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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999 目的: 制备从尖吻蝮蛇蛇毒中分离的纤溶因子的单克隆抗体, 为克隆基因提供特异性的探针。方法: 将纤溶因 子免疫 Balb/C 小鼠,取脾细胞与 SP 2/0 骨髓瘤细胞融合, 筛选稳定分泌抗体的细胞株。采用血纤维蛋白平板法,观察单克隆 抗体能否抑制纤溶因子的纤溶作用。结果: 获得 2 株稳定分泌单克隆抗体的细胞株。 Western 印迹显示该单克隆抗体能特异 地与纤溶因子结合,与其它蛋白无交叉反应, 此外,这 2株单克隆抗体具有抑制纤溶因子溶解人血纤维蛋白的作用。结论: 这 2 ...
邱鹏新 黎明涛 苏兴文 陈家树 颜光美
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Zhejiang Daxue xuebao. Lixue ban, 2007 抽提小鼠R5杂交瘤细胞的mRNA，逆转录成cDNA，扩增出R5单抗的轻重链基因.分析克隆到的轻重链基因的序列信息，得到互补决定区(CDR)序列信息.构建真核表达质粒并在真核细胞中表达.采用互补决定区移植（CDR-grafting）的方法人源化鼠源单抗R5基因.先从人种系(germline)抗体基因片段中选出和克隆到的小鼠R5抗体基因具有相同互补决定区正则结构类型(CDR canonical structure class)的片段，合成寡核苷酸并采用PCR重叠延伸(overlap extension ...
YUJun-ming(余君铭) +1 more
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Construction of CHO cell lines for high-efficient expression of recombinant proteins [PDF]
, 2016 作为抗体药物的主力军，单克隆抗体（Monoclonalantibodies，简称mAbs）已成为世界生物制药行业的研究热点。本实验室已研制出具有开发为创新药物潜力的抗体需要进行大量表达用于临床前研究。抗体药物在开发阶段以及产业化阶段需要以稳定表达的方式进行生产，因此建立一个高效快速的稳定细胞株筛选平台对推进抗体药物的研发进程具有重要意义。 本研究首先构建了真核细胞表达质粒pNIDVD-GFP&mCherry，以绿色荧光蛋白GFP与红色荧光蛋白mCherry为荧光报告蛋白，将细胞株筛选流程可视化；以CHO-
杨奕
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的制备纯化的抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1。方法给Balb/c小鼠腹腔注射BDI-1杂交瘤细胞,收集的腹水过Protein G-agaros亲和层析柱即得到人膀胱癌BDI-1单克隆抗体。采用ELISA法、间接免疫荧光法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和点印迹法鉴定单克隆抗体。结果每毫升腹水可以得到1-1.5mg的高效价（106）的纯化抗体。结论该方法可以扩增高效价的单克隆抗体.
潘雪娜 +3 more
doaj
Preparation and Characterization of Semaphorin3Fc Monoclonal Antibody and the Preliminary Application [PDF]
, 2015 研究背景和目的 抑癌基因发生异常是癌症发生的机制之一。人类基因的很多区域发生改变时可导致细胞失控性生长。Sema3F作为肺癌19个候选抑癌基因之一，是Ⅲ型Semaphorin（即神经导向因子，最初作为Neuropilins的配体在神经系统中发挥排斥神经节轴突和调节神经系统发育的作用）家族的一个成员。目前有研究发现，与正常组织相比Sema3F蛋白在肿瘤细胞中的表达普遍存在下调的趋势，并在血管形成以及肿瘤增殖、凋亡、粘附和转移等中起着负向调节作用。此外，诸多体内或者体外实验已经证明 ...
李哲
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的制备人心肌型脂肪酸结合蛋白（Heart type fatty acid-binding protein;H-FABP）单克隆抗体。方法（1）应用淋巴细胞杂交瘤技术,将重组人H-FABP腹腔注射免疫BALB/C小鼠。（2）将鼠脾细胞与鼠骨髓瘤细胞（SP2/0）融合、培养。通过HAT和间接ELISA法筛选、鉴定制备稳定分泌抗人H-FABP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。（3）利用Protein G Sepharose 4 Fast Flow亲合纯化体内诱生法制备的腹水抗体,并对抗体特性进行鉴定 ...
许淑芬 +5 more
doaj
Preparation and Characterization of Anti-Neuropilin2 Monoclonal Antibody and Its Preliminary Application [PDF]
, 2016 研究背景和目的 Neuropilin2（NRP2）是一种多功能的新型受体，在神经系统发育、心血管系统、免疫系统及淋巴管生成等过程中发挥重要作用。最新研究表明，NRP2受体广泛表达于肿瘤细胞表面，与肿瘤血管形成以及肿瘤的发生发展、凋亡、粘附、侵袭和转移等生物学行为密切相关。多种肿瘤细胞均高表达NRP2，提示NRP2可能成为一种新型肿瘤标志物。NRP2通过多种机制调控肿瘤进展，NRP2-b1b2是其发挥作用的重要结构域，NRP2-b1b2结构域可以结合配体Ⅲ型Semaphorin和VEGF ...
杨芸
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Development of a novel fast immunoassay for HBV genotyping and study on the clinical significance of the quantitative hepatitis B core antibody level [PDF]
, 2015 乙型肝炎病毒（HepatitisBvirus,HBV）感染是一个严重的，世界范围内的公共卫生问题，可以导致肝炎，肝硬化（LC）和肝细胞癌（HCC），每年可以引起100万以上的人死亡。在HBV感染的临床诊断中，不同的HBV相关标志物指示了病毒产生，病毒多态性以及宿主免疫反应三个方面，从而全面了解HBV感染者的疾病状态，预测自然转归和治疗应答，监测疾病进展和治疗效果，对HBV感染者的管理和治疗起到关键的指导作用。目前在指示病毒产生的标志物方面，HBsAg，HBVDNA和HBeAg的检测手段相对成熟 ...
宋浏伟
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Affinity Maturation of Human Immunodeficiency Virus Diagnostic Antibody [PDF]
, 2012 9E8是本实验室筛选获得的一株针对人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus，HIV）的鼠源抗体，其亲和力为3.23×10-10M，目前已经成功应用到本实验室开发的HIV诊断试剂盒中，但其灵敏度和特异性都还有待提高。 本研究的目的就是利用噬菌体展示技术对HIV诊断抗体9E8进行亲和力成熟，进一步提高HIV诊断的灵敏度和特异性。首先，用RT-PCR的方法从杂交瘤细胞中调取鼠源抗体9E8的可变区基因，将其构建成单链抗体VH-(G4S)3-VL的形式，展示到噬菌体pIII蛋白上 ...
李善伟
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen activator,uPA）基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞（SP2/0）融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,
赵桂梅 +3 more
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