Results 81 to 90 of about 3,748 (151)
Effect and mechanism of autophagy in corneal epithelial air-exposed injury [PDF]
, 2016 目的探讨自噬在角膜上皮细胞空气暴露损伤中的作用及内在机制。 方法以人角膜上皮细胞系和C57BL/6小鼠建立角膜空气暴露损伤模型。透射电子显微镜检测损伤过程中细胞结构的变化；免疫荧光染色、免疫印迹和实时荧光定量PCR等方法检测损伤过程中自噬相关基因以及炎症相关因子的表达变化；TUNEL染色检测细胞凋亡的发生。 结果透射电子显微镜观察到空气暴露培养的HCE细胞中自噬泡的存在。进一步通过免疫荧光染色和免疫印迹等检测方法证实随着空气暴露培养时间的延长，细胞中LC3（LC3Ⅱ）表达显著增强 ...
王国良
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的利用荧光定量PCR检测健康育龄妇女阴道中的主要乳酸杆菌,并比较不同季节阴道乳酸杆菌分离率及数量的差异。方法分别在春夏季、秋冬季采集健康妇女阴道分泌物标本97例（春夏季63例、秋冬季34例）,应用SYBR GreenI荧光定量PCR方法测定标本中5种乳酸杆菌16SrRNA基因拷贝数量并比较两组间的差异。结果健康妇女阴道乳酸杆菌的分离率达到96.9%,其中卷曲乳酸杆菌分离率66.0%、惰性乳酸杆菌45.4%。健康妇女阴道乳酸杆菌数量（Log10 copies/ml）为6.21±1.28 ...
彭国丽, 吕治, 苏建荣
doaj
Research of Pfu polymerase improvement for Real-time fluorescent quantitative PCR [PDF]
, 2017 自从1988年Saiki等将耐热性的Taq聚合酶引入PCR反应后，极大地推动了PCR技术的推广，也带动了实时荧光定量PCR（qPCR）技术的兴起，分子生物学发展日新月异。随着技术的推广与应用，人们也逐渐发现了Taq聚合酶自身存在的缺点，其保真性差不适合高保真的PCR，复杂样本扩增能力差需要对样本进行处理以及体系的优化等等。而B族的Pfu聚合酶具有高保真性、高行进性和强耐干扰能力，但是不具有5’-3’外切活性且强3’-5’外切活性会水解游离探针影响荧光增益信号检测而不能用于qPCR ...
陆龙飞
core
荧光定量PCR检测大肠癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA的意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的探讨荧光定量PCR技术检测大肠癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA的临床意义。方法采用荧光定量PCR技术,检测大肠癌患者76例,健康志愿者30例外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA水平。结果76例大肠癌患者外周血CK19mRNA的水平为5 962.5±19 926.1 copies/ml,其中38例阳性,阳性率为50.0%;CK20mRNA的水平为6 244.3±15 113.1 copies/ml,其中28例阳性,阳性率为36.8 ...
李招云 +3 more
doaj
Functional analysis of Gsc gene in amphioxus during early embryonic development [PDF]
, 2015 文昌鱼是最接近脊椎动物直接祖先的现生动物，是研究脊椎动物发育相关基因功能演化的理想模型。转录因子Goosecoid（Gsc）为Homeobox基因家族重要成员，其mRNA特异表达在脊椎动物胚胎组织者（Organizer）、脊索前板（prechordalplate）等组织区域。在爪蟾中异位表达该基因可产生类似组织者的功能，诱导胚胎第二体轴的形成，该基因还可通过抑制Wnt、BMP等信号活性，参与脊椎动物背腹轴的形成和脑的发育 ...
商留珂
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2014 目的建立大鼠左颈总动脉与左侧颈外静脉吻合分流性肺动脉高压模型。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为三组:吻合组（A组,n=15）,结扎组（B组,n=15）,正常组（C组,n=15）。饲养3月后测定血流动力学指标,右心室/左心室+室间隔质量比,肺组织切片病理变化,ELISA方法测定血浆ET-1浓度,荧光定量PCR测定肺组织表达内皮素-1mRNA的变化。结果与B,C两组相比,A组:右心室收缩压力明显升高,血清内皮素-1水平升高,荧光定量PCR结果显示A组内皮素-1mRNA的相对表达量是B组的2.601倍 ...
赵科研 +4 more
doaj
Detection of Anisakid Nematodes by an SYBR Green Ⅰ Real-time PCR [PDF]
, 2010 目的运用荧光定量PCr法检测异尖线虫类病原体。方法于鱼类内脏中检获6种异尖线虫类幼虫:抹香鲸异尖线虫、简单异尖线虫、内弯对盲囊线虫、带鱼针蛔线虫、灰海鳗对盲囊线虫和台湾海峡鱼类中一优势种对盲囊线虫。提取各虫体dnA,PCr扩增ITS-2序列,测序并进行数据库比对。依据测序结果设计特异引物,常规PCr检验引物特异性。将ITS-2序列扩增产物回收、纯化后经T克隆转入大肠埃希菌dH5α,提取重组质粒,鉴定后作为标准品模板建立荧光定量PCr标准曲线,并做敏感性和重复性试验 ...
倪芳 +5 more
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的探讨荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸（HBV-DNA）时核酸提取体系中加入样本量的不同和不同反应体系对检测结果的影响。方法选取乙肝检测患者DNA定量结果为低拷贝数（10-103copies/ml）和高拷贝数（105-107copies/ml）样本各10例,分别按2种核酸提取体系及2种反应体系分为4组进行HBV-DNA荧光定量PCR检测。结果 10例低拷贝数样本减少反应体系后只有3例检出有反应,由于反应体系的减小造成结果存在明显差异 ...
郭楠 +4 more
doaj
Molecular Detection of Angiostrongylus cantonensis and Cloning and Expression of HSP70 Gene [PDF]
, 2011 广州管圆线虫病（Angiostrongyliasis）是由广州管圆线虫（Angiostrongyluscantonensis）感染而引起的。作为一种新发的食源性传染性疾病，广州管圆线虫病在全球的流行都呈现出上升的趋势，对人类的威胁也越来越大。传统的广州管圆线虫检测对检测者的形态学知识背景要求高，且幼虫期形态很小，不易辨别。因此，建立一种操作简单、快速、灵敏度高的广州管圆线虫检测方法对广州管圆线虫病的防控很重要。 本文采用通用引物成功克隆了广州管圆线虫的rDNAITS序列（包括部分18S，ITS1，5 ...
刘江
core
Effects of Jiangu Granules on the proliferation of osteoblasts through G_1/S phase cell-cycle regulated proteins [PDF]
, 2016 目的观察健骨颗粒对成骨细胞G_1/S期调控的影响,探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的作用机制。方法制备健骨颗粒血清组、模型血清组和雌二醇血清组。采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以模型血清和雌二醇血清为对照。运用流式细胞术检测成骨细胞增殖周期,荧光定量PCR法检测成骨细胞G_1/S期调控蛋白Cyclin E、CDK2、p21和转录因子E2F-1 m RNA的表达。结果 15%的雌二醇血清与健骨颗粒血清干预48 h,成骨细胞增殖速度均明显快于模型血清组 ...
吴银生 +6 more
core