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人类基因组计划即将提前完成,人类将进入后基因组——功能基因组时代。作为以功能执行者-蛋白质为研究对象的蛋白质组学将是21世纪整体细胞生物学新的最重要的内容,而且将为医药、农业和工业的革新提供崭新的思路。 论文采用蛋白质组学方法对水产养殖动物的重要致病菌——嗜水气单胞菌的分子解剖图谱、免疫原性蛋白、与传代和耐药有关的功能蛋白质组学进行较系统的研究。 实验首先初步构建了一张嗜水气单胞菌总蛋白质的分子解剖图谱,通过对124个蛋白质的肽质量指纹图谱分析,鉴定了40个蛋白质,其中17个为嗜水气单胞菌的蛋白 ...
吴谋胜
core
[目的]探讨多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢细胞外基质代谢是否存在异常。[方法]收集PCOS卵巢组织20例作为PCOS组。正常妇女卵巢组织23例作为对照组,用SP免疫组化法比较两组不同期别卵泡基底膜的Ⅳ型胶原、层连接蛋白及串珠样蛋白聚糖3种主要蛋白组分的表达。[结果]两组原始卵泡基底膜3种主要蛋白组分的表达相似;PCOS组初级卵泡基底膜的Ⅳ型胶原、层连接蛋白的表达明显多于对照组(P〈0.05):PCOS组早期次级卵泡及囊状卵泡基底膜的Ⅳ型胶原、层连接蛋白及串珠样蛋白聚的表达明显多于对照组(P〈0.05)。[
冯淑英 +5 more
doaj
Proteomic analysis of the developmental mechanisms at early mouse embryos [PDF]
胚胎发育是一个严格控制的,由一系列的细胞增殖,分化和凋亡组成的精确过程。胚胎植入后的早期阶段是胚胎发育的一个重要时期,在这段时间里,内细胞团迅速增殖并且分化形成胚外外胚层和胚胎的三个胚层,由此引发了一系列的器官分化和组织形成。由于胚胎解剖和收集上的困难,目前关于早期胚胎发育的机理还不是特别清楚。我们在国际上首先利用蛋白组学方法研究在小鼠胚胎发育早期的蛋白质表达差异,鉴定了一系列的在E6.5和E7.5胚胎之间差异表达的蛋白质,揭示了在小鼠胚胎植入后早期胚胎发育的相关分子生物学机制;此外 ...
林水宾
core
目的基于4D Lable-free蛋白质组学技术分析富氢水干预对老年性聋小鼠耳蜗差异蛋白表达的影响,探索其作用机制。方法20只雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组(n=4):年轻组、自然衰老组、诱导衰老组、自然衰老富氢水治疗组、诱导衰老富氢水治疗组。检测5组实验小鼠的听觉脑干反应(ABR)听力阈值,取耳蜗组织进行蛋白组学分析,包括差异蛋白筛选、基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果共鉴定到3 925个差异表达蛋白。年轻组与自然衰老组差异表达蛋白共有559个(上调蛋白400个,
于书剑, 汪欣, 于红
doaj
摘 要: 【目的】 探讨人不同病理级别脑胶质瘤组织中着丝粒蛋白W(CENP-W)?核仁磷酸蛋白(B23)?大鼠肉瘤癌基因(RAS)的表达及其相关性?【方法】 在高级别胶质瘤组织?低级别胶质瘤及瘤旁正常脑组织中,采用免疫组织化学法分别检测CENP-W的表达水平,并统计学分析蛋白表达水平与胶质瘤临床病理特征的关系,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测CENP-W?B23?RAS的表达水平,分析与胶质瘤分级的关系以及表达的相关性?应用特异性sirna干扰U251细胞中CENP-W表达使其下调后 ...
doaj
双向凝胶电泳-飞行时问质谱法分析促癌剂TPA诱导NIH3T3细胞表达变化的蛋白质
【目的】寻找并鉴定在TPA处理后小鼠成纤维细胞NIH3T3中表达发生变化的蛋白质,为阐明TPA 在诱导细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。(方法l用TPA刺激NIH3T3细胞,分别提取实验组和对照组 的NIH3T3细胞的总蛋白质,通过聚丙烯酰胺凝胶双向电泳,硝酸银染色后用软件分析寻找差异表达的蛋白质, 并对差异蛋白质进行质谱鉴定。(结果l软件分析显示TPA处理后的NIH3T3细胞中有明显的差异表达蛋白质, 质谱鉴定表明TPA处理后,表达上调的蛋白质有线粒体基质蛋白Pl前体、微管蛋白beta-5链 ...
江培洲
doaj
目的建立优化的大鼠肾移植急性排斥反应异基因移植物蛋白质组学研究双向电泳技术体系。方法利用双向电泳技术研究大鼠同种异基因移植3d、7d后肾脏组织蛋白质,对IPG胶条范围、样品制备、上样量及染色方法进行比较,优化实验条件。结果获得了大鼠肾移植急性排斥反应肾脏组织蛋白质组电泳图谱。结论建立了大鼠肾移植急性排斥肾脏组织蛋白质组学研究地双向电泳技术平台,为其他肾脏病学研究提供了一套切实可行的的技术方案。
吕天羽 +7 more
doaj
【目的】构建丙型肝炎病毒(HCV)包膜蛋白E2基因的重组原核表达质粒,并获得E2蛋白的高效表达。【方法】通过RT-PCR法从HCV RNA阳性的血清标本中扩增出HCVE2区基因595bp,PCR产物分别经BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切后连接到经同样酶切的原核表达载体PET22b(+)上,转化大肠杆菌DH5α菌株,获得阳性重组质粒PETB,阳性质粒转化BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Westemblot鉴定。【结果】成功地克隆了HCVE2区基因,构建了其原核表达质粒 ...
代志琰 +6 more
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目的探讨HSPD1蛋白在肾癌及癌旁正常肾皮质组织的表达及其意义。方法应用二维色谱-质谱联用技术分析18例肾癌患者肿瘤标本,筛选出肾癌组织及癌旁正常肾皮质组织差异表达的HSPD1蛋白,并用免疫印迹验证其准确性。结果质谱鉴定后显示,HSPD1蛋白在肾癌组织中的表达水平低于癌旁正常肾皮质组织,免疫印迹证实其准确性。结论低表达的HSPD1可能与肾癌的发生发展有关。
印璞 +5 more
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