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人肺癌单克隆抗体3D3重链可变区cDNA克隆及序列测定 [PDF]
人肺癌单克隆抗体3d3重链可变区CdnA克隆及序列测定史依仁颜江华郭先健白雪峰单克隆抗体(MCAb)在科研及影像诊断等领域应用十分广泛,鼠源性单克隆抗体,对人是异种抗原,使其在人类疾病治疗方面的应用受到限制。利用基因重组技术,可构建各种重组抗体基因 ...
郭先健 +3 more
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目的制备针对超嗜热古菌组蛋白HPhA的单克隆抗体并进行鉴定。方法以重组纯化蛋白HPhA为抗原,用聚乙二醇(PEG)法制备杂交瘤细胞,ELISA检测杂交瘤细胞分泌抗体的效价和类型,Western blotting分析抗体的特异性。结果获得3株稳定分泌抗HPhA蛋白的单克隆抗体(MAb),3株单克隆抗体1A12、3C11、3B4分别属于IgG1、IgM和IgG2b亚类。ELISA和Western blotting结果显示,单克隆抗体3B4能特异性结合HPhA及PEA-HPhA重组蛋白 ...
张玲, 郑艳军, 朱平, 张国利
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抽提小鼠R5杂交瘤细胞的mRNA,逆转录成cDNA,扩增出R5单抗的轻重链基因.分析克隆到的轻重链基因的序列信息,得到互补决定区(CDR)序列信息.构建真核表达质粒并在真核细胞中表达.采用互补决定区移植(CDR-grafting)的方法人源化鼠源单抗R5基因.先从人种系(germline)抗体基因片段中选出和克隆到的小鼠R5抗体基因具有相同互补决定区正则结构类型(CDR canonical structure class)的片段,合成寡核苷酸并采用PCR重叠延伸(overlap extension ...
YUJun-ming(余君铭) +1 more
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目的制备纯化的抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1。方法给Balb/c小鼠腹腔注射BDI-1杂交瘤细胞,收集的腹水过Protein G-agaros亲和层析柱即得到人膀胱癌BDI-1单克隆抗体。采用ELISA法、间接免疫荧光法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和点印迹法鉴定单克隆抗体。结果每毫升腹水可以得到1-1.5mg的高效价(106)的纯化抗体。结论该方法可以扩增高效价的单克隆抗体.
潘雪娜 +3 more
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目的:制备人呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体,并对其进行性质鉴定。方法:选取RSV-A2 L蛋白上具有亲水性可能的loop区段,将这些目的片段展示在HBc149上进行原核表达并纯化。重组蛋白免疫6~8周BALB/c雌性小鼠,根据免疫后血清的ELISA和WB分析结果选择L3935和L4099组小鼠进行脾脏免疫。融合后,用间接ELISA法筛选和多次克隆化,获得稳定分泌抗L蛋白单克隆抗体细胞株,并结合ELISA、免疫荧光和免疫印迹对所获得的单抗进行鉴定。结果:获得11株L蛋白特异性单克隆抗体,亚类鉴定结果 ...
张伟 +5 more
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目的制备人心肌型脂肪酸结合蛋白(Heart type fatty acid-binding protein;H-FABP)单克隆抗体。方法(1)应用淋巴细胞杂交瘤技术,将重组人H-FABP腹腔注射免疫BALB/C小鼠。(2)将鼠脾细胞与鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合、培养。通过HAT和间接ELISA法筛选、鉴定制备稳定分泌抗人H-FABP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。(3)利用Protein G Sepharose 4 Fast Flow亲合纯化体内诱生法制备的腹水抗体,并对抗体特性进行鉴定 ...
许淑芬 +5 more
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目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,
赵桂梅 +3 more
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抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的特异性及其识别抗原表位的初步鉴定 [PDF]
为了明确抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体的特异性,并鉴定其识别表位,首先在E.coli中表达了人类冠状病毒229E(HCoV-229E)和OC43(HCoV-OC4)N蛋白,用Westernblotting和间接免疫荧光方法分别检测了4株抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体(1-1C2、1-1D6、2-8F11和2-2E5)与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白的交叉反应情况,而后应用12种重组截短型SARS-CoVN蛋白对上述4种单克隆抗体的识别表位进行了初步定位。结果显示:(1 ...
闫克夏 +8 more
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克隆浅释于永利作者单位:130021长春,白求恩医科大学免疫学教研室关于克隆羊的报道在全世界引起了轩然大波,一时间“克隆”成了一个十分风行的词。本文将从医学的角度对克隆做一简要的解释。克隆(clone)一词来源于希腊文(Klon),指从一个个体经无性...
于永利
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