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环状芽胞杆菌(Bacillus circulans)基因表达效率调节DNA片段的研究
用大肠杆菌(Escherichiacoli)启动子探针型载体pSUPV1从环状芽胞杆菌(Eacilluaeirculansc-2)基因组中分离的启动子片段BC6能使无启动子的卡那霉素抗性基因恢复活性,并在大肠杆菌中获得高效表达(卡那霉素抗性高达1200μg/mL).当用限制酶XbaⅠ去除其5′-端1.2kb片段(命名为Xb片段)后,3′-端片段仍能启动Kan ̄r基因表达,其抗性水平降至400μg/mL但当1.2kb片段反向插回原有位置时,其抗性水平降至600μg/mL ...
任昶, 张义正
doaj
目的利用ChAT启动子荧光素酶报告系统对中药小分子化合物进行筛选,以期找到能够促进ChAT表达的化合物。方法用构建的ChAT启动子荧光素酶报告体系从400余种中药小分子化合物中筛选ChAT启动子激活剂,并用RT-PCR和Western Blot方法对筛选得到的小分子化合物进行验证。利用免疫印迹法分析筛选得到的化合物对细胞内信号通路的影响。结果通过筛选发现大豆甙元能够激活ChAT启动子的活性,与对照相比具有显著性差异 ...
董明勤 +4 more
doaj
[Diagnostic Efficacy of SHOX2 Gene Hypermethylation for Lung Cancer: A Meta-Analysis]. [PDF]
Liu Q, Wang S, Pei G, Yang Y, Huang Y.
europepmc +1 more source
作者曾用启动子探针型载体pSUPV1,从环状芽孢杆菌C-2菌株(BaciluscirculansC-2)中克隆到一个具有强启动功能的2.4kb片段BC6.对该片段所作的进一步缺失分析表明,其3′端约0.7kb片段具有单独的基因启动子功能.序列分析表明,BC6片段3′端有典型的原核生物的基因启动子结构.现将BC6的5′端的1.2kbXbaⅠ片段重组于pBR322的EcoRI位点,观察其对两侧具有不同转录方向的Ampr与Tcr基因表达的影响.结果表明,该片段能显著地增强或衰减与其紧密相连的Tcr基因的表达 ...
董晓明, 王晓飞, 张义正
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11β-类固醇脱氢酶-2启动子区甲基化与原发性高血压关系初探
目的通过11β-类固醇脱氢酶-2(11β-hydroxysteroid dehydrogenase-2,11β-HSD-2)基因启动子区甲基化发生率的测定,探讨原发性高血压可能的发病机制。方法选取未经治疗的原发性高血压患者64例以及正常对照组30例,Sequenom MassArray质谱法检测11β-HSD-2基因启动子区"-101到461"的563个碱基序列的甲基化发生率。结果原发性高血压组甲基化发生率高且差异有统计学意义,CpG位点如下:CpG7、8、CpG9、CpG62、63、64、CpG65 ...
王述琦, 刘丽秋, 刘海娜
doaj
赤点石斑鱼卵型芳香化酶基因启动子调控绿色荧光蛋白在斑马鱼早期生殖腺中的表达
P450芳香化酶(P450arom)是生物体内合成雌激素的关键酶。为研究赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)卵型芳香化酶基因(EaCyp19a1a)启动子的调控作用,构建了EaCyp19a1a启动子9个不同的5′端缺失片段与绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)组成的表达载体,分别命名为pEaCyp19a1a-EGFP1-9。在COS-7细胞中的瞬时转染实验证明载体pEaCyp19a1a-EGFP7具有很强的转录活性。通过显微注射 ...
李志 +4 more
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针对多通路并联回路板式脉动热管搭建试验台,选用无水乙醇作为工质,在不同的充液率、倾斜角度和加热功率情况下,观测工质的流型以及流动方式的变化,分析脉动热管的启动特性。结果表明,工质的流型为泡状流,汽液塞间隔分布的塞状流,塞状流与环状流并存的混合流,整个通道中不存在完全是环状流的流型;充液率为10%时,工质主要分布在脉动热管的中间部位,充液率为35%~85%,工质分布的均匀性增强;运行过程中工质以塞状流(靠近冷凝端)和环状流(靠近加热端)并存的混合流形式存在,随着加热功率的增加 ...
潘利生, 史维秀, 李惟毅
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利用荧光素酶报告基因法研究转录因子USF1结合调控马鹿
为了探究转录因子上游刺激因子1(USF1)调控马鹿(Cervus elaphus)microRNA PC-5p-4811(miR-4811)基因转录的机理,综合运用核心启动子和转录因子结合位点生物信息学预测分析、基因克隆、点突变和双荧光素酶报告基因法等技术研究USF1结合miR-4811启动子分子机制和功能。结果显示:(1)截切突变证实马鹿miR-4811基因的核心启动子位于上游-3 174 ~ -2 966 bp;(2)转录因子USF1在-3 378 ~ +73 bp区域共有2个DNA结合位点(-3 ...
高仰 +6 more
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目的研究人胃癌细胞系端粒酶逆转录酶基因(hTERT)启动子区域是否存在甲基化,甲基化程度是否与肿瘤的恶性程度相关。方法运用甲基化特异性PCR(MSP)方法,以人乳腺癌细胞、人胚肺成纤维细胞作为阳性及阴性对照,检测中、低分化的胃腺癌细胞系hTERT基因启动子区域甲基化情况。结果端粒酶阳性的胃癌细胞、人乳腺癌细胞均存在甲基化,而端粒酶阴性的人胚肺成纤维细胞不存在甲基化,不同分化程度胃癌细胞的hTERT启动子区CpG位点甲基化情况不同。结论hTERT基因启动子区域的甲基化,与细胞的分化程度相关 ...
王亚东 +3 more
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Cloning and activity analysis of TSHb promoter in red-spotted grouper
促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone (TSH))具有调节生长,发育,代谢和生殖的功能, 但是在低等脊椎动物中的功能研究较少。本试验室汪洋等在研究斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)TSHb时,首次发现其TSHb除在垂体中表达外还在性腺中表达,进一步发现TSHb也在赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)性腺中表达,且在人工诱导的赤点石斑鱼中,随着雄性化的转变,TSHb转录水平升高。为研究石斑鱼TSHb特殊表达的调控机制,采用基因组步移技术 ...
李辰昱
core

