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Affinity Maturation of Human Immunodeficiency Virus Diagnostic Antibody [PDF]
9E8是本实验室筛选获得的一株针对人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiencyVirus,HIV)的鼠源抗体,其亲和力为3.23×10-10M,目前已经成功应用到本实验室开发的HIV诊断试剂盒中,但其灵敏度和特异性都还有待提高。 本研究的目的就是利用噬菌体展示技术对HIV诊断抗体9E8进行亲和力成熟,进一步提高HIV诊断的灵敏度和特异性。首先,用RT-PCR的方法从杂交瘤细胞中调取鼠源抗体9E8的可变区基因,将其构建成单链抗体VH-(G4S)3-VL的形式,展示到噬菌体pIII蛋白上 ...
李善伟
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Establishment of An Effective System to Develop Avian Polyclonal Antibodies and Its Primary Application [PDF]
小鼠单克隆抗体技术已成为生物医药领域不可或缺的研究工具,在疾病的诊断和治疗领域也得到广泛应用。然而,由于小鼠自身免疫系统的局限,某些抗原或表位,特别是同为哺乳动物的人体抗原在小鼠体内可能因为种属相近而不易产生好的免疫应答,给制备相应的小鼠单克隆抗体造成一定的困难。因此,有必要基于其它种属动物开发新的抗体制备技术。禽源抗体技术也称卵黄抗体技术(简称IgY技术),是用免疫原刺激禽类动物,产生相应的特异性抗体,该抗体会转运、储存在卵黄中,经特殊的提取技术,可从卵黄中获得大量特异性的多克隆抗体的一种抗体制备技术。
康雅虹
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目的制备和鉴定抗胎儿血红蛋白(fetal hemoglobin,HbF)单克隆抗体(mAb),为相关疾病的研究提供支持与工具。方法用脐带血红细胞裂解物免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(NS-1)融合制备杂交瘤,经筛选和三次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体。用ELISA以及western blot等方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力)。结果筛选到3株可稳定分泌抗HbF单克隆抗体的杂交瘤细胞6A5、5C8、2C8,腹水效价分别为1×10-6、2×10-6和4×10-
程伟 +4 more
doaj
Critical quality attributes of recombinant virus-like particle based vaccines for effective elicitation of neutralizing antibodies [PDF]
人乳头瘤病毒(HumanPapillomavirus,HPV)和戊型肝炎病毒(HepatitisEVirus,HEV)的衣壳蛋白可自组装成病毒样颗粒(Virus-likeparticle,VLP),高度模拟天然病毒颗粒的表面结构,可以激机体产生免疫应答。因此,可以通过研发以VLP为免疫原的疫苗预防病毒的感染及相应疾病的产生。目前,由本实验室与厦门万泰公司联合研发的低危型重组尖锐湿疣疫苗(HPV6/11)已经进入到临床实验阶段,重组戊肝疫苗(Hecolin®)也于2012年上市,因而 ...
李敏
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目的制备抗邻苯二甲酸单苄酯(mono-benzyl phthalate,MBzP)的单克隆抗体。方法本实验利用活泼酯法,将邻苯二甲酸单苄酯分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,获得完全抗原MBzP-BSA和MBzP-OVA,用MBzP-BSA免疫Balb/c小鼠,制备杂交瘤细胞,利用ELISA方法检测阳性杂交瘤细胞株分泌抗体的效价。结果获得了稳定分泌抗MBzP的细胞株1B9,以该细胞株体内诱生腹水制备腹水型单克隆抗体,纯化后效价为1∶128 000。结论成功制备了抗邻苯二甲酸单苄酯的单克隆抗体。
李乐 +10 more
doaj
目的:制备人呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体,并对其进行性质鉴定。方法:选取RSV-A2 L蛋白上具有亲水性可能的loop区段,将这些目的片段展示在HBc149上进行原核表达并纯化。重组蛋白免疫6~8周BALB/c雌性小鼠,根据免疫后血清的ELISA和WB分析结果选择L3935和L4099组小鼠进行脾脏免疫。融合后,用间接ELISA法筛选和多次克隆化,获得稳定分泌抗L蛋白单克隆抗体细胞株,并结合ELISA、免疫荧光和免疫印迹对所获得的单抗进行鉴定。结果:获得11株L蛋白特异性单克隆抗体,亚类鉴定结果 ...
向江艳 +5 more
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目的用基因工程技术表达2′,5′腺苷酸酶(2-5AS)蛋白为抗原制备单克隆抗体,供荧光素标记抗体流式细胞术检测细胞内2-5AS应用。方法将2-5AS基因片段插入到带有His.Tag的pET-30a(+)质粒,并转化到宿主菌E.coli.BL21(DE3),ITPG诱导表达,Ni柱纯化,获得2-5AS蛋白后制备单克隆抗体。结果插入片段酶切测序证实,插入的片段与目的片段序列相符;Ni柱纯化过程中可见目的蛋白的洗脱峰;经Tricine-SDS-PAGE电泳,Western Blotting鉴定,得到表达蛋白 ...
宋玉国, 谭冲, 黄建文, 毕胜利
doaj
单克隆多克隆抗体不同标记ELISA技术对HBeAg/抗-HBe检测评估
采用抗-HBe单克隆和多克隆抗体进行生物素或酶标记作酶免疫试剂检测HBeAg及抗-HBe,结果显示单克隆抗体(McAb)敏感性高于多克隆抗体(PcAb)。生物素试剂在检测HBeAg的稀释度为1:5000,比酶标法ELISA高1倍多,与RIA相当,且稳定性优于RIA。生物素标记抗体至少1年内保持效价不变,1年内批间变异系数为5.8%,相同标本重复检测变异系数为5.94%,是一种较理想的检测e系统的方法之一。另外,研究发现一孔一期法同时测HBeAg/抗-HBe时,无论标记抗体为单克隆或多克隆 ...
doaj
目的制备抗绿脓杆菌单克隆抗体,观察其对绿脓杆菌感染的烧伤小鼠及正常小鼠的保护作用。方法应用NS-1细胞和经绿脓杆菌免疫后的BALB/C小鼠脾细胞制备杂交瘤细胞株,收集其分泌的抗体,观察其对绿脓杆菌感染的Ⅲ°烧伤小鼠及正常小鼠的免疫保护作用。结果该单克隆抗体可预防绿脓杆菌感染。结论我们的研究结果为抗绿脓杆菌单克隆抗体在临床上应用的可行性提供了实验室基础。
温剑平 +3 more
doaj
Systematic Analysis of ApiAP2 Transcription Factor Gene Family in the Rodent Malaria Parasite Plasmodium yoelii [PDF]
疟疾是疟原虫(Plasmodiumspp.)感染导致的蚊媒传染性疾病,疟原虫生活周期复杂,经历了多宿主和多细胞形态的转化,每一步都需要精确地基因时空表达调控,转录因子介导的DNA转录水平的调控起到重要作用。 ApiAP2基因家族是疟原虫基因组中预测的为数极少的转录因子基因家族,在人疟原虫和啮齿类动物疟原虫中高度保守。在顶复体亚门生物(包括疟原虫)和植物中,ApiAP2基因编码蛋白均含有一个或者多个60个氨基酸大小的AP2DNA结合结构域,起到激活或抑制转录的作用。 之前的转录谱和蛋白质组学分析发现 ...
赵伊华
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