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Study on the influence of sPLA2-ⅡA on the expression of MCP-1 in human aortic smooth muscle cells induced by oxidized low density lipoprotein and its mechanism [PDF]

open access: yes, 2012
摘要 研究背景 动脉粥样硬化是一种动脉壁慢性炎症性疾病,其中含有apo-B脂蛋白颗粒在动脉壁的潴留和修饰是动脉粥样硬化发病机制特征之一,而分泌型磷脂酶A2-IIA(secretoryphospholipaseA2ofgroupIIA,sPLA2-IIA)可水解磷酸卵磷脂的2位酯键,sPLA2-IIA修饰的LDL与蛋白聚糖的亲和力增加,促进脂蛋白潴留,其水解后生成的游离脂肪酸和溶血磷脂,可产生重要的信号分子或进一步成为炎性介质,从而改变内皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞的功能和特性,促动脉粥样硬化的发生发展 ...
李博
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人Shh基因重组过表达慢病毒载体的构建与鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2013
目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western
边学海   +6 more
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Research of RNAi Components Expressing Multiple siRNAs Targeted to HIV-1 [PDF]

open access: yes, 2009
艾滋病已成为一场人类、社会和经济的灾难,对个人、社区和国家都产生了深远影响。目前常用的艾滋病治疗方法是化学药物的鸡尾酒疗法,该方法可明显降低患者体内的病毒载量,控制病情的发展。然而,该方法并不能达到治愈艾滋病的效果,急需开发新的更为有效的治疗方法。RNAi是近年来发现的一种序列特异性的转录后水平抑制基因表达的机制,目前已在HIV-1的抗病毒研究中显示出巨大的应用潜力。然而,HIV-1具有的高突变率使得病毒很容易逃避传统的单靶点RNAi的抑制。多靶点策略是克服病毒突变逃避抑制的有效方法 ...
张涛
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Studies of lentiviral system for gene transferring and its expansile application [PDF]

open access: yes, 2010
慢病毒载体因为具有能感染分裂和未分裂的宿主细胞,并且带给宿主细胞轻微的免疫原性的优点,而在转基因改造、基因功能分析和基因治疗中得到了广泛的应用。但是,慢病毒载体的整合特性,尤其是它整合到基因组的转录活性区域或邻近活性区域的特性,使基因功能分析的结果产生未知干扰,并给实际应用带来风险。慢病毒的整合可能会引起突变,或者改变非目的基因的表达从而对目的基因的功能研究产生影响,而且病毒序列整合到宿主细胞基因组中可能会在转基因操作中带来长期和有害的影响。我们的研究旨在利用慢病毒的优良特性的同时 ...
刘宽灿
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上调FoxM1增强骨髓间充质干细胞抗脂多糖诱导肺泡上皮细胞凋亡 [PDF]

open access: yes, 2019
【目的】本研究旨在探讨上调骨髓间充质干细胞(BMSC)的FoxM1表达水平对其抗脂多糖诱导肺泡上皮细胞凋亡作用的影响,并初步探索其可能机制。【方法】采用全骨髓细胞贴壁培养法分离获取大鼠BMSC,通过慢病毒转染技术使BMSC过表达FoxM1,利用Transwell小室构建BMSC与肺泡上皮细胞共培养体系,使用TUNEL法与Annexin V法检测不同FoxM1表达水平BMSC的抗脂多糖诱导肺泡上皮细胞凋亡作用,采用MILLIPLEXMAP液相芯片检测共培养体系中多种细胞因子的表达水平。【结果 ...
张莉珊
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重组干扰质粒对卵巢癌COC1细胞HDAC1表达的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2016
目的构建重组HDAC1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒干扰质粒并研究其对卵巢癌COC1细胞HDAC1表达的影响。方法针对HDAC1基因设计特异性siRNA靶点,构建慢病毒干扰质粒载体,筛选获得的有效shRNA慢病毒干扰序列,将其转染卵巢癌COC1细胞。采用Real-time PCR方法检测靶基因在mRNA水平的沉默效果,Western blot方法检测靶基因在蛋白质水平的沉默效果。结果构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确 ...
贾妍, 邹颖刚, 许天敏, 崔满华
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Feasibility study on lentiviral RNAi therapy for HIV/AIDS [PDF]

open access: yes, 2008
艾滋病(AIDS)是一种危害极大的全球性疾病,在全世界范围内严重危害人类的健康。因此,对AIDS防治研究就具有极其重要的意义。随着耐药型艾滋病病毒(HIV)病毒株的大量出现及现有治疗方式一些难以克服的缺陷,近年来对HIV/AIDS基因治疗的研究得到了越来越广泛的重视及发展。以慢病毒载体系统结合RNA干扰(RNAi)等新兴技术的HIV基因治疗目前还存在着一系列亟待解决的问题:难以测定治疗性慢病毒滴度;缺乏有效的用于治疗效果验证的动物模型;治疗靶细胞的选择尚存在一定争议。针对这些治疗过程中重要的问题及难点 ...
许辰煜
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介导人α-反义寡核苷酸慢病毒载体的构建

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的构建介导人α-反义寡核苷酸的慢病毒载体,为α-反义寡核苷酸对β-地中海贫血基因治疗的体内试验提供稳定的转染细胞载体。方法根据人α-反义寡核苷酸序列设计siRNA、合成DNA片段,通过双限制性内切酶消化和连接的方法构建pGCSIL-vshRNA-GFP载体质粒,接着该质粒转化感受态的大肠杆菌E.coliDH5α,通过PCR及基因测序鉴定阳性克隆,再经Lipofectamine 2000将pGCSIL-vshRNA-GFP,pHelper 1.0和pHelper 2.0三质粒系统共转染293 ...
赖颖晖, 赖永榕, 杨高晖
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床旁肺超声评价透析患者容量状态的临床应用价值

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2022
终末期肾病(ESRD)的重症透析患者常常出现临床或亚临床容量超负荷现象,而容量超负荷是急、慢性终末期肾病最常见的危险因素之一[1],持续的容量超载会引起水肿、血压改变、电解质紊乱和水中毒等严重后果。在2015年美国肾脏病基金会对血液透析充分性临床实践指南的建议中,指出了控制容量状态的重要性[2]。维持合适的液体容量状态是实现对心脏病科、重症医学科,
郭雯林, 刘庆鑫, 王辉, 宋军
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Function and mechanism of Repulsive Guidance Molecule RGMb/Dragon during Colorectal Cancer progression [PDF]

open access: yes, 2016
结直肠癌是我国甚至全球范围内最常见的肿瘤之一,也是肿瘤相关死亡的主要原因之一。及时而有效的诊断是降低结直肠癌死亡率的重要措施。除了临床上常规的诊断及治疗方法外,人们也在不断致力于新型肿瘤标志物的研究,以进一步明确结直肠癌发生发展的机制。排斥导向分子(RGM)家族成员RGMb,又名Dragon,作为骨形态发生蛋白(Bonemorphogeneticprotein,BMP)通路的辅助受体,不但承载着胚胎发生、神经修复和肾脏正常生理功能,还与各种上皮来源肿瘤的发生发展密切相关。然而,RGMb ...
施颖
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