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实时荧光定量PCR检测血清miR-7方法的建立及临床初步应用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的建立ploy（A）聚合酶加尾的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测血清miR-7,并作临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-7ploy（A）聚合酶加尾逆转录获得cDNA,进行SYBR Green Ⅰ实时定量PCR扩增检测。制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,绝对定量血清中miR-7的表达水平。结果该方法能定量检测血清miR-7表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在103copies/uL至106copies ...
陈鑫 +5 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】建立TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肝细胞再生磷酸酯酶2（PRL-2）mRNA表达水平，并应用该法检测原发性肝细胞癌中PRL-2基因的表达。【方法】构建含PRL-2基因开放阅读框架的T载体．制作标准曲线。提取手术切除12例人肝癌、门静脉癌栓（PVTT）和癌旁组织总RNA并逆转录为cDNA。应用实时荧光定量PCR法观察人肝细胞癌组织和门静脉癌栓及癌旁组织中PRL-2的表达水平。【结果】线性检测范围达5个数量级，最低检测下限为1×10^2拷贝，最高检测上限为1×10 ...
程超 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的探索唐氏综合征（Down’s Syndrome）的快速诊断方法。方法采用细胞遗传学分析技术对35例唐氏综合征患者（包括4例羊水标本和31例外周血标本）进行核型分析。同时采用荧光定量PCR技术对35例唐氏综合征患者和371例正常对照（含32例羊水标本和339例外周血标本）21号染色体上的D21S11位点进行PCR扩增检测。其中对10例未培养的羊水细胞（4例唐氏综合征患者和6例正常对照）进行荧光原位杂交分析。将唐氏综合征患者的荧光定量PCR检测结果和荧光原位杂交检测结果与细胞遗传学分析结果进行比较 ...
尉庭华 +5 more
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定量RT-PCR测定冠心病患者外周血中Toll样受体4的基因表达水平
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的建立检测人Toll样受体4（Toll like receptor4,TLR4）mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并用来测定冠心病患者外周血单个核细胞（PBMCs）中TLR4的基因表达水平,探讨TLR4基因表达水平与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆载体pGEM-T-TLR4作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。在GeneAmp5700型检测仪上测定了50例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者和40名健康对照者外周血中TLR4mRNA的含量 ...
耿红莲 +6 more
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[Comparison of BCR::ABL (P210) mRNA levels detected by dPCR and qPCR methods in patients with chronic myeloid leukemia]. [PDF]
Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi, 2023 Gao HL +6 more
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MiR-192/-215靶向BIVM基因调控胃癌细胞生物学功能
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 ： 【目的】研究miR-192/-215通过靶基因BIVM调控人胃癌发生发展的机制。【方法】首先利用靶基因 预测网站、基因芯片、实时荧光定量PCR技术筛选出miR-192/-215的靶基因BIVM，然后构建双荧光素酶报告 质粒，验证BIVM为miR-192/-215靶基因。随后通过转染BIVM-siRNA干扰BIVM表达后，检测其对胃癌细胞增 殖、凋亡的作用。8只裸鼠随机分为BIVM-siRNA实验组和NSC-siRNA对照组，将转染BIVM-siRNA的胃癌细胞 种植于裸鼠皮下 ...
林慧娟 +5 more
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荧光定量PCR与PP65抗原检测在诊断儿童巨细胞病毒活动性感染的比较
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和pp65抗原检测儿童人巨细胞病毒（HCMV）感染,并对其诊断HCMV活动性感染进行比较评估。方法分析924例HCMV血清学检测阳性的儿童的全血HCMV-DNA荧光定量PCR及HCMV-pp65抗原检测结果,与临床诊断的符合程度进行比较。结果全血HCMV-DNA荧光定量PCR和pp65抗原检测的一致率为81.17%,其标准误为0.39,Kappa值为0.60;PCR检测HCMV感染的灵敏度为98.4%,特异度为97.3%,Youden指数为0.957 ...
祝兴元 +4 more
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荧光定量PCR检测HBV DNA与血清HBV标志物和preS1相互关系研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的探讨荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒（HBV）DNA与HBV血清免疫学标志（HBVM）模式,preS1之间的相互关系及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR法（FQ-PCR）检测801例血清的HBVDNA,用ELISA方法对其免疫学标志,preS1同时进行检测。结果HBVDNA的总检出率为67·0%,preS1的总检出率为74·9%。其中,在模式HBsAg（+）,HBeAg（+）,HBcAb（+）中血清HBVDNA含量明显高于HBsAg（+）,HBeAb（+）,HcAb（+）及HBsAg ...
张峻梅 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建并筛选到能有效抑制TLR4基因表达的小干扰RNA表达载体,用于研究TLR4基因功能。方法 RNA干扰采用体外构建小干扰RNA表达载体法,将构建好的表达载体转染单核细胞株,分别用流式细胞术和实时荧光定量RT-PCR法检测TLR4蛋白和mRNA表达变化,筛选抑制效率最高的小干扰RNA表达载体。结果成功构建了TLR4小干扰RNA表达载体,并经电泳及测序证实;编号为S8-1的载体转染入细胞后,TLR4阳性率为27.03%,显著低于对照组的35.12%;流式细胞术和实时荧光定量RT ...
耿红莲 +6 more
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实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌患者外周血中uPA基因表达水平及其临床意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨人外周血中尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen activator,uPA）基因表达水平与乳腺癌临床分期和转移的关系,评价其对乳腺癌辅助诊断及判断预后的临床意义。方法采用实时荧光定量PCR方法检测71例正常人和90例乳腺癌患者外周血中uPA mRNA表达水平。结果97.8%的乳腺癌病人外周血中有uPA基因表达,在正常人外周血中的表达率为40.8%;基因表达水平与临床分期和肿物转移情况相关 ...
刘俊泽 +3 more
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