Results 71 to 80 of about 192,765 (144)
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的在大肠杆菌中表达脑钠肽前体（proBNP）及氨基末端前体蛋白（NT-proBNP）。方法采用分子生物学技术构建重组质粒PGEX-20T-proBNP和PGEX-20T-NT-proBNP,分别对其进行PCR、双酶切和测序鉴定,然后将已测序鉴定的包含两种重组质粒的工程菌,转化至大肠杆菌BL21菌中表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,并用Western-blot鉴定纯化的重组蛋白。结果在大肠杆菌中成功的表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,两种蛋白均以可溶性形式表达,更有利于保存其生物学活性 ...
何涛君 +5 more
doaj
, 2009 现代生命科学的发展尤其注重极端条件下生物体系的潜力。作为工业生物技术科学的一个分支,现代酶技术广泛探索如何极大限度地使酶在细胞外长期保持活性,并能有效地适应非生态环境的条件。纳米科学的迅速发展为酶的稳定和高效催化转化带来了新的机遇。纳米材料和酶技术结合可制备纳米酶催化剂,其纳米结构不仅能使酶在不同体系长期保持活性稳定,而且能提高水相、有机相、油-水界面的催化效率,并使多酶体系催化反应和辅酶再生成为可能。纳米颗粒的高曲率能降低酶固定化时的变构,纳米颗粒的布朗运动使纳米固定化酶和底物频繁碰撞 ...
马光辉, 苏志国, 王平
core
四川大学学报. 自然科学版, 2004 利用加端PCR技术在 pGEX 1λT质粒BamHI和PstI位点间 (片段BamHI端 )加入α amanitin线性八肽碳骨架编码序列 ,再将两次连续加端PCR产物连入BamHI、PstI双酶切的pGEX 1λT载体 ,得到含α amanitin线性碳骨架编码序列的阳性重组子pGAT 1 .序列测定和结果分析显示 ,构建的融合基因相位正确 ,阅读框通读 .通过对融合基因在大肠杆菌中表达条件的优化 ,目的融合蛋白的表达量可提高 33.5 %,占总蛋白表达量的 2 8.3%.
赵建 +6 more
doaj
, 1995 浓香型大曲酒质量的优劣，取决于酒体中己酸乙酯含量的高低，而在生产发酵过程中，酯的形成比较缓慢，因而生产周期长;成本高。该项目从大曲中分离德育出一株活性高而稳定的酯化酶生产菌株，由该菌株生产粗酶制剂，方法简单易行。将该酶制剂应用于生产，可缩短发酵期1/3，优质酒率提高10个百分点，而且可提高己酸乙酯含量，成效显著。现已建成年产酯化酶粗酶制剂1000吨，高酯调味酒100吨的生产线，经试生产工艺合理，运行正常，操作方便，产品的产量与质量均达到设计要求。与传统工艺相比，可缩短发酵周期3/4～2/3 ...
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 1997 本研究采用改良的ＴＲＡＰ—银染法，检测了临床外科切除肝癌组织１５例，端粒酶阳性率为８６．６％（１３／１５）；邻近肝组织１５例，２例阳性（２／１５）；５例肺癌肺纤维支气管镜刷落细胞肺癌５例，阳性４例，肺炎７例均为阴性；肿瘤细胞株２例则为阳性。结果表明，肿瘤细胞的端粒酶活性明显高于正常细胞。在极少量脱落细胞中检测端粒酶活性也同样得到较满意的结果，提示我们的实验方法敏感、可靠、简便易行。
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的构建人PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体并进行鉴定。方法参照PTEN基因全序列,在cDNA两端各设计一条对应引物,并引入各自的酶切位点。从正常人胎盘组织中提取mRNA作为模板合成第一链,并扩增目的基因序列片段,经双酶切后定向克隆至绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1中,筛选阳性重组质粒,分别经双酶切、测序法对重组质粒进行鉴定。结果双酶切和特异PCR结果表明克隆的基因片段约1.2 kb;测序法进一步证实该基因为PTEN编码基因,经NCBIBLAST分析与Gene Bank中基因序列完全相同 ...
武鸿斌 +4 more
doaj
The changes of telomerase activity of the human cells irradiated by 12C6+ ions
, 2008 端粒是染色体末端由重复DNA序列和相关蛋白组成的一种特殊结构，具有稳定染色体结构及完整性的功能，会随染色体复制与细胞分裂而缩短。端粒酶是一种核糖核蛋白，能以自身RNA模板合成端粒DNA，催化合成TTAGGG重复序列，添加到染色体末端，维持端粒长度不变。端粒酶主要由hTR, TEPl和hTERT组成，一般认为hTERT是端粒酶激活的限速因素。大多数永生化细胞和恶性肿瘤细胞具有端粒酶活性，因而端粒酶目前已成为为细胞持续分裂提供遗传基础的原因。由于端粒酶与细胞衰老、肿瘤发生等关系如此密切 ...
胡凯骞
core
四川大学学报. 自然科学版, 1999 用来自大肠杆菌的潮霉素Ｂ磷酸转移酶基因（ｈｙｇｒ）作为遗传标记构建了启动子探针型载体ｐＳＵＰＶ８，该基因的转录和翻译起始区以及５’－端编码区两个密码子均被除去，载体骨架为大肠杆菌质粒ｐＵＧＶ２ ...
李维, 张义正
doaj
, 2014 胰脂肪酶是体内参与脂肪吸收的关键酶，也是治疗以肥胖为代表的代谢性疾病的靶点酶。脂肪酶抑制剂可以通过抑制脂肪酶的活性，达到减肥的目的。同时，固定化酶的制备及应用在近年来受到越来越广泛的关注。固定化酶相比自由酶在稳定性、容易分离、酶活性、生物相容性等方面有明显的优势。本论文探索，利用固定化脂肪酶对中药活性成分进行分析，以实现高效的酶抑制剂筛选、鉴定。 本学位论文由四章组成，前三章为实验部分，分别报道了固定化脂肪酶制备和表征及性质评价、利用固定化脂肪酶对中药材活性成分进行分析以及固定化脂肪酶结合荧光探针筛选 ...
祝元婷
core
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】构建携带γ-干扰素基因(ifn-γ)的pIRES 改进型黄色荧光蛋白载体(pIRES-EYFPIFN-γ), 为γ-干扰素基 因的体内外表达及蛋白定位提供理想的标记。【方法】根据已知γ-干扰素基因序列, 设计在目的片段两端分别带EcoRⅤ和 Not Ⅰ 酶切位点序列的2 条引物, 用PCR 技术从质粒pcDNA3IFN-γ中扩增出ifn-γ(499 bp), PCR 产物用EcoRⅤ 和Not Ⅰ 双 酶切后回收纯化, 定向克隆至商品质粒pIRES-EYFP, 重组质粒pIRES ...
蓝育青 +6 more
doaj