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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 1997 为探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）与ＨＣＶ感染者血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）的关系，本文应用ＨＣＶＮＳ５区逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对７９例抗－ＨＣＶ阳性者进行ＨＣＶＲＮＡ检测，同时用限制性内功酶法对ＨＣＶ进行基因分型。检出ＨＣＶＲＮＡ阳性者６９例，其中ＨＣＶⅡ型３０例，Ⅲ型２７例，Ⅱ／Ⅲ混合型１２例，ＨＣＶ不同的基因型在ＡＬＴ正常组和异常组中的分布有显著性差异（Ｐ＜０．０１），Ⅱ型和Ⅱ／Ⅲ混合型主要分布于ＡＬＴ异常组中，Ⅲ型主要分布于ＡＬＴ正常组中。提示Ⅱ型和Ⅱ ...
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的研究人宫颈癌细胞（Hela）对丙型肝炎病毒（HCV）的易感性,建立HCV细胞感染模型。方法将Hela细胞与慢性HCV患者血清共同温育8 h,收集不同时间点标本,用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测细胞培养上清液中正负链RNA,S-P法检测细胞内HCV NS1特异性抗原的表达情况。结果培养上清中可持续检测到HCV正链RNA,并可间断地检测到HCV负链RNA;HCV NS1特异性抗原能在感染细胞内稳定表达,阳性物质多位于胞浆中。结论Hela细胞不但对HCV易感,而且可以支持HCV体外复制表达。
陈佳玉, 陈佳琪, 金显云
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非小细胞肺癌患者检测血液CEA mRNA和CK19 mRNA的意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的评价CEA mRNA和CK19 mRNA指标监测非小细胞肺癌（NSCLC）血液转移和评估预后的应用价值。方法以97例NSCLC患者、51例非肿瘤性呼吸系统疾病患者（疾病对照组）和36例健康人（健康对照组）为对象,应用逆转录-套式-聚合酶链反应检测CEA mRNA和CK19 mRNA。结果NSCLC组血液CEA mRNA和CK19 mRNA的阳性结果显著性高于两个对照组 ...
王卫军 +5 more
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丙型肝炎病毒基因高变区（E1，E2／NS1）的分子克隆及基因型鉴定
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1995 对广东省一个患者血清中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因高变区进行分子克隆及基因型鉴定。采用微粒吸附法提取ＨＣＶＲＮＡ，随机引物逆转录后进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）。所用引物位于Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１区，扩增产物８０６ｂｐ，产物提纯后定向插入ｐＢＶ２２０质粒载体，重组体转染ＤＨ５α菌株，筛选菌落经增殖后碱变性法提取质粒，再通过ＰＣＲ及酶切法鉴定阳性克隆。我们还用酶切法对此株克隆的基因型作了初步鉴定，证明属于１组Ⅱ型。
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和血管内皮生长因子（VEGF）在舌鳞癌细胞株Tca8113中的表达,为进一步研究iNOS和VEGF在舌鳞癌肿瘤血管生成中的作用提供实验基础。【方法】采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和SP免疫组化方法,对舌鳞癌细胞株Tca8113中iNOS和VEGF mRNA和蛋白表达情况进行检测。【结果】RT-PCR检测到舌鳞癌Tca8113细胞株中iNOS／VEGF mRNA条带明显,SP免疫组化检测到iNOS／VEGF蛋白在舌癌细胞胞浆中呈强阳性表达。【结论 ...
曾曙光 +7 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2003 目的 研究外周血肝癌发生相关甲胎蛋白 （AFP）基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的价值。方法 :从肝癌组织和肝病患者外周血中制备总RNA ,经随机引物和逆转录酶作用合成cDNA ,再以逆转录巢式聚合酶链反应 （RT -PCR）扩增AFP基因 ,并分析其临床价值。结果 RT -巢式PCR扩增的AFP基因片段为 15 9bp ,与原设计一致 ;在 2 0份肝癌及其癌周和远癌组织中 ,AFP基因阳性率分别为 10 0 %、6 5 %和 0 % ;肝癌患者外周血AFP基因检出率为 5 3.7% ,明显高于肝硬化 ...
杨大明 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2003 目的 研究外周血肝癌发生相关甲胎蛋白 (AFP)基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的价值。方法 :从肝癌组织和肝病患者外周血中制备总RNA ,经随机引物和逆转录酶作用合成cDNA ,再以逆转录巢式聚合酶链反应 (RT -PCR)扩增AFP基因 ,并分析其临床价值。结果 RT -巢式PCR扩增的AFP基因片段为 15 9bp ,与原设计一致 ;在 2 0份肝癌及其癌周和远癌组织中 ,AFP基因阳性率分别为 10 0 %、6 5 %和 0 % ;肝癌患者外周血AFP基因检出率为 5 3.7% ,明显高于肝硬化 ...
杨大明 +16 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994 采用低浓度２－巯基乙醇作为裂解剂，配合高热变性处理血清等标本中丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶＲＮＡ）模板，将裂解上清直接逆转录，使ＨＣＶＲＮＡ转变为ｃＤＮＡ，再行套式多聚酶链反应（ＰＣＲ）扩增．５８份抗－ＨＣＶ阳性血清标本中，可检出３２份（５５．２％）ＨＣＶＲＮＡ，虽与常规的酸胍酚抽提方法所检出相当（即３０份被检出ＨＣＶＲＮＡ阳性，５１．７％），由于这种直接法省去了用酚及氯仿抽提和醇类沉淀等步骤，具有明显的实用价值。
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实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小干扰RNA（siRNA）表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术。方法体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250 mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250 mRNA的表达情况。结果四条siRNA分别使G250 mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%
赵俊峰 +5 more
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定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的建立检测人颗粒溶素（granulysin,GNLY）mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定PBC患者外周血单个核细胞（PBMC）中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化（PBC,primarybiliary cirrhosis）发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建质粒pET28a-GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定了60例PBC、60例乙型肝炎肝硬化及60例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量 ...
钱琤 +10 more
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