Results 91 to 100 of about 3,748 (151)
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的构建携带人肝癌细胞CDK2基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体;方法设计能表达CDK2特异性的小干扰RNA(siRNA),构建pAKD-shRNA-CDK2重组质粒,采用磷酸钙共转染法将重组质粒pAKD-shRNACDK2、包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共转染AAV-293细胞,采用定量PCR方法对病毒进行滴度测定;结果三质粒共转染AAV-293细胞48h后,荧光显微镜下检测到GFP绿色荧光,表明共转染成功,测定病毒平均滴度为3.56×1012v.g/ml ...
于水澜, 姜颖, 于英君, 宋高臣
doaj
Establishment of ring primers real-time PCR for quantification of the mRNA expression levels of HER2 gene [PDF]
, 2013 本论文基于实时荧光定量PCR技术和环状引物技术，建立了一种乳腺癌HER2基因mRNA表达水平的环状引物EvaGreen染料实时荧光定量PCR（qPCR）检测方法。目前临床上用于检测HER2基因表达水平的方法都存在一些不足，且耗时（至少需要1~3天的时间），不利于临床诊断和治疗。因此，临床上迫切需要一种能够快速准确、简捷价廉且易于标准化的检测乳腺癌HER2基因表达水平的方法。 第一章，综述乳腺癌研究的发展过程与人表皮生长因子受体2（Humanepidermalgrowthfactorreceptor-2 ...
李怡
core
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】探讨采用荧光定量PCR 技术检测脑源性神经营养因子(BDNF)基因转染细胞(PcDNA3.1(+)/BDNF/ CHO)中BDNF 的拷贝数。【方法】分别以同等质量的PcDNA3.1(+)/BDNF/CHO , PcDNA3.1(+)/CHO(空载体转染细胞) 及CHO 细胞的DNA 为模板, 在PE5700PCR 仪上进行荧光定量PCR 分析。每个样本共检测30 次, 结果采用q 检验分析。 【结果】PcDNA3.1(+)/ BDNF/CHO 细胞、PcDNA3.1(+)/ CHO ...
李 影 +3 more
doaj
Sequences analysis and rapid detection of anisakid nematodes with zoonotic potential from the Taiwan Straits [PDF]
, 2010 异尖线虫病(anisakiasis)是一种重要的食源性人兽共患寄生虫病。全球每年都有大量人感染的病例报道。随着三文鱼、鳕鱼等日益进入国内大中城市市民的生食菜谱中，该病有可能出现于我国人群中，应引起高度重视。传统的异尖线虫检验对检验者的形态学知识背景要求高，且某些虫体缺乏关键形态特征，不易辨别。因此，建立一种操作简单、快速、灵敏度高的简单异尖线虫检验方法对异尖线虫病的防控很重要。 厦门市市场销售的来自台湾海峡的常见鱼类主要感染了6种寄生线虫：抹香鲸异尖线虫（Anisakisphyseteris ...
张少雷
core
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 ： 【目的】构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体，在E.coli Rosetta（DE3）菌株中高效表达并纯化融合 蛋白，研究TAT-RabGEF1融合蛋白对肥大细胞的跨膜转导活性。【方法】以小鼠组织cDNA为模板，设计上游和下游 含有限制性酶切位点和TAT序列的引物，PCR扩增目的片段TAT-RabGEF1，并通过双酶切构建PET28a-TAT-Rab?
方虹仪, 邢纪斌, 罗晨芳
doaj
Distribution of cell size of environmental bacteria and its implication with phylogeny and ecological significances [PDF]
, 2017 微生物的细胞大小是其最基本且重要的特征之一，和生物量、生长速率等其他生态学参数一并，反映出微生物群落中的资源配置策略、生态系统中群落结构以及食物网的结构分布等，有助于对应用生态学，特别是在生物量、能量流动、物质循环和生态系统功能等方面的理解提供理论基础。目前，绝大多数环境微生物的分子生态学研究仅局限于微生物的相对丰度或细胞个数绝对丰度的分析，忽略了细胞大小的生态学意义。 本研究以粒径分级过滤操作和高通量测序技术，分析污水处理厂活性污泥、出水、实验室生物反应器和海水样品中微生物细胞的大小分布 ...
胡文博
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的确定低剂量力达霉素可诱导小鼠胚胎癌P19细胞分化,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养P19细胞,分别加入力达霉素和维甲酸（retinoiacid,RA）,观察细胞形态,并分别行PCR和免疫荧光染色检测巢蛋白（Nestin）和微管相关蛋白2（MAP2）的表达。Western blot检测低剂量力达霉素和维甲酸处理该细胞后Oct4的表达。分别用慢病毒Oct4和si-Oct4感染P19细胞,使其过表达和下调Oct4,观察细胞形态,并行PCR和免疫荧光染色观察Nestin和MAP2的变化。结果 ...
周娟 +5 more
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的探索TSGF和hMAM表达指标对乳腺癌细胞外周血微转移诊断的应用价值。方法分离受检者外周血单个核细胞,TRIZOL液提取总RNA,作RT-PCR并用-βactin监控;确认的cDNA先作普通PCR扩增,再作荧光定量PCR扩增。血清作TSGF检测。结果64例标本有63例确认转录为cDNA,其中乳腺癌43例、良性乳腺肿瘤和正常对照各10例。经普通PCR后再作荧光定量PCR,乳腺癌hMAM表达阳性率为53.3%、良性乳腺肿瘤和正常对照均无阳性,乳腺癌组与良性乳腺肿瘤或正常对照组间hMAM表达有显著差异 ...
董学君 +6 more
doaj
实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌患者外周血中uPA基因表达水平及其临床意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨人外周血中尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen activator,uPA）基因表达水平与乳腺癌临床分期和转移的关系,评价其对乳腺癌辅助诊断及判断预后的临床意义。方法采用实时荧光定量PCR方法检测71例正常人和90例乳腺癌患者外周血中uPA mRNA表达水平。结果97.8%的乳腺癌病人外周血中有uPA基因表达,在正常人外周血中的表达率为40.8%;基因表达水平与临床分期和肿物转移情况相关 ...
刘俊泽 +3 more
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的定量检测脓毒症大鼠肠道主要菌群的变化情况,同时找出引起脓毒症大鼠患病甚至死亡的主要致病菌。方法采用盲肠结扎穿孔法（CLP）制作大鼠脓毒症模型,取腹水进行细菌培养和菌种鉴定;同时取结肠内容物提取DNA,使用荧光定量PCR法对肠道内5种细菌进行定量。结果与对照组相比模型组大鼠肠道内双歧杆菌、乳杆菌数量明显减少,而大肠埃希菌的数量则有所增加。同时大肠埃希菌在腹水中大量繁殖。结论肠道中益生菌数量减少和条件致病菌的大量繁殖是导致脓毒症大鼠发病和死亡的微生态学因素。
刘大全 +4 more
doaj