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抗人肺癌单克隆抗体3D_3scFv基因构建及其在E.coli中的表达 [PDF]

open access: yes, 1998
由于免疫原性,鼠源性单克隆抗体在人体疾病治疗方面受到限制,运用基因重组技术,将抗体轻链、重链可变区基因连接,构建单链fV(SCfV)基因.表达制备SCfV片段,由于其分子小,免疫原性弱,有潜在应用前景.本实验将获得的抗人肺癌单克隆抗体轻重链可变区基因,通过lInkEr基因序列连接并克隆至PIg20表达载体,表达制备抗人肺癌SCfV融合蛋白.现报道如下.l材料与方法1.1抗人肺癌单克隆抗体3d_3(MCAb3d_3)重链可变区基因(VH)克隆至表达载体PIg20,以SMAⅠ ...
郭先健   +3 more
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抗鳜鱼弹状病毒糖蛋白的单克隆抗体及其制备方法和应用

open access: yes, 2011
 本发明公开了一种抗鳜鱼弹状病毒糖蛋白的单克隆抗体及其制备方法和应用,以及产生 该单克隆抗体的杂交瘤细胞株SCRV-G-1B2,CCTCC No:C200918。其制备步骤是:以纯化的 鳜鱼弹状病毒为抗原,免疫BALB/c小鼠,经细胞融合,产生融合的杂交瘤细胞,再经间接 ELISA筛选和有限稀释法单克隆化,获得稳定分泌抗鳜鱼弹状病毒糖蛋白单克隆抗体的杂交 瘤细胞株。本发明能获得活性更高、特异性更强、数量更多的鼠脾脏淋巴细胞,以保证所 获得的融合杂交瘤细胞效果更好 ...
张奇亚, 陈中元
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降钙素原单克隆抗体的制备及鉴定应用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2020
目的表达和纯化降钙素原(PCT)基因的融合蛋白,制备PCT融合蛋白的鼠源性单克隆抗体。方法根据GenBank数据库中降钙素原氨基酸序列设计引物,从TT细胞中扩增出降钙素原的全长片段,将其克隆至pEASYE1原核表达载体,构建重组表达质粒pEASY-E1-PCT;利用大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞转化阳性克隆质粒中,以IPTG作为诱导剂诱导表达融合蛋白,通过His镍离子亲和层析纯化目的蛋白,纯化的目的蛋白免疫BALB/c小鼠,获取单克隆抗体并纯化,ELISA法检测抗体效价及交叉鉴定 ...
孙晶莹   +5 more
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全长基因的克隆

open access: yes, 2005
新基因全长cDNA序列、全长DNA序列的获得常常是分子生物学工作者面临的难题。本文就克隆全长基因的各种技术如文库筛选法 ...
王闵霞, 谭红, 代富英, 马欣荣
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肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2016
目的从单克隆抗体水平研究同种异体肾移植受者多反应性抗体与HLA抗体的相关性,探讨多反应性抗体是否为HLA抗体尤其是非供体特异性抗体产生的原因之一。方法从肾移植患者外周血细胞及手术切除的移植肾组织中分离出B淋巴细胞,并于体外永生化培养获得单克隆B细胞,分别检测B细胞分泌的抗体对HLA抗原及凋亡细胞的反应性。结果共获得107个B细胞克隆,检测发现每个B细胞克隆在体外培养过程中均分泌抗体。其中有4个单克隆B细胞分泌的抗体可以与多种HLA抗原发生反应,而这些HLA抗原之间并非都有共用的抗原决定簇。进一步研究发现,
荣春书, 王伟刚, 连鑫, 高宝山
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单克隆抗体3D3重链可变区基因结构分析 [PDF]

open access: yes, 1999
单克隆抗体(MCAb)在科研及影像诊断等领域应用十分广泛,鼠源性单克隆抗体,由于其抗原性,在人体疾病治疗应用受到限制,利用dnA重组技术,构建各种重组抗体基因,表达制备重组抗体,可降低其抗原性,前提是必须获得其可变区基因,我们利用设计合成的一对鼠抗体 ...
郭先健, 颜江华, 史依仁
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抗肺癌单克隆抗体在裸鼠移植瘤中的放射免疫显像 [PDF]

open access: yes, 1995
抗肺癌单克隆抗体在裸鼠移植瘤中的放射免疫显像俞浩,瞿跃进,颜江华,盛荣宗,林月华俞丹,苏新辉,毛利娜,苏金华,杨善民我们用131I标记抗肺癌单克隆抗体(MCAb3d3)在移植人肺腺癌裸鼠中进行显像,并研究裸鼠体内生物学分布,现将结果报道如下.材料和方..
俞浩   +9 more
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抗胎儿血红蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的制备和鉴定抗胎儿血红蛋白(fetal hemoglobin,HbF)单克隆抗体(mAb),为相关疾病的研究提供支持与工具。方法用脐带血红细胞裂解物免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(NS-1)融合制备杂交瘤,经筛选和三次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体。用ELISA以及western blot等方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力)。结果筛选到3株可稳定分泌抗HbF单克隆抗体的杂交瘤细胞6A5、5C8、2C8,腹水效价分别为1×10-6、2×10-6和4×10-
程伟   +4 more
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ELISA定量测定单克隆抗体方法改进 [PDF]

open access: yes, 1991
本文介绍了以亲和层析纯化的免抗鼠IgG类抗体及其酶标物作为捕获及检测抗体进行鼠杂交瘤培养上清及腹水中IgG类单克隆抗体的ELISA定量测定方法。结果表明:小牛血清(BS)、免血清(RS)、马血滑(HS)、人血清(HuS)及非抗体产生细胞的培养上清对本项εLISA实验无干扰,使测定的结果较可靠,测定的鼠IgG各亚类的标准曲线的线性范围均在5~100ng/ml之间,因此这个快速 ...
陈瑞川, 卢方, 卢玉英
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邻苯二甲酸单苄酯单克隆抗体的制备

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的制备抗邻苯二甲酸单苄酯(mono-benzyl phthalate,MBzP)的单克隆抗体。方法本实验利用活泼酯法,将邻苯二甲酸单苄酯分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,获得完全抗原MBzP-BSA和MBzP-OVA,用MBzP-BSA免疫Balb/c小鼠,制备杂交瘤细胞,利用ELISA方法检测阳性杂交瘤细胞株分泌抗体的效价。结果获得了稳定分泌抗MBzP的细胞株1B9,以该细胞株体内诱生腹水制备腹水型单克隆抗体,纯化后效价为1∶128 000。结论成功制备了抗邻苯二甲酸单苄酯的单克隆抗体。
李乐   +10 more
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