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抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1的扩增和鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2007
目的制备纯化的抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1。方法给Balb/c小鼠腹腔注射BDI-1杂交瘤细胞,收集的腹水过Protein G-agaros亲和层析柱即得到人膀胱癌BDI-1单克隆抗体。采用ELISA法、间接免疫荧光法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和点印迹法鉴定单克隆抗体。结果每毫升腹水可以得到1-1.5mg的高效价(106)的纯化抗体。结论该方法可以扩增高效价的单克隆抗体.
潘雪娜   +3 more
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呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体的制备 [PDF]

open access: yes, 2018
目的:制备人呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体,并对其进行性质鉴定。方法:选取RSV-A2 L蛋白上具有亲水性可能的loop区段,将这些目的片段展示在HBc149上进行原核表达并纯化。重组蛋白免疫6~8周BALB/c雌性小鼠,根据免疫后血清的ELISA和WB分析结果选择L3935和L4099组小鼠进行脾脏免疫。融合后,用间接ELISA法筛选和多次克隆化,获得稳定分泌抗L蛋白单克隆抗体细胞株,并结合ELISA、免疫荧光和免疫印迹对所获得的单抗进行鉴定。结果:获得11株L蛋白特异性单克隆抗体,亚类鉴定结果 ...
张伟   +5 more
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人H-FABP单克隆抗体制备和纯化及其特性鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的制备人心肌型脂肪酸结合蛋白(Heart type fatty acid-binding protein;H-FABP)单克隆抗体。方法(1)应用淋巴细胞杂交瘤技术,将重组人H-FABP腹腔注射免疫BALB/C小鼠。(2)将鼠脾细胞与鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合、培养。通过HAT和间接ELISA法筛选、鉴定制备稳定分泌抗人H-FABP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。(3)利用Protein G Sepharose 4 Fast Flow亲合纯化体内诱生法制备的腹水抗体,并对抗体特性进行鉴定 ...
许淑芬   +5 more
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单克隆抗体人源化研究进展 [PDF]

open access: yes, 2002
目前单克隆抗体大多数是鼠源的 ,在临床重复给药的治疗过程中有许多副作用。由于技术限制 ,最好的解决方法就是研制人源化抗体 ,以代替鼠源单抗用于临床 ...
顾颖
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人uPA基因克隆和单克隆抗体的制备及其在乳腺癌中表达的检测

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,
赵桂梅   +3 more
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肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2016
目的从单克隆抗体水平研究同种异体肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性,探讨多反应性抗体是否为HLA抗体尤其是非供体特异性抗体产生的原因之一。方法从肾移植患者外周血细胞及手术切除的移植肾组织中分离出B淋巴细胞,并于体外永生化培养获得单克隆B细胞,分别检测B细胞分泌的抗体对HLA抗原及凋亡细胞的反应性。结果共获得107个B细胞克隆,检测发现每个B细胞克隆在体外培养过程中均分泌抗体。其中有4个单克隆B细胞分泌的抗体可以与多种HLA抗原发生反应,而这些HLA抗原之间并非都有共用的抗原决定簇。进一步研究发现,
荣春书, 王伟刚, 连鑫, 高宝山
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抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的特异性及其识别抗原表位的初步鉴定 [PDF]

open access: yes, 2006
为了明确抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体的特异性,并鉴定其识别表位,首先在E.coli中表达了人类冠状病毒229E(HCoV-229E)和OC43(HCoV-OC4)N蛋白,用Westernblotting和间接免疫荧光方法分别检测了4株抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体(1-1C2、1-1D6、2-8F11和2-2E5)与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白的交叉反应情况,而后应用12种重组截短型SARS-CoVN蛋白对上述4种单克隆抗体的识别表位进行了初步定位。结果显示:(1 ...
闫克夏   +8 more
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抗鳜鱼弹状病毒糖蛋白的单克隆抗体及其制备方法和应用

open access: yes, 2011
 本发明公开了一种抗鳜鱼弹状病毒糖蛋白的单克隆抗体及其制备方法和应用,以及产生 该单克隆抗体的杂交瘤细胞株SCRV-G-1B2,CCTCC No:C200918。其制备步骤是:以纯化的 鳜鱼弹状病毒为抗原,免疫BALB/c小鼠,经细胞融合,产生融合的杂交瘤细胞,再经间接 ELISA筛选和有限稀释法单克隆化,获得稳定分泌抗鳜鱼弹状病毒糖蛋白单克隆抗体的杂交 瘤细胞株。本发明能获得活性更高、特异性更强、数量更多的鼠脾脏淋巴细胞,以保证所 获得的融合杂交瘤细胞效果更好 ...
张奇亚, 陈中元
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抗人肺癌单克隆抗体3D_3scFv基因构建及其在E.coli中的表达 [PDF]

open access: yes, 1998
由于免疫原性,鼠源性单克隆抗体在人体疾病治疗方面受到限制,运用基因重组技术,将抗体轻链、重链可变区基因连接,构建单链fV(SCfV)基因.表达制备SCfV片段,由于其分子小,免疫原性弱,有潜在应用前景.本实验将获得的抗人肺癌单克隆抗体轻重链可变区基因,通过lInkEr基因序列连接并克隆至PIg20表达载体,表达制备抗人肺癌SCfV融合蛋白.现报道如下.l材料与方法1.1抗人肺癌单克隆抗体3d_3(MCAb3d_3)重链可变区基因(VH)克隆至表达载体PIg20,以SMAⅠ ...
郭先健   +3 more
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克隆浅释

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 1997
克隆浅释于永利作者单位:130021长春,白求恩医科大学免疫学教研室关于克隆羊的报道在全世界引起了轩然大波,一时间“克隆”成了一个十分风行的词。本文将从医学的角度对克隆做一简要的解释。克隆(clone)一词来源于希腊文(Klon),指从一个个体经无性...
于永利
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