术对HIV诊断抗体9E8进行亲和力成熟，进一步提高HIV诊断的灵敏度和特异性。首先，用RT-PCR的方法从杂交瘤细胞中调取鼠源抗体9E8的可变区基因，将其构建成单链抗体VH-(G4S)3-VL的形式，展示到噬菌体pIII蛋白上 ...
李善伟
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的表达和纯化降钙素原(PCT)基因的融合蛋白,制备PCT融合蛋白的鼠源性单克隆抗体。方法根据GenBank数据库中降钙素原氨基酸序列设计引物,从TT细胞中扩增出降钙素原的全长片段,将其克隆至pEASYE1原核表达载体,构建重组表达质粒pEASY-E1-PCT;利用大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞转化阳性克隆质粒中,以IPTG作为诱导剂诱导表达融合蛋白,通过His镍离子亲和层析纯化目的蛋白,纯化的目的蛋白免疫BALB/c小鼠,获取单克隆抗体并纯化,ELISA法检测抗体效价及交叉鉴定 ...
孙晶莹 +5 more
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Applying TALEN and CRISPR/Cas9 Technique to Knock out the PD1 Gene in Human Primary T Lymphocytes [PDF]
, 2016 过继性细胞免疫治疗(adoptivecellularimmunotherapy)是将患者自体免疫细胞在体外处理，然后筛选并大量扩增具有高度特异性的肿瘤杀伤性免疫效应细胞，再回输到患者体内杀灭肿瘤的一种治疗方法，过继性T细胞治疗是一种很有前景的癌症治疗方法。体内T细胞在进行免疫应答时，T细胞活化需要双重信号的协同作用，分别是抗原呈递信号和协同刺激信号。协同刺激分子通过为淋巴细胞提供正性或负性的调控信号参与机体的免疫调控。肿瘤细胞会利用体内免疫调节过程，表达或分泌的一些分子，对T细胞进行负向调控 ...
李剑
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的从单克隆抗体水平研究同种异体肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性,探讨多反应性抗体是否为HLA抗体尤其是非供体特异性抗体产生的原因之一。方法从肾移植患者外周血细胞及手术切除的移植肾组织中分离出B淋巴细胞,并于体外永生化培养获得单克隆B细胞,分别检测B细胞分泌的抗体对HLA抗原及凋亡细胞的反应性。结果共获得107个B细胞克隆,检测发现每个B细胞克隆在体外培养过程中均分泌抗体。其中有4个单克隆B细胞分泌的抗体可以与多种HLA抗原发生反应,而这些HLA抗原之间并非都有共用的抗原决定簇。进一步研究发现,
荣春书, 王伟刚, 连鑫, 高宝山
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Establishment of An Effective System to Develop Avian Polyclonal Antibodies and Its Primary Application [PDF]
, 2016 小鼠单克隆抗体技术已成为生物医药领域不可或缺的研究工具，在疾病的诊断和治疗领域也得到广泛应用。然而，由于小鼠自身免疫系统的局限，某些抗原或表位，特别是同为哺乳动物的人体抗原在小鼠体内可能因为种属相近而不易产生好的免疫应答，给制备相应的小鼠单克隆抗体造成一定的困难。因此，有必要基于其它种属动物开发新的抗体制备技术。禽源抗体技术也称卵黄抗体技术（简称IgY技术），是用免疫原刺激禽类动物，产生相应的特异性抗体，该抗体会转运、储存在卵黄中，经特殊的提取技术，可从卵黄中获得大量特异性的多克隆抗体的一种抗体制备技术。
康雅虹
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Critical quality attributes of recombinant virus-like particle based vaccines for effective elicitation of neutralizing antibodies [PDF]
, 2016 人乳头瘤病毒（HumanPapillomavirus，HPV）和戊型肝炎病毒（HepatitisEVirus，HEV）的衣壳蛋白可自组装成病毒样颗粒（Virus-likeparticle，VLP），高度模拟天然病毒颗粒的表面结构，可以激机体产生免疫应答。因此，可以通过研发以VLP为免疫原的疫苗预防病毒的感染及相应疾病的产生。目前，由本实验室与厦门万泰公司联合研发的低危型重组尖锐湿疣疫苗（HPV6/11）已经进入到临床实验阶段，重组戊肝疫苗（Hecolin®）也于2012年上市，因而 ...
李敏
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的制备和鉴定抗胎儿血红蛋白（fetal hemoglobin,HbF）单克隆抗体（mAb）,为相关疾病的研究提供支持与工具。方法用脐带血红细胞裂解物免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞（NS-1）融合制备杂交瘤,经筛选和三次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体。用ELISA以及western blot等方法鉴定单克隆抗体的特性（效价、Ig亚类、特异性以及亲和力）。结果筛选到3株可稳定分泌抗HbF单克隆抗体的杂交瘤细胞6A5、5C8、2C8,腹水效价分别为1×10-6、2×10-6和4×10-
程伟 +4 more
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