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敲低核蛋白1通过抑制软骨细胞铁死亡延缓骨关节炎病理进展 [PDF]
浙江大学学报. 医学版目的研究核蛋白（Nupr）1调控软骨细胞铁死亡在骨关节炎进展中的作用及机制。方法将小鼠膝关节软骨细胞分为小干扰RNA（siRNA）对照组、靶向Nupr1的siRNA（siNupr1）组、siRNA对照+IL-1β组（siRNA对照干扰24 h后再加入10 ng/mL IL-1β）和siNupr1+IL-1β组（siNupr1干扰24 h后再加入10 ng/mL IL-1β）。采用蛋白质印迹法和定量逆转录聚合酶链反应法分别检测Nupr1蛋白及其信使RNA（mRNA）表达。采用细胞计数试剂盒（CCK ...
廖 太阳 +6 more
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Zhongguo cuzhong zazhi, 2023 目的 探讨漆酶基因LACC1对脑梗死后缺血再灌注损伤的影响及其机制。 方法 ①采购C57BL/6J LACC1基因敲除（LACC1-/-）小鼠20只，野生型小鼠20只，建立大脑中动脉闭塞/再灌注（middle cerebral artery occlusion/reperfusion，MCAO/R）模型各15只，比较两组小鼠的脑梗死体积。采用蛋白质免疫印迹实验检测脑组织中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（phosphorylate AMP-activated protein kinase，p-AMPK ...
焦俊萍，鲍军强，史慧敏，高超，田书娟
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Zhongguo cuzhong zazhi目的 探究甲基转移酶3（methyltransferase 3，METTL3）对人脑血管平滑肌细胞（human brain vascular smooth muscle cells，HBVSMC）基因表达以及增殖和迁移功能的影响。 方法 采用小干扰RNA（small interfering RNA，shRNA）干扰技术，构建METTL3基因干扰载体并通过腺病毒感染HBVSMC，依据感染情况将其分为空白组（无病毒感染）、对照组（空载病毒感染）和干扰组（METTL3-shRNA病毒感染 ...
孟晨曦1，孙洪英2，张佳2，毛戬2，杨阳3，策乐木格3 (MENG Chenxi1, SUN Hongying2, ZHANG Jia2, MAO Jian2, YANG Yang3, Celemuge3 )
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的探究GATA2/GATA6调控胃癌自噬和凋亡的机制。方法以人胃癌SGC-7901细胞为研究对象,建立干扰RNA转染模型,通过流式细胞术检测细胞周期改变,Annexin-V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,倒置相差显微镜、透射电镜观察细胞形态,并应用MDC染色对细胞自噬进行测定。结果 GATA2与GATA6表达量与肿瘤直径、淋巴结转移呈正相关,肿瘤直径小于2cm的组织中GATA2与GATA6表达水平显著低于肿瘤直径大于2cm的组织 ...
洪森, 李世权, 刘涛, 康振华
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建并筛选到能有效抑制TLR4基因表达的小干扰RNA表达载体,用于研究TLR4基因功能。方法 RNA干扰采用体外构建小干扰RNA表达载体法,将构建好的表达载体转染单核细胞株,分别用流式细胞术和实时荧光定量RT-PCR法检测TLR4蛋白和mRNA表达变化,筛选抑制效率最高的小干扰RNA表达载体。结果成功构建了TLR4小干扰RNA表达载体,并经电泳及测序证实;编号为S8-1的载体转染入细胞后,TLR4阳性率为27.03%,显著低于对照组的35.12%;流式细胞术和实时荧光定量RT ...
耿红莲 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建基质金属蛋白酶-26（MMP-26）小干扰RNA（siRNA）表达质粒,以研究其对人肿瘤细胞MMP-26基因表达的沉默效果,探索肿瘤基因治疗的新途径。方法根据MMP-26基因mRNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空载体pSUPERIOR.puro中,构建重组质粒,同时设计构建分别针对GFP和-βactin的干扰质粒作为阴性对照和阳性对照,并进行酶切鉴定和测序分析。结果酶切及测序证实重组质粒构建成功。结论利用RNA干扰（RNAi）技术可成功构建siRNA表达载体。
张扬 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】以人包皮成纤维细胞（HFF）为模型,通过系统比较针对不同靶点的小干扰RNA（siRNA）对酸性鞘磷脂酶1（SMPD1）基因的沉默效果,筛选获得最有效的小干扰RNA序列,同时观察沉默SMPD1对细胞凋亡的保护作用。【方法】设计合成三对靶向SMPD1基因的小干扰RNA作为实验组,同时设立阴性对照组和脂质体组（lipofectamine 2000）,瞬时转染原代培养的HFF细胞,采用荧光定量RT-PCR法及Western blot测定SMPD1表达抑制情况,并用化疗药物丝裂霉素诱导细胞凋亡 ...
高军, 周灿权, 张仁礼, 马芸
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siRNA介导的ADAM17基因沉默对前列癌PC3细胞增殖和凋亡的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的探究RNA干扰靶向沉默ADAM17基因对前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响。方法构建针对ADAM17的小干扰RNA(siRNA)表达质粒PGC-siADAM17,脂质法稳定转染PC3细胞,采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞ADAM17 mRNA的基因表达,噻唑蓝(MTT)法测定瘤细胞增值率,原位未端标记(TUNEL)法检测瘤细胞凋亡率,流式细胞术(FCM)检测瘤细胞周期比例。结果 PGC-si ADAM17使PC3细胞ADAM17蛋白分泌水平下调,对PC3细胞增殖的抑制率为53.6%
李雪 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2022 目的 通过小干扰RNA(siRNA)沉默鼻黏膜上皮细胞（HNECs）上的血管紧张素转化酶2(ACE2)受体，观察siRNA干扰鼻黏膜上皮细胞的ACE2表达后对其下游信号通路的影响。方法 应用脂质体法将si-ACE2转染到HNECs细胞内，通过RT-PCR方法检测各组细胞中ACE2mRNA的表达。Western blot检测各组细胞ACE2蛋白表达水平以及下游信号通路ERK1/2,STAT3蛋白的磷酸化水平。结果 RT-PCR结果显示si-ACE2组细胞中ACE2的mRNA水平明显低于空白对照组 ...
鲍羿岐, 刘洋, 崔娜, 朱学伟
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的利用小片段干扰RNA（siRNA）在肝癌细胞内诱导RNA干扰（RNAi）,抑制细胞间粘附分子-1（ICAM-1）基因表达,在体外进行RNAi对肝癌治疗的实验研究。方法根据ICAM-1基因设计shRNA片断,构建pGenesil-1/ICAM-1表达载体,转入E.coli菌,并用Lipofectamine tm2000转染HepG2细胞,通过MTT方法检测细胞活性状态,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞中ICAM-1基因蛋白质表达抑制情况。结果本实验已成功构建了针对ICAM-1基因的pGenesil ...
廖维甲 +5 more
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