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, 2009 以感染草鱼(Ctenopharyngodon idellus)出血病病毒(GCHV)的草鱼胸腺为材料,构建了草鱼胸腺的SMARTcDNA文库。筛选文库获得到1933条有效EST序列。BLASTX分析显示,583条序列在公共数据库中能找到同源基因(E-value≤1.00E10-3,Identities≥30%),另外1350条序列则找不到显著同源性。已知基因按具体功能可划分为6类,大部分与细胞内的各种生理过程、细胞结构以及免疫防御相关 ...
张义兵, 桂建芳, 李洋洋
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携带Egr-1启动子和Endostatin基因的腺病毒穿梭质粒构建及鉴定
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的构建含辐射敏感启动子Egr-1和人内皮抑素（endostatin）基因的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-Endostatin。方法利用RT-PCR方法从人胎肝中扩增出人endostatin cDNA序列,从T-Egr1质粒中扩增出Egr-1基因序列,并将它们连接到pMD19T质粒进行测序,利用基因重组技术构建含有辐射诱导启动子Egr-1的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-Endostatin。结果经测序证实,获得的人endostatin基因和Egr ...
李艳博 +6 more
doaj
, 2000 在患暴发流行性发病鳜鱼的脾、肾、肝、鳃组织细胞的超薄切片中观察到直径为 12 0 150nm的二十面体病毒粒子 ,其截面呈六角形 ,有囊膜。将病鱼内脏与 10倍体积的PBS缓冲液制成组织匀浆液 ,过滤除菌后感染对数生长期的草鱼肾细胞。结果表明 ,该感染液在 2 8℃条件下 ,培养 36 4 8h ,生长旺盛的草鱼肾细胞开始出现CPE ,5 7d感染的单层细胞逐渐脱落死亡。该细胞病毒悬液具有感染性 ,可持续稳定地进行传代培养。感染细胞的病毒培养液 ,经差异离心纯化 ,负染制片 ...
方勤,艾桃山,邹桂平,喻运珍,刘家欣,汪亚平
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 ［目的 l 采用Cre-LoxP同源重组系统构建并鉴定携带人胰岛素样生长因子-1 (human insulin-like growth factor-I, hIGF-1)目的基因的复制缺陷重组腺病毒，为椎间盘退变的h!GF-1基因治疗奠定基础。［方法】 PCR合成h!GF-1基因，用pMD18-T载体克隆h!GF-1目的基因，酶切、测序并进行NCBI BLAST相似性在线分析。将pMD18-T- hIGF-1和pDNR-lr质粒分别行EcoR I和BamH I双酶切，DNA连接酶连接双酶切产物 ...
黄宗强
doaj
, 1999 在患暴发性流行病的鳜鱼组织中观察到 3种不同形态的病毒 ,它们分别是直径约为2 80nm的球形病毒、大小约为 2 5 0nm× 1 2 0nm的弹状病毒和大小约为 2 0 0nm× 1 0 0nm的杆状病毒 .这种现象表明 ,单一病毒疫苗难以达到预防鳜鱼暴发性流行病的原因可能是由于鳜鱼受到多种病毒病原的侵染 ,提示鳜鱼病毒病的防治不要忽视病毒病原的复杂性
张奇亚,李正秋
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以人甲胎蛋白启动子控制表达HIV-1vpr基因的重组腺病毒诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡作用的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的研究人甲胎蛋白（AFP）启动子控制表达HIV-1 vpr基因的重组腺病毒对AFP（+）肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡的作用,评估以该策略利用vpr进行肿瘤特异性基因治疗的可行性。方法将以AFP启动子控制HIV-1vpr表达的重组腺病毒rvAdAFP-vpr和空白载体rvAd-null分别感染AFP（+）的肝癌细胞BEL-7402和AFP（-）的肝癌细胞SMMC-7721,利用流式细胞仪检测Vpr的特异性表达和细胞周期分布,用细胞荧光染色和线粒体膜电位检测等方法观察细胞凋亡。结果与对照病毒rvAd ...
魏强 +5 more
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的构建携带人肝癌细胞CDK2基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体;方法设计能表达CDK2特异性的小干扰RNA(siRNA),构建pAKD-shRNA-CDK2重组质粒,采用磷酸钙共转染法将重组质粒pAKD-shRNACDK2、包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共转染AAV-293细胞,采用定量PCR方法对病毒进行滴度测定;结果三质粒共转染AAV-293细胞48h后,荧光显微镜下检测到GFP绿色荧光,表明共转染成功,测定病毒平均滴度为3.56×1012v.g/ml ...
于水澜, 姜颖, 于英君, 宋高臣
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, 1995 本文就对虾病毒最新进展与动态进行了概述。具体介绍了对虾病毒研究的各项成果,列出了已见报道的近20种对虾病毒病原的中英文名称;描述它们的生物学和病理学的一些特征,包括对虾病毒的地理分布、对虾病毒的传播途径、感染病对虾的发病症状以及宿主虾细胞、组织和器官的病理变化;概述了对虾病毒的诊断方法:显微镜观察生物学测定、免疫学方法、细胞培养、生化检验、分子生物学方法;根据目前还未发现有效治疗对虾病毒病的药物现状 ...
张奇亚
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】研究不同病情慢性乙型病毒性肝炎患者甲状腺激素水平的变化。【方法】76 例慢性乙型病毒性肝炎病人(36 例重度肝 炎和 40 例中度肝炎)和 40 例健康对照者,测定血清总 T 3( TT3)、总 T4( T T4)、游离 T3( FT3)、游离 T4( FT4)、反 T3(rT3)和促甲状腺素( TSH)。 【结果】与对照组和中度肝炎组比较,重度肝炎患者 T T3、TT4、FT3 和 FT4 水平显著下降, TSH 水平轻度下降, rT 3 水平显著升高; 与对照组比 较,中度肝炎患者 T T4
张国超
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, 2007 本发明公开了一种鳜鱼弹状病毒毒株及制备方法和应用，鳜鱼弹状病毒毒株Siniperca chuatsi rhabdovirus，SCRV0208，CCTCC NO：V202008，首先是GCF0208细胞经TC199培养基加牛血清，培养一定时间，长成单层细胞，用病毒液接种后，不同时段取样，切片，通过电镜观察确定挑斑时间，挑斑后再接种到单层细胞中，扩大培养，离心后获得提纯的病毒。本发明方法易行，有效地将弹状病毒与之伴随感染的病毒分开，获得高纯度的病毒抗原 ...
张奇亚 +3 more
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