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Developmental Medicine &Child Neurology, Volume 61, Issue 3, Page E1-E35, March 2019., 2019 目的 本国际临床指南由欧洲残疾儿童学会（the European Academy of Childhood Disability，EACD）牵头制定，旨在解决发育性协调障碍（developmental coordination disorder，DCD）的定义、诊断、评估、干预以及与社会心理方面的临床应用关键问题。 方法 本指南针对五个领域的关键问题，通过文献综述和专家团队的正式讨论达成共识。为保证指南的循证基础，以“机制”、“评估”和“干预”为检索词, 对2012年更新以来提出的最新建议以及新增的“社会心理问题”和“青少年/成人”为检索词进行检索。根据牛津大学循证医学中心证据等级 (证据水平 [level of evidence, LOE]1–4) 将结果进行分类，最终转化为指南建议。并由国际 ...
Jing Hua +6 more
wiley +1 more source
Salivary gland hypofunction in KK‐Ay type 2 diabetic mice
Journal of Diabetes, Volume 10, Issue 1, Page 18-27, January 2018., 2018 Abstract Background Hypofunction of different organs in the body is associated with diabetes, including in the oral cavity. Diabetes is often associated with xerostomia, but the underlying mechanism is not well characterized. Thus, the mechanisms underlying diabetes‐induced xerostomia were investigated in this study in KK‐A y mice as an experimental ...
Takashi Munemasa +8 more
wiley +1 more source
表达大熊猫源犬瘟热病毒H蛋白复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定
野生动物学报, 2021 为构建能够表达大熊猫源犬瘟热病毒（CDV）分离株giant panda/SX/2014 H蛋白的复制缺陷型重组腺病毒，利用反转录聚合酶链反应（RTPCR）扩增株giant panda/SX/2014 H基因，通过TOPO连接克隆至入门载体pENTR/DTOPO，得到重组入门质粒pENTR/DTOPOCDVH，然后与腺病毒骨架载体pAd/CMV/V5DEST进行LR重组，获得重组质粒pAdCDVH；重组质粒用PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞，获得重组腺病毒rAdCDVH ...
陈廷炜 1 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 构建携带HIV 1vpr基因的重组腺病毒 ,为进一步基因治疗的实验研究奠定基础。方法 利用AdEasy 1系统 ,通过含有目的基因片段vpr的穿梭载体pShuttle CMV/vpr和骨架质粒pAdEasy 1在细菌内同源重组的方法构建重组腺病毒质粒pAdCMV/vpr。将重组质粒转染 2 93细胞包装出重组腺病毒rvAdCMV/vpr。利用PCR等方法对重组腺病毒进行鉴定。结果 获得表达vpr蛋白的重组腺病毒。结论 成功构建出携带HIV 1vpr基因的重组腺病毒 ...
孟子辉, 王巍
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四川大学学报. 自然科学版, 2006 根据GenBank中鸡survivin cDNA序列,设计引物,从鸡胚组织提取总RNA,利用RT-PCR扩增鸡survivin全长cDNA,经T-A克隆后插入腺病毒穿梭载体、骨架载体,构建腺病毒重组质粒,转染293E4pIX细胞,构建鸡survivin重组腺病毒.T-A克隆的测序结果与GenBank中鸡survivin cDNA完全一致.限制性内切酶分析和PCR表明腺病毒质粒携带survivin基因,Western blot证实重组腺病毒正确表达survivin ...
李秋 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2003 目的 构建含有肝细胞生长因子 （HGF）NK4基因的重组腺病毒载体 ,为应用HGF/NK4进行肿瘤基因治疗奠定实验基础。方法 应用AdEasy腺病毒载体系统 ,将PCR扩增所得的NK4基因片段与穿梭质粒pShuttle CMV进行连接 ,获得重组质粒pShuttle CMV NK4 ,将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1共转化大肠杆菌BJ5 183获得重组腺病毒质粒pAdCMV NK4 ,用该质粒转染 2 93细胞包装产生出重组腺病毒rvAdCMV NK4。重组腺病毒分别经电子显微镜技术及RT ...
介建政 +5 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】构建小鼠端粒酶蛋白亚单位（mouse telomerase reverse transcriptase，mTERT）基因重组腺病毒载体，为下一步研究其体外表达和动物实验研究提供基础。【方法】从肝癌细胞中提取总RNA。采用RT-PER技术扩增mTERT的基因编码区序列，将序列定向克隆至真核表达载体pAC，将此表达质粒与腺病毒重组质粒pJM17共同转染293细胞，经同源重组产生重组腺病毒载体Ad-mTERT，纯化后的重组腺病毒载体Ad-mTERT在293细胞大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化 ...
姜楠 +7 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的制备YWHAZ重组腺病毒及逆转录病毒,在293T细胞中验证基因表达情况。方法将YWHAZ基因分别克隆至腺病毒穿梭质粒pacAd5CMV-IRES-GFP及逆转录病毒质粒pLXSN-IRES-GFP,并用酶切鉴定、PCR及测序验证后分别转染至HEK 293T及Ampho293细胞,构建重组腺病毒及逆转录病毒。重组病毒分别感染293T细胞,观察荧光验证病毒侵染效果,RT-PCR检测YWHAZ基因表达情况。结果 PCR、酶切鉴定及测序分析,重组腺病毒及逆转录病毒构建正确 ...
王雅雯, 于宏, 王世宝, 黄映辉
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腺病毒载体介导的大鼠DNA 多聚酶β重组体的构建及其在PC12 细胞中的表达
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2005 【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制，构建其重组腺病毒载体，并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列，TA克隆测序，酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV，电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。重组腺病毒质粒(pAd-polβ)和Lipofectamine2000转染293细胞，用重组腺病毒感染PC12细胞。【结果】10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ ...
钟建辉
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FKBP12．6重组腺病毒载体的构建及其心肌细胞感染效率测定
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】构建携带FKBP12．6基因的重组腺病毒载体以研究FKBP12．6在心力衰竭时心室肌电重构中的作用。【方法】将平端化的FKBP12．6片段连接到穿梭质粒pAdTrack-CMV构建重组穿梭质粒pAdTrack／FKBP12．6，用Xho I单酶切进行鉴定。采用电穿孔法将线性化pAdTrack／P12．6转化AdEasier-1细菌。产生重组腺病毒质粒pAdEasy-1／FKBP12．6。采用脂质体介导法用线性化pAdEasy-1／FKBP12．6转染293细胞，从病变的293细胞分离 ...
李德, 伍卫, 周淑娴
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