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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997 摘 要 根据大鼠脑型一氧化氮合酶( bNO S)和内皮型一氧化氮合酶( eNO S)的cDNA序列分别设计特异 引物,用逆转录聚合酶链反应( RT- PCR)方法检测2种NO S在脑、肝脏和前列腺中的m RN A表达差异。结果 表明: bNOS在小脑、大脑皮质和海马中有表达,并且在肝脏和前列腺组织中也有表达: eNOS在肝组织中有表 达,在小脑、大脑皮质和海马等脑组织中均有表达,但前列腺组织中未检测到m RNA表达。2种NOS在上述组 织中的广泛分布提示NO具有多种复杂的 ...
高国全 姚志彬 马涧泉
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】观察血管紧张素Ⅱ对心肌细胞内皮型一氧化氮合酶( eNOS)表达的影响 。【方法】用逆转录聚合酶链式反 应(RT -PCR)检测新生大鼠心肌细胞 eNOS mRNA(以 GAPDH 为内标)水平。【结果】在培养新生大鼠心肌细胞和非心肌细 胞中均能检测到 eNOS mRNA ,其中心肌细胞的表达高于非心肌细胞; 血管紧张素Ⅱ作用 6、12 和 24 h, 心肌细胞 eNOS mRNA 水平明显减少。【结论】在大鼠心肌细胞和非心肌细胞皆有 eNOS基因表达; 血管紧张素Ⅱ可抑制心肌细胞 eNOS ...
詹昌德, 潘敬运
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转化生长因子β2（TGF-β2）在老年性白内障与正常晶状体上皮细胞中mRNA表达的差异
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的研究老年性白内障晶状体上皮细胞中转化生长因子β2（TGF-β2）的表达变化情况。方法应用逆转录聚合酶链反应（semi-quantitaive reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）方法,检测TGF-β2在老年性白内障晶状体上皮细胞中mRNA的表达水平。结果老年性白内障晶状体上皮细胞中TGF-β2mRNA的表达水平高于对照组,差异有显著性。结论 TGF-β2的高表达提示其可能参与了老年性白内障晶状体上皮细胞的凋亡 ...
李桂荣, 周鸿雁, 张文松
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 【目的】将G250抗原cDNA片段转染入sp2/0细胞中并获得稳定表达,为G250基因疫苗研究提供实验工具。【方法】用脂质体转染法将鉴定好的重组质粒转染入sp2/0细胞中,经G418筛选得到稳定表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光、Western blot检测G250基因在sp2/0细胞中的表达。【结果】转染2周后,筛选出阳性sp2/0细胞克隆,通过RT-PCR证实有G250mRNA转录,间接免疫荧光可以见到阳性细胞,Western blot证实有G250抗原表达。【结论 ...
张亚东 +5 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1993 本文应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测Ⅲ型登革病毒基因。所设计引物在E基因组,引物2位于核苷酸序列的1139～1158位,引物1位于1453～1471位,反应产物为333bp,内含1个HindⅢ限制性内切酶位点,酶切后有128 bp和199 bp两个片段。产物在含溴化乙锭的2％琼脂糖中电泳。采用RT-PCR法可测出少至5个半数组织细胞培养感染量(TCID_so)的病毒RNA。
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热休克蛋白HSP27和HSP70在老年性白内障患者晶状体上皮细胞中表达及其意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的研究老年性白内障晶状体上皮细胞中热休克蛋白HSP27和HSP70的表达变化情况。方法应用逆转录聚合酶链反应（semi-quantitaive reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）方法,检测HSP27、HSP70在老年性白内障晶状体上皮细胞中mRNA的表达水平。结果正常人晶状体上皮细胞中仅有少量的HSP27和HSP70mRNA表达;而老年性白内障组HSP27和HSP70表达明显增高,差异有显著性 ...
李桂荣, 周鸿雁, 张文松
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浙江大学学报. 医学版目的研究核蛋白（Nupr）1调控软骨细胞铁死亡在骨关节炎进展中的作用及机制。方法将小鼠膝关节软骨细胞分为小干扰RNA（siRNA）对照组、靶向Nupr1的siRNA（siNupr1）组、siRNA对照+IL-1β组（siRNA对照干扰24 h后再加入10 ng/mL IL-1β）和siNupr1+IL-1β组（siNupr1干扰24 h后再加入10 ng/mL IL-1β）。采用蛋白质印迹法和定量逆转录聚合酶链反应法分别检测Nupr1蛋白及其信使RNA（mRNA）表达。采用细胞计数试剂盒（CCK ...
廖 太阳 +6 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2010 【目的】 制备出一种人硫氧还蛋白(hTrx)基因修饰的肝细胞65377; 【方法】 逆转录聚合酶链反应法扩增出hTrx cDNA,应用重组逆转录病毒制备hTrx基因修饰大鼠肝细胞65377;白蛋白免疫组化SABC法进行肝细胞活性鉴定,MTT比色试验进行抗氧化应激能力检测65377;【结果】 克隆出hTrx开放阅读框cDNA并制备出重组逆转录病毒,感染真核细胞后可分泌融合表达的hTrx并具有生物学活性65377;制备出hTrx基因修饰大鼠肝细胞,免疫组化SABC法显示肝细胞功能正常 ...
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 将敏药碱- G作用于K5 6 2 /ADM细胞,来逆转肿瘤细胞的多药耐药,研究其逆转作用和机制。方法 四唑盐比色法（MTT法）检测阿霉素对K5 6 2 /ADM细胞的半数抑制浓度（IC5 0 ） ;逆转录聚合酶链式反应（RT- PCR）检测mdr1基因水平;流式细胞仪分析细胞内罗丹明（Rh12 3）浓度,以检测P 170泵功能;免疫组化方法检测P 170的表达水平。结果 MTT结果显示,无毒剂量的敏药碱 G与ADM联合应用比单纯加ADM（同等剂量）对K5 6 2 /ADM细胞的IC5 0降低了5.
王天晓, 张凤春, 杨晓虹
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 探讨肝素酶表达在胃癌发展中的作用。方法 用逆转录聚合酶链反应（RT PCR）测定4 2例胃癌和2 6例非癌组织中肝素酶的表达情况,采用χ2 检验比较肝素酶的表达与胃癌临床病理特征之间的关系。结果 胃癌中有2 6例肝素酶呈阳性表达（阳性率6 1. 9% ） ;非癌组织中只有1例呈弱阳性表达（阳性率3 8% ）。肝素酶mRNA在胃癌TNM分期中Ⅲ、Ⅳ期明显比Ⅰ、Ⅱ期表达阳性率高（P
陈岳明 +4 more
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