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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1993 以台湾株丙型肝炎病毒的非结构区基因序列（HCV-T3）设计内外五条呈巢式排列的引物,结合AGPC核酸一步抽提法,寡聚核苷酸探针5′末端标记法和Southern电泳转移杂交法,建立简捷特异检测HCV-RNA的逆转录一多聚酶链反应（RT-PCR）技术。应用这一技术对121例非甲非乙型肝炎患者和45例抗HCV阳性的慢性乙型肝炎患者进行了血浆HCV-RNA检测,结果阳性率分别为66.1％（80/121）和66.7％（30/45）。本文对这一技术的方法学、HCV-RNA与抗HCV的关系 ...
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997 摘 要 从广东省1例慢性丙型肝炎病人血清中提取HCV RN A,随机引物逆转录为cDN A后用HCV 5’ 端非编码区( 5’ NCR)特异引物进行聚合酶链反应( PC R)。扩增产物302 bp,经补齐和提纯后插入pUC 19质 粒,获得的重组质粒pUN采用双脱氧链终止法测定核苷酸序列,与国内外多个株比较,核苷酸同源性介乎 92.
李 刚 姚集鲁 彭文伟 王 斌 吕 凌
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的研究微小RNA（microRNA,简称miRNA）与心肌细胞氧化应激的关系,作为探讨缺血再灌注损伤分子病理生理的基础。方法培养中的H9c2（2-1）心肌细胞以过氧化氢处理产生氧化应激,然后收集心肌细胞提取miRNA。选取miR-210和miR-24进行逆转录,再进行定量实时聚合酶链式反应。结果心肌细胞以过氧化氢处理2h后,与对照相比,miR-210显著降低至对照水平的47.07%（P=0.013）,而miR-24的水平则大幅升高,达到了对照水平的344.48%（P=0.002）。结论 ...
郭威早, 张显峰, 纪红
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的探讨白血病抑制因子受体（Leukaemia inhibitory factor receptor,LIFR）在子宫内膜的表达,与原因不明原发不孕症的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测30例研究组（原因不明原发不孕症患者）和20例对照组患者分泌中期子宫内膜LIFRmRNA的表达。结果研究组分泌中期子宫内膜LIFRmRNA表达水平为0.640 1±0.234 9,对照组为1.558 7±0.296 1,研究组较对照组明显降低,差异有极显著性 ...
张松灵 +3 more
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盐酸二甲双胍对非酒精性脂肪肝大鼠脂肪组织肿瘤坏死因子α基因表达的影响
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 [目的]以逆转录（RT）和实时定量聚合酶链式反应（real-time qPCR）方法检测和分析非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠模型的药物干预效果.[方法]以高脂饲料饲喂雄性Wistar大鼠12周诱发NAFLD,然后转以基础饲料饲养,并分别进行盐酸二甲双胍干预与蒸馏水灌喂对照,每组8只,为期4周.从大鼠脂肪组织提取总RNA并逆转录成为cDNA,通过real-time qPCR检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA的相对水平,以t检验分析两组间数据的差异.[结果]干预组大鼠脂肪组织的TNF-α ...
江庆澜 +6 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】建立TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肝细胞再生磷酸酯酶2（PRL-2）mRNA表达水平，并应用该法检测原发性肝细胞癌中PRL-2基因的表达。【方法】构建含PRL-2基因开放阅读框架的T载体．制作标准曲线。提取手术切除12例人肝癌、门静脉癌栓（PVTT）和癌旁组织总RNA并逆转录为cDNA。应用实时荧光定量PCR法观察人肝细胞癌组织和门静脉癌栓及癌旁组织中PRL-2的表达水平。【结果】线性检测范围达5个数量级，最低检测下限为1×10^2拷贝，最高检测上限为1×10 ...
程超 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的探讨siRNA（small interfering RNA）对T24人膀胱癌细胞株VEGF基因表达的抑制及癌细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。方法体外构建两个针对VEGF基因的siVEGF的重组质粒,转染T24细胞;应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定VEGF基因的表达,并用MTT法和流式细胞仪检测siVEGF对细胞的增殖抑制率和凋亡的影响。结果构建的两个siVEGF重组质粒分别使VEGF基因表达下调到空白组的21.02%和30.13%;control ...
李然伟 +5 more
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肝细胞肝癌survivin、ICAM-1表达相关性及其临床意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的探讨肝细胞肝癌（HCC）survivin与细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的表达相关性及其临床意义。方法应用链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学（SP）法检测36例HCC中survivin与ICAM-1的表达,同时用逆转录聚合酶链反应测定HCC癌组织及癌旁组织中survivin、ICAM-1mRNA的表达。结果HCC中survivin、ICAM-1表达阳性率分别为58.3%（21/36）,66.7%（24/36）,高于癌旁组织 ...
覃理灵, 梅铭惠, 廖维甲
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的探讨PAI的发卡样siRNA真核表达载体PAI siRNA对人肝癌HpG2细胞VEGF表达的影响。方法设计短发夹状PAI siRNA的寡核苷酸链,将其插入到真核细胞表达载体pSilencerTM 2.1-U6 neo载体中,构建的重组载体后;采用脂质体转染方法将构建的重组载体导入人肝癌细胞HpG2中,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、westernblot法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达变化以及对VEGF表达的影响。结果经测序证明PAI siRNA序列正确;转染PAI ...
杜建时, 赵晴, 张静菊, 王嘉桔
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2000 目的 建立灵敏可靠的外周血中检出滋养细胞肿瘤细胞的方法，为早期诊断滋养细胞肿瘤的转移奠定实验基础。 方法 在已知数量的ＪＡＲ细胞掺入１０ｍｌ外周血中建立肿瘤细胞血行转移实验模型，荧光定量逆转录－聚合酶链反应（ＦＱ－ＲＴ－ＰＣＲ）定量检测ＪＡＲ细胞的 β－ｈＣＧ—ｍＲＮＡ。结果 ＦＱ-ＲＴ－ＰＣＲ可检测到相当于１个ＪＡＲ细胞表达的 β－ｈＣＧ—ｍＲＮＡ量，但当ＪＡＲ细胞被掺入１０ｍｌ外周血中时，细胞数＞１０２个方可经富集后可检测到。结论 ＦＱ－ＲＴ－ＰＣＲ是一种敏感的检测手 段 ...
郑彤彤, 吕时铭
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