使用FLAG标签肽及慢病毒载体共同筛选小鼠foxp3基因RNA干扰的有效靶点 [PDF]
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】筛选高效的foxp3 RNA干扰的靶点用于阻断CD4^＋CD25^＋ Treg细胞的免疫抑制功能。【方法】使用oligoengine软件设计foxp3基因shRNA序列，化学合成法合成4条shRNA序列，构建含foxp3的靶序列的慢病毒载体：构建出表达FLAG融合蛋白和目的基因的工具细胞293T细胞用于筛选RNA干扰的有效靶点。【结果】成功包装了4条foxp3基因靶序列相应的慢病毒颗粒；成功构建了表达融合蛋白和目的基因的293T工具细胞：在工具细胞上筛选出了2条RNAi效率分别为91.3％和95．
史艳侠 +5 more
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Effect of silencing LC3 on apoptosis of mouse hepatocellular carcinoma Heap1-6 cells [PDF]
, 2017 目的建立小鼠LC3基因沉默的Heap1-6稳定表达细胞系，探讨其对衣霉素诱导的肝癌细胞凋亡的影响。方法设计并合成一段针对小鼠LC3基因的shRNA及不针对任何基因的shRNA作为阴性对照，将它们退火后连接构建重组载体，转化扩增及酶切鉴定之后将重组质粒与病毒包装、包膜质粒共同转染293T，收集病毒上清转染Heap1-6细胞，嘌呤霉素筛选10 d，获得稳定的细胞株。以导入LC3基因shRNA的Heap1-6为实验组（Heap1-6 shLC3），以导入shcoo2的Heap1-6为对照组（Heap1-6 ...
任冰霜 +5 more
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Effect of BRCA1 R1325K mutation on proliferation and apoptosis of gallbladder cancer cells [PDF]
, 2023 Objective·To investigate the effects of breast cancer susceptibility gene 1 (BRCA1) R1325K mutation [arginine (R) to lysine (K) mutation at amino acid 1325] on the proliferation and apoptosis of gallbladder cancer cell lines GBC-SD and NOZ.Methods·BRCA1 ...
JIA Ziyao +7 more
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Experimental study on sinomenine derivative modulating chemokine receptor in multiple myeloma cells [PDF]
, 2023 Background and purpose: The interaction of CXC motif chemokine receptor (CXCR) on the cell surface of multiple myeloma (MM) with chemokines in the bone marrow microenvironment is involved in proliferation, survival and extramedullary invasion of MM cells.
JU Shenaonan, WANG Yingying, TANG Yong, YAO Yiyun, WU Yingli, ZHU Qi
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NFAT2 in the regulation of CAII and V-ATPase mRNA expression in osteoclast-like cells and intervention study of PEMF [PDF]
, 2016 目的：研究低频脉冲电磁场(PEMF)对去卵巢大鼠核因子κB受体活化因子（RANK）、活化T细胞核因子(NFATc1/NFAT2)、碳酸酐酶II（CAII）、空泡型H+三磷酸腺苷转运酶（V-ATPase）基因表达的影响；研究NFAT2对CAII和V-ATPase基因表达的调控作用。 方法：1.选取48只雌性SD大鼠，分为三组，分别为SHAM（假手术）组、OVX（去卵巢）组、OVX+PEMF组，OVX+PEMF组随机选一半被PEMF干预14天和28天，测雌激素和骨密度。RT-PCR检测NFAT2、RANK ...
傅继凡
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TIPE2 promote synovial fibroblasts cell apoptosis of adjuvant arthritis rats by up-regulating caspase while down-regulating NF-κB [PDF]
, 2015 目的：TIPE2能够抑制炎症以及肿瘤的发生发展，并且TIPE2过表达能够促进细胞的凋亡。类风湿关节炎是一种免疫多态性慢性疾病，我们应用类风湿关节炎模型大鼠佐剂型关节炎滑膜成纤维样细胞(fibroblast-likesynoviocytesofratadjuvantarthritis，AA-FLS)，通过体外实验分析TIPE2对死亡受体5诱导细胞凋亡的作用探讨TIPE2对佐剂型关节炎发病的影响。 方法：通过RT-PCR、荧光实时定量PCR和Western ...
石春燕
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FBXO38 regulates ocular melanoma proliferation through the PI3K-Akt signaling pathway [PDF]
, 2023 Objective·To investigate the effect of F-box only protein 38 (FBXO38) on the ocular melanoma proliferation and the potential regulatory pathway.Methods·Human skin cutaneous melanoma A375 and human uveal melanoma OMM2.3 cell lines with FBXO38 knockdown ...
FAN Xianqun +5 more
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Study on establisment of chicken embryo RNAi technology with infective feature of RCAS and Vezf1 function in chicken vascular development. [PDF]
, 2012 早期初级血管网络的形成，始于胚胎中胚层形成过程中其部分细胞分化为血管内皮前体细胞。血管内皮前体细胞再进一步向血管内皮细胞分化并形成初级毛细血管网，血管内皮细胞与其周围细胞进一步相互作用，逐步进行对初级血管的改建和生成新的血管，最终完成血管系统的发育。因此，血管内皮细胞是血管生成的中心细胞。为研究胚胎血管内皮细胞分化机制，先前我们从发育至三体节的鸡内皮前体细胞（VEGFR2+）相对特异表达基因的克隆中，发现了鸡的Vezf1(cVezf1)基因。该基因与在小鼠中发现的Vezf1基因高度同源 ...
张超
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一种可药物筛选及体内检测的新型慢病毒基因治疗载体的构建 [PDF]
, 2008 为实现基因治疗过程中的有效药物筛选及体内检测,首次利用核糖体内部进入位点(IRES)构建了同时携带O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶(MGMT)的突变型P140K基因和荧光素酶(Luciferase)基因的慢病毒载体pBobi-MIL。RT-PCR、免疫荧光、药物筛选克隆形成及化学发光检测等实验结果表明感染重组慢病毒L-MIL的细胞能同时表达MGMT及Luciferase。构建成功的新型慢病毒载体为今后的基因治疗奠定了基础 ...
侯汪衡 +9 more
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人HMGN5基因shRNA慢病毒载体构建与RNAi效率的鉴定
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建人HMGN5基因的shRNA慢病毒载体并鉴定在肺癌A549和H1299细胞上的沉默效率。方法设计HMGN5基因特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pLL-3.7载体,并筛选获得有效的shRNA慢病毒载体,在293T细胞包装成病毒颗粒,将其感染肺癌A549和H1299细胞,应用Real-time PCR方法从mRNA水平上检测HMGN5的沉默效率。结果构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确,包装病毒后滴度达到5×108TU/ml ...
陈鹏 +8 more
doaj