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, 2005 以紫外线灭活的dsRNA病毒草鱼出血病病毒(GCHV)诱导和模拟诱导的牙鲆胚胎细胞为材料,利用抑制性差减杂交(SSH)技术,成功构建了双链RNA病毒诱导的牙鲆胚胎细胞(FEC)差减cDNA文库.以管家基因α-tublin作为差减指标,经检测,该文库差减效率达2 10倍,表明经病毒诱导后某些差异表达基因也得到了相应倍数的富集.将获得的cDNA片段连接到pGEM-T载体,PCR检测显示差减片段在250bp～2 000bp之间.该差减cDNA文库的构建为从分子水平研究牙鲆培养细胞对dsRNA病毒的免疫反应 ...
张义兵 +5 more
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, 2009 小干扰RNA(smallinterferingRNA;siRA)介导的RNA干扰(RNAinterference;RNAi)是近年来快速发展的一种转录后基因沉默(post-transcrptionalgenesilencing;PTGS)方法;已经成为一种重要的基因治疗手段。本研究以草鱼出血病病毒(GCRV)外壳蛋白基因VP7为靶基因;选择3个不同的siRNA位点;构建了3个草鱼H1基因启动子驱动的shRNA表达载体pH1siGCRV(X)-CMVeGFP及其对照表达载体pH1shHK-CWVeGFP ...
亚平, 朱作言, 胡炜, 陈芸汪
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建含鼠LINGO-1短发夹RNA（short hairpin RNA,shRNA）的复制缺陷型腺病毒载体。方法通过PCR法将带有LINGO-1 shRNA序列构建至U6启动子（U6sh LINGO-1）下游,与T载体连接,将质粒转化入大肠杆菌。将U6sh LINGO-1连到穿梭质粒pDC316上,与腺病毒基因组质粒pBHGlox△E1、3Cre共转染293T细胞,得到重组腺病毒载体（rAd LINGO-1）。经PCR鉴定正确后,进行扩增、纯化、滴度测定及感染性鉴定。结果PCR法得到U6sh ...
高峰, 孙红辉, 杨有庚
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, 2008 RNA干扰(RNAi)是个古老而保守的机制,其作用如同“基因组的免疫系统”,广泛存在于真核生物真菌、植物、动物中,是天然的抵御病毒侵袭的系统.植物病毒在和植物长期而复杂的协同进化中,为了生存繁殖,提高自身复制、运动、感染寄主的能力,也演化出了对付宿主沉默反应的机制,即反干扰机制.目前的研究表明,病毒编码沉默抑制子是反干扰机制的最主要方式.本文主要就病毒编码的沉默抑制子作用特点和功能进行了概述.并介绍了缺损干扰RNA及卫星RNA的特殊复杂二级结构、快速复制与运动躲避沉默信号等反干扰机制 ...
乔定君, 黄维藻, 马欣荣
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2002 目的 探讨人类疱疹病毒 7（humanherpesvirus 7,HHV 7）U4 1的表达时相及细胞内定位。方法 免疫荧光检测U4 1蛋白的细胞内定位 ,RT PCR检测U4 1RNA的表达时相。结果 免疫荧光检测显示 ,无论在HHV 7感染细胞或HHV 7U4 1转染细胞 ,U4 1蛋白都是仅在其胞核中弥漫性的分布。在分别加入CHX（cycloheximide）和PFA（phosphomo formicacid）作为蛋白合成和核酸合成抑制剂感染细胞中 ,U4 1的表达时相检测结果显示U4 ...
张立伐 +3 more
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Huli yanjiu, 1993 棉酚中毒是由于长期食用粗制的棉籽油而引起的肾小管大量排钾、排镁,引起体内严重缺钾、镁而发生的一系列临床综合症.我院于1991年至今共收治棉酚中毒病例23例,除一例合并副伤寒心跳骤停死亡,—例治疗不彻底而复发外,全都痊愈. 1 临床资料 自1991年以来,我院共收治23例棉酚中毒病人,其中男4例,女19例;合并副伤寒一例,合并心律失常2例、复发1例;年令最大73岁,最小18岁.
王钟峤, 范玉玲, 郭庆玲
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具双T-DNA区的大麦黄矮病毒复制酶基因RNAi植物表达载体的构建(英文)
, 2008 RNAi系双链RNA诱导同源mRNA降解,导致特定基因表达沉默的一种现象.RNAi技术是通过基因工程防治植物病毒病的最佳途径.由大麦黄矮病毒(Barely yellow dwarf virus,简称BYDV)引起的禾谷类黄矮病发病面积和危害程度在我国呈加重趋势.BYDV-GAV是当前流行的大麦黄矮病毒株系,本文针对BYDV-GAV复制酶基因序列,构建能在细胞内转录形成发卡RNA双链结构的表达盒,并将其置于中间载体pVec8-2b的T-DNA区,pVec8-2b的另一T ...
王磊, 付体华, 陈静, 孙文瑜
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 病毒性心肌炎（viral myocarditis,VMC）是小儿心血管系统常见疾病,其发病机制尚未完全阐明,病情轻重不一,虽然大多数急性VMC患者心功能可完全恢复,但部分患者可能出现反应性心肌纤维化,心室重塑,发展成为慢性VMC、扩张性心肌病（DCM ...
琴瀚姣, 孙景辉, 翟淑波
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1992 本实验详细地探讨了原位杂交技术的有关问题:生物素标记DNA探针的制备,各类来源标本的制备,杂交前、中、后细胞组织切片的处理等;并把缺口翻译法合成的生物素化EB病毒DNA探针应用于检测培养细胞,冰冻和石蜡切片中EB病毒Bam HI-W重复片断DNA序列。实验结果表明:自制的EB病毒DNA探针完全可靠;所采用的一套原位杂交技术适用于检测上述三类不同的标本,其检测的结果是满意的。
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 【目的】 建立H5N1禽流感病毒感染BALB/c小鼠的疾病动物模型.【方法】 将100 μL H5N1禽流感病毒 原液(ELD50为10-9/0.2 mL)鼻腔接种BALB/c小鼠,设正常尿囊液组对照,接毒后14 d内每隔24 h观察一次,主要观 测指标有:临床症状?体质量和体温变化?死亡率、病理变化、病毒分离。【结果】 被感染的BALB/c小鼠的病程可以 划分为前驱期(1 ～ 2 d)、发作期(第3 ～ 7 天)、恢复期(第8 ～ 14天),发作期接毒小鼠出现各种严重的临床症状,表现出极度消瘦 ...
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