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目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,
赵桂梅 +3 more
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克隆浅释于永利作者单位:130021长春,白求恩医科大学免疫学教研室关于克隆羊的报道在全世界引起了轩然大波,一时间“克隆”成了一个十分风行的词。本文将从医学的角度对克隆做一简要的解释。克隆(clone)一词来源于希腊文(Klon),指从一个个体经无性...
于永利
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本发明公开了一种抗鳜鱼弹状病毒糖蛋白的单克隆抗体及其制备方法和应用,以及产生 该单克隆抗体的杂交瘤细胞株SCRV-G-1B2,CCTCC No:C200918。其制备步骤是:以纯化的 鳜鱼弹状病毒为抗原,免疫BALB/c小鼠,经细胞融合,产生融合的杂交瘤细胞,再经间接 ELISA筛选和有限稀释法单克隆化,获得稳定分泌抗鳜鱼弹状病毒糖蛋白单克隆抗体的杂交 瘤细胞株。本发明能获得活性更高、特异性更强、数量更多的鼠脾脏淋巴细胞,以保证所 获得的融合杂交瘤细胞效果更好 ...
张奇亚, 陈中元
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抗肺癌单克隆抗体在裸鼠移植瘤中的放射免疫显像俞浩,瞿跃进,颜江华,盛荣宗,林月华俞丹,苏新辉,毛利娜,苏金华,杨善民我们用131I标记抗肺癌单克隆抗体(MCAb3d3)在移植人肺腺癌裸鼠中进行显像,并研究裸鼠体内生物学分布,现将结果报道如下.材料和方..
俞浩 +9 more
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单克隆抗体(MCAb)在科研及影像诊断等领域应用十分广泛,鼠源性单克隆抗体,由于其抗原性,在人体疾病治疗应用受到限制,利用dnA重组技术,构建各种重组抗体基因,表达制备重组抗体,可降低其抗原性,前提是必须获得其可变区基因,我们利用设计合成的一对鼠抗体 ...
郭先健, 颜江华, 史依仁
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目的表达和纯化降钙素原(PCT)基因的融合蛋白,制备PCT融合蛋白的鼠源性单克隆抗体。方法根据GenBank数据库中降钙素原氨基酸序列设计引物,从TT细胞中扩增出降钙素原的全长片段,将其克隆至pEASYE1原核表达载体,构建重组表达质粒pEASY-E1-PCT;利用大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞转化阳性克隆质粒中,以IPTG作为诱导剂诱导表达融合蛋白,通过His镍离子亲和层析纯化目的蛋白,纯化的目的蛋白免疫BALB/c小鼠,获取单克隆抗体并纯化,ELISA法检测抗体效价及交叉鉴定 ...
孙晶莹 +5 more
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目的从单克隆抗体水平研究同种异体肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性,探讨多反应性抗体是否为HLA抗体尤其是非供体特异性抗体产生的原因之一。方法从肾移植患者外周血细胞及手术切除的移植肾组织中分离出B淋巴细胞,并于体外永生化培养获得单克隆B细胞,分别检测B细胞分泌的抗体对HLA抗原及凋亡细胞的反应性。结果共获得107个B细胞克隆,检测发现每个B细胞克隆在体外培养过程中均分泌抗体。其中有4个单克隆B细胞分泌的抗体可以与多种HLA抗原发生反应,而这些HLA抗原之间并非都有共用的抗原决定簇。进一步研究发现,
荣春书, 王伟刚, 连鑫, 高宝山
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目的制备和鉴定抗胎儿血红蛋白(fetal hemoglobin,HbF)单克隆抗体(mAb),为相关疾病的研究提供支持与工具。方法用脐带血红细胞裂解物免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(NS-1)融合制备杂交瘤,经筛选和三次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体。用ELISA以及western blot等方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力)。结果筛选到3株可稳定分泌抗HbF单克隆抗体的杂交瘤细胞6A5、5C8、2C8,腹水效价分别为1×10-6、2×10-6和4×10-
程伟 +4 more
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