Results 31 to 40 of about 1,803 (98)
实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小干扰RNA（siRNA）表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术。方法体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250 mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250 mRNA的表达情况。结果四条siRNA分别使G250 mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%
赵俊峰 +5 more
doaj
慢病毒携带shRNA抑制CR-1基因表达对 CNE-2细胞特性的影响
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 应用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术,有效沉默鼻咽癌细胞CNE-2的CR-1基因表达,研究CR-1对鼻咽癌细胞生物学行为的影响65377; 【方法】 构建针对CR-1的siRNA慢病毒表达载体[含H1启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]65377;利用包装细胞293FT生产慢病毒,感染鼻咽癌细胞CNE-2, 流式筛选GFP阳性细胞65377;应用荧光定量PCR65380;Western blot检测病毒感染后CNE-2细胞中CR-1基因的mRNA和蛋白表达,获得干扰CR ...
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 目的研究转移相关基因2(Metastasis-associated gene 2,MTA2)对喉癌细胞系Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用化学合成的针对MTA2基因的小干扰RNA(siRNA-MTA2)下调该基因的表达,采用Real timePCR(RT-PCR)和Western blot检测转染效果,通过MTT、细胞划痕实验和Transwell法分别检测MTA2对Hep-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果将siRNA-MTA2转染入Hep-2后,Hep ...
陈磊, 郑树艳, 黄永望
doaj
Linchuang shenzangbing zazhi, 2013 目的 探讨苦参素治疗维持性血液透析患者合并慢性丙型肝炎的效果、不良反应。方法收集维持性血液透析合并慢性丙型肝炎患者26例,随机分为治疗组和对照组,每组13例。治疗组给予聚乙二醇干扰素α-2a 180μg,肌肉注射,每周1次,疗程6个月,联合苦参素葡萄糖注射液100 ml静滴3个月。对照组仅给予聚二醇干扰素α-2a 180μg,肌肉注射,每周1次,疗程6个月。观察治疗后12周、24周及停药后随访24周血清丙型肝炎病毒-RNA滴度中位数水平及丙型肝炎病毒-RNA阴转率,同时观察治疗前、后不良反应。结果 ...
doaj
Ｌｅｎｔｉ－ＣＸＣＲ４－ｓｉＲＮＡ慢病毒对ＳＷ４８０结肠癌细胞株生长与侵袭的影响
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2012 【目的】 探讨Ｌｅｎｔｉ-ＣＸＣＲ４-ｓｉＲＮＡ慢病毒对结肠癌细胞株ＳＷ４８０生长、迁移与侵袭的抑制作用。【方法】 应用我们已构建的Ｌｅｎｔｉ-ＣＸＣＲ４-ｓｉＲＮＡ慢病毒转染ＳＷ４８０细胞，检测ＣＸＣＲ４ ＲＮＡ干扰对ＣＸＣＲ４ ＲＮＡ 和蛋白的抑制作用，ＭＴＳ法检测能否抑制细胞增殖，Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室评价对细胞迁移和侵袭的影响。【结果】重组Ｌｅｎｔｉ-ＣＸＣＲ４-ｓｉＲＮＡ慢病毒转染ＳＷ４８０细胞可见绿色荧光。ＳＷ４８０、阴性对照组及Ｌｅｎｔｉ-ＣＸＣＲ４-ｓｉＲＮＡ慢病毒组ＣＸＣＲ４ ＲＮＡ ...
王天宝
doaj
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2011 【目的】研究蛋白激酶PYK2对悬浮状态下的肺癌细胞H460失巢凋亡抗性的作用和PYK2的下游通路蛋白【方法】RNA干扰实验采用逆转录病毒载体介导的稳定表达系统降低PYK2蛋白的表达;细胞悬浮培养实验用polyHEMA培养方法;用PARP 断裂带和DAPI荧光染色检测细胞凋亡情况;细胞侵袭能力用侵袭小室实验;磷酸化蛋白激酶水平用免疫印记实验检测【结果】用RNA干扰沉默能够降低H460细胞中PYK2蛋白的表达抑制PYK2的表达能够降低悬浮培养H460细胞增殖能力和促进细胞凋亡增加此外 ...
doaj
慢病毒介导的Clusterin基因沉默抑制肾癌786-O细胞增殖并促进细胞凋亡
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2012 【目的】 应用慢病毒介导的RNA干扰技术,检测clusterin(CLU)基因沉默在人肾癌786-O细胞的干扰效果及其对人肾癌786-O细胞增殖?迁移和凋亡的影响?【方法】 构建靶向CLU基因的慢病毒干扰载体,利用包装细胞293T获得重组慢病毒,感染人肾癌786-O细胞株?实验分5组:CLU-RNAi-LV1(KD1)?CLU-RNAi-LV2(KD2)?CLU-RNAi-LV3(KD3)为加入靶向CLU基因的慢病毒感染的肾癌细胞组,未处理的慢病毒感染的肾癌细胞组(NC组),肾癌786 ...
doaj
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2014 【目的】 采用RNA干扰(RNAi)技术阻断类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)基因的表达,探讨uPAR基因沉默后对RA-FLS功能产生的影响及有关机制?【方法】 收集行关节置换术或滑膜清理术的RA患者的滑膜组织,组织块法培养RA-FLS?通过阳离子脂质体转染的方法,转染体外合成的特异性uPAR-siRNA;利用荧光定量PCR法和Western blotting法检测uPAR沉默效果;CCK8法检测细胞增殖抑制率;流式细胞技术检测细胞周期改变 ...
doaj
miR-133b在甲基苯丙胺诱导PC12细胞凋亡中的调控作用
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 【目的】探讨小分子非编码RNA 133b在甲基苯丙胺（MA）导致神经元毒性损伤中的表达变化及其对神 经细胞凋亡的调控作用。【方法】培养PC12细胞，分为对照组和MA处理组。应用800 μmol/L MA处理PC12细胞建 立神经元损伤细胞模型，显微镜下观察PC12细胞突起变化，采用Hoechst33342/PI双染色检测细胞凋亡变化；采用实 时荧光定量PCR（Real time-PCR）技术检测miR-133b的表达水平变化；并进一步对miR-133b进行功能分析，分别转 染miR ...
刘海莉 +4 more
doaj
Role of long non-coding RNA in plant flowering regulation(长链非编码RNA在植物开花调控中的作用)
浙江大学学报. 农业与生命科学版Flowering marks a crucial transition from vegetative growth to reproductive growth in plants. Flowering regulation is essential for both plant adaptation to environment and agricultural production.
郑羽琪(ZHENG Yuqi) +4 more
doaj +1 more source