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目的 对腺相关病毒衣壳进行合理设计改造,从而提高腺相关病毒转导脑肿瘤细胞的效率。方法 通过在AAV5的衣壳蛋白Cap的氨基酸N573后插入一段寡肽GIVADNLNL以替换Q574到T578之间的蛋白序列QSSTT,同时引入两个点突变S2A和T711S得到AAVX01。研究该改造对腺相关病毒产量是否会造成影响;用包装有荧光蛋白报告基因的AAV病毒感染H4及A172细胞系,观察和比较AAVX01与野生AAV5及AAV8的转导效率。结果 通过改造得到新型血清型AAVX01 ...
高腾 +5 more
doaj
目的探讨吉林地区婴幼儿病毒性腹泻的病原学特点,为病毒性腹泻的防控提供参考依据。方法采集2007年10月-2008年11月在吉林市儿童医院就诊的5岁以下腹泻儿童粪便标本,并进行病原学检测分析,同时对患儿家长进行面对面问卷调查。结果 417份粪便标本实验室检测结果显示,轮状病毒的阳性检出率最高,为51.80%,然后依次为杯状病毒(18.00%)、星状病毒(6.70%)、肠道腺病毒(3.40%)。对上述四种病毒与感染者性别、年龄、生活环境以及发病季节的比较发现,除轮状病毒与性别、年龄 ...
赵勇, 齐亚莉, 何淑云
doaj
【目的】构建小鼠T-bet基因重组腺病毒载体,为T-bet基因在支气管哮喘治疗中的作用研究提供有效的T-bet生物表达系统。【方法】采用内切酶从质粒T-bet/GFP-RV中切获约1.7kb的小鼠T-betcDNA片段,与穿梭质粒pShuttle连接,再通过稀有酶切位点将含T-betcDNA的表达盒与Adeno-X腺病毒载体骨架连接,构建重组载体pAdeno-T-bet,测序鉴定无错配及插入移位等DNA顺序改变,并转染HEK293细胞,出现CPE后取含病毒上清的细胞培养液抽提病毒DNA行PCR鉴定 ...
doaj
重组腺病毒介导RECK基因在大肠癌细胞中的表达及抑制癌细胞浸润能力的实验研究
目的 研究重组腺病毒介导RECK基因转染大肠癌细胞后基因的表达情况,并观察转染细胞浸润能力变化。方法 构建了RECK基因的复制缺陷型重组腺病毒载体adRECK ,以adRECK转染大肠癌癌细胞株后,用RT PCR法检测RECK基因在大肠癌中的表达。并用Boyden小室测试转染细胞的侵袭性。结果 RECK基因在转染细胞中有效的表达。被转染细胞浸润能力明显下降。结论 重组腺病毒介导RECK基因能够在大肠癌细胞中有效的表达,转染病毒的大肠癌浸润能力明显下降。
杨德君 +4 more
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[Infectivity of Human Adenovirus Type 55 to Human Intestinal Cells]. [PDF]
He YB, Wang WB, Hu ZH, Xiong J, Liu Y.
europepmc +1 more source
【目的】探讨腺病毒介导的大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(E .coli CD)基因在胰腺癌细胞中靶向性表达的可能性及其作 用。【方法】将含癌胚抗原(carcinoembryonic antigen CEA)启动子的重组腺病毒感染人胰腺癌SW1990 细胞(CEA+)、Capan-2 细 胞(CEA-)和人宫颈癌Hela 细胞, 观察CD 基因在3 种细胞中的表达及细胞对5-FC 的敏感性差异。【结果】腺病毒介导CD 基 因仅在SW1990 细胞中呈专一性表达, 转导CD 基因的SW1990 细胞对5-FC ...
张世能, 袁世珍
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两种不同AFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒获得及鉴定
目的 构建及包装由全长 5 1kbAFP启动子和低氧反应元件 (HRE)与 0 3kbAFP启动子两者组合的杂合0 3kbAFP启动子控制下表达HIVvpr基因的两种重组非复制型腺病毒。方法 采用细菌内同源重组腺病毒载体制备方法和PacI酶切、PCR、SouthernBlot鉴定方法。结果 构建及包装出由这两种AFP启动子控制下表达HIVvpr基因的重组非复制型腺病毒 ,经PacI酶切、PCR和SouthernBlot基因整合分析证明构建成功。结论 我们成功构建了的全长5 ...
魏强 +4 more
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【目的】探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后目的基因表达情况及对MSCs增殖分化的影响。【方法】构建含VEGF基因的腺病毒表达载体,利用贴壁法分离培养MSCs后,用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效果和转染率,用免疫组化、Western-Blot和ELISA方法分别检测VEGF基因转染MSCs后VEGF的表达情况。【结果】腺病毒介导的VEGF基因对于MSCs具有很高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicyties of ...
华平 +6 more
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携带Egr-1启动子和Endostatin基因的腺病毒穿梭质粒构建及鉴定
目的构建含辐射敏感启动子Egr-1和人内皮抑素(endostatin)基因的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-Endostatin。方法利用RT-PCR方法从人胎肝中扩增出人endostatin cDNA序列,从T-Egr1质粒中扩增出Egr-1基因序列,并将它们连接到pMD19T质粒进行测序,利用基因重组技术构建含有辐射诱导启动子Egr-1的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-Endostatin。结果经测序证实,获得的人endostatin基因和Egr ...
李艳博 +6 more
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以人甲胎蛋白启动子控制表达HIV-1vpr基因的重组腺病毒诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡作用的研究
目的研究人甲胎蛋白(AFP)启动子控制表达HIV-1 vpr基因的重组腺病毒对AFP(+)肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡的作用,评估以该策略利用vpr进行肿瘤特异性基因治疗的可行性。方法将以AFP启动子控制HIV-1vpr表达的重组腺病毒rvAdAFP-vpr和空白载体rvAd-null分别感染AFP(+)的肝癌细胞BEL-7402和AFP(-)的肝癌细胞SMMC-7721,利用流式细胞仪检测Vpr的特异性表达和细胞周期分布,用细胞荧光染色和线粒体膜电位检测等方法观察细胞凋亡。结果与对照病毒rvAd ...
魏强 +5 more
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