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本发明是一种酶溶性胶原蛋白的制备方法,其特征在于:原料经处理去除杂蛋白和脂肪后,添加醋酸、柠檬酸或盐酸溶液作提取剂进行浸提,同时加入胃蛋白酶,浸提后过滤得酶溶性胶原蛋白粗提液;然后在搅拌条件下向酶溶性胶原蛋白粗提液中加入氢氧化钠溶液调节其pH至7.0-12,静置得蛋白质凝胶,然后取蛋白质凝胶用醋酸、柠檬酸或盐酸溶液溶解,得蛋白质凝胶溶液,再用蒸馏水透析,冷冻干燥,即得酶溶性胶原蛋白。本发明方法更为简单合理,它不使用Tris,除低了生产成本。该方法不仅大大提高了酶溶性胶原蛋白的得率 ...
秦松, 段蕊, 蔡学东, 张俊杰
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本发明涉及恶臭假单胞菌甲醛脱氢酶基因、编码蛋白及重组载体,本发明以恶臭假单胞菌AS 1.643基因组DNA为模板,用PCR方法,分离得到新基因fdhA,编码蛋白质甲醛脱氢酶PFDH。将fdhA克隆于表达载体 pET24b(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中甲醛脱氢酶PFDH一部分以胞内可溶的形式存在,其可溶蛋白表达量为13.7mg/L。通过镍亲和层析纯化,得到纯度为95%以上的重组蛋白PFDH,得率11mg/L。该重组PFDH在NAD+ 存在下催化甲醛脱氢形成甲酸,最高比活可达38U/mg ...
赵宗保, 王金霞
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本发明涉及溶菌酶,具体涉及一种紫贻贝G型溶菌酶基因及其重组蛋白和应用。G型溶菌酶基因如序列表SEQ?ID?NO.1中的碱基序列所示。所述G型溶菌酶基因重组表达产物可制备为抗菌药物、水产品保鲜剂或水产饲料添加剂。本发明紫贻贝G型溶菌酶,包括从感染病菌的紫贻贝中提取总RNA、mRNA纯化、cDNA模板溶液制备、G型溶菌酶基因筛选、基因克隆、重组质粒构建、重组基因表达和重组蛋白纯化步骤得到该G型溶菌酶,该G型溶菌酶的氨基酸序列如序列表SEQ?ID?NO.2所示;该G型溶菌酶属于一类新颖的紫贻贝溶菌酶 ...
赵建民, 王清, 张林宝, 吴惠丰
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TK-1 和 TIMP-1 过表达对大鼠心肌梗死后心室重塑的影响
【目的】探讨重组腺病毒介导的人TK-1和TIMP-1基因过表达对大鼠心肌梗死后的左室(LV)功能、炎症因子表达的影响及其机制。【方法】通过结扎Sprague-Dawley雄性大鼠冠脉左前降支诱导心肌梗死模型。观察假手术组(10只)、生理盐水组(13只)、对照病毒组(13只)、TK-1组(13只)、TIMP-1组(13只)、联合基因组(13只)的大鼠术后的心功能参数改变、心肌梗死面积、及各组大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、核因子-κB(NF-κB ...
郑熙, 余惠珍, 高洁, 朱鹏立
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荞麦种子蛋白质含量为15%~17%,富含赖氨酸、甲硫氨酸、色氨酸等人体必须氨基酸。蛋白质作为荞麦主要的生物活性成分之一,具有特殊的营养保健与生理功能。本文综述了荞麦种子各蛋白组分清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,以及一些特殊功能的蛋白质如荞麦蛋白酶抑制剂、变应原、硫胺素结合蛋白的研究现状 ...
冯波, 舒守贵, 王涛
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FeSO4诱导PC12细胞MMP-9/MMP-2表达变化及对其凋亡的影响
目的探讨硫酸亚铁(FeSO4)诱导的脑出血(ICH)PC12细胞模型中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达变化,以及其对细胞氧化应激和凋亡的影响。方法复苏培养PC12细胞,随机分为ICH模型组和正常细胞组。采用MTT比色法检测两组细胞活力;Hoechst染色法观察细胞凋亡情况并计算凋亡率;比色法测定细胞内Caspase3、Caspase6、Caspase9活性;分光度法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH ...
苑杨 +4 more
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E法相对定量分析动脉粥样硬化患者外周血MMP-9和TIMP-1基因表达
目的通过E方法(效率法)相对定量动脉粥样硬化(AS)患者外周血白细胞基质金属蛋白酶9(MMP9)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)基因表达及其临床意义。方法采用E法对动脉粥样硬化患者(男性61例,女性78例,平均年龄68岁)和健康体检者(男性19例,女性15例,平均年龄33岁)外周血白细胞MMP9和TIMP-1基因表达水平进行相对定量,数据通过SPSS 11.5统计软件进行分析,AS组与健康对照组间MMP9和TIMP-1基因表达水平差异显著性采用两样本t检验。结果 AS组TIMP ...
周春刚, 苏伟, 高枫, 张志斌
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生产具有荧光活性和链霉亲和素标记的藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法及应用
本发明涉及藻蓝蛋白类荧光蛋白质领域,具体为一种生产具有荧光活性和链霉亲和素标记的藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法及应用,通过将链霉亲和素合成基因、藻蓝蛋白亚基合成基因、催化酶合成基因、色基合成基因、标签合成基因等重组于同一表达质粒中,实现多基因的组合表达,通过对诱导、纯化条件的优化,制备具备稳定荧光活性的融合蛋白。采用单一质粒完成荧光活性融合藻胆蛋白的组合表达,避免多质粒在工程菌株中的稳定性及各基因表达的不同步问题,减少发酵过程中的抗生素的使用,有效提高了荧光蛋白质的稳定性 ...
秦松, 焦绪栋
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MMP-2和MMP-9在胃癌患者组织和血清中的表达及临床意义
目的研究胃癌患者血清及其癌组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,探讨与胃癌临床病理参数的关系。方法收集38例胃癌患者的癌组织和术前血清标本,用免疫组织化学PV-9000通用型二步法和ELSIA法对胃癌患者组织及血清中MMP-2和MMP-9的含量与表达检测。结果MMP-2和MMP-9在胃癌组织中的阳性表达率分别为94.7%和86.8%,与淋巴结转移、肿瘤分期显著相关(P0.05);胃癌患者血清中MMP-9的含量明显高于正常对照组,差异有显著性 ...
常静, 薛歆, 刘爱中, 于庭
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壳寡糖激发子可以诱导植物抗性,是一种新型的生物农药。壳寡糖处理烟草可以诱导烟草对烟草花叶病毒的抗性,并且烟草中的一个Ser/Thr蛋白激酶OIPK的转录水平提高;而将OIPK基因反义抑制以后,转基因烟草对烟草花叶病毒的抗性明显降低,推测OIPK可能在壳寡糖诱导的信号转导中起着重要作用。本文对OIPK基因的进一步研究发现,其在烟草中存在三个可能的选择性剪接产物:OIPK、OIPKL和OIPKS,预示着OIPK基因在烟草中可能通过选择性剪接发挥着更复杂的作用。将OIPKL的C端部分进行原核表达 ...
杨金丽
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