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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】构建人瘦素基因 cDNA 克隆, 并进行序列分析。【方法】用逆转录聚合酶链反应扩增人瘦素基因 cDNA , 获得片段( 640 bp)连接至 pUC19 载体, 并转化大肠杆菌 DH5α。以末端终止法进行序列测定。【结果】所克隆的人瘦素 cDNA 含全长的人瘦素基因编码区,仅 287 位的腺苷酸被鸟苷酸代替, 导致 96 位编码谷氨酰胺的密码子 CAA 改变为编码精氨酸的 CGA, 其意义尚待阐明。【结论】以逆转录聚合酶链反应方法成功地构建了人瘦素基因 cDNA 克隆。
徐明彤, 钟光恕, 傅祖植
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 本文通过荧光定量逆转录-聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）,检测β-hCG-mRNA,建立在外周血中检出滋养细胞方法,推测妊娠肿瘤患者外周血中滋养细胞的含量,为肿瘤的发展转移做预防。
兰晶
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】构建人Ⅰ 型基质金属蛋白酶基因(MMP1)真核表达重组质粒, 并进行序列分析。【方法】用逆转录聚 合酶链反应扩增人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 获得目的基因片段(1 407 bp)连接至pcDNA3 载体, 并转化大肠杆菌DH5α, 筛 选阳性克隆并鉴定, 并对片断全长进行DNA 序列测定。【结果】所克隆人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 含全长MMP1 编码区, 与GeneBank 公布序列比较, 仅1 318 位的胞苷酸C 突变为腺苷酸A。并成功构建了含有MMP1 ...
彭 慧, 汪 谦, 黄洁夫
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2022 ml或5 g,HRV定性检测采用酶联免疫吸附(ELISA)法,试剂为世界卫生组织(WHO)提供;G型、P型分型采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),引物序列及试验方法均由国家疾病预防控制中心(CDC)提供;HuCV、EAdV和HAstV用RT-PCR、PCR方法检测病毒核酸,引物序列及试验方法亦由国家CDC提供。1.3统计分析应用Excel2020统计软件进行数据整理及分析,计数资料用占比或率表示;应用SPSS 25.0进行卡方检验 ...
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 1997 为探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）与ＨＣＶ感染者血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）的关系，本文应用ＨＣＶＮＳ５区逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对７９例抗－ＨＣＶ阳性者进行ＨＣＶＲＮＡ检测，同时用限制性内功酶法对ＨＣＶ进行基因分型。检出ＨＣＶＲＮＡ阳性者６９例，其中ＨＣＶⅡ型３０例，Ⅲ型２７例，Ⅱ／Ⅲ混合型１２例，ＨＣＶ不同的基因型在ＡＬＴ正常组和异常组中的分布有显著性差异（Ｐ＜０．０１），Ⅱ型和Ⅱ／Ⅲ混合型主要分布于ＡＬＴ异常组中，Ⅲ型主要分布于ＡＬＴ正常组中。提示Ⅱ型和Ⅱ ...
宋玉国 +8 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的研究海洛因对C6胶质瘤细胞嘌呤核苷酸分解代谢关键酶基因表达的影响。方法海洛因作用于C6胶质瘤细胞12h、24h、48h、72h后,提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测嘌呤核苷酸分解代谢的关键酶腺苷脱氨酶（ADA）和黄嘌呤氧化酶（XO）基因表达的变化,以β-actin为内标准。结果在转录物水平,浓度为20μg/ml的海洛因作用于C6细胞24h和48h时与对照组相比ADA、XO基因表达明显增强 ...
迟秀梅, 阚慕洁, 李奇, 洪敏
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的转染化学合成siRNA特异性下调人主动脉平滑肌细胞PAI表达。方法人工合成一对互补并编码相应短发夹状PAI小核糖核酸,体外退火;采用电转染方法将小RNA导入人主动脉平滑肌细胞中,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、western blot法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达变化。结果转染PAI siRNA载体后,人主动脉平滑肌细胞PAI mRNA和蛋白表达均较对照组明显下降 ...
侯旭晖, 杜建时, 尹维田
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的观察银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾脏组织型转谷氨酰胺酶（tTG）表达的影响。方法链脲佐菌素（STZ）复制糖尿病动物模型,将糖尿病动物随机分为,糖尿病组（DM）,银杏叶提取物组（GBE）;另设正常对照组（Con-trol）。逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测肾皮质tTG mRNA的表达、Western blot检测肾皮质tTG蛋白表达,PAS染色评估ECM含量。结果与正常对照组比较,糖尿病大鼠肾脏细胞外基质（ECM）积聚,tTG mRNA及蛋白表达均明显增高 ...
邹颖刚 +4 more
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TaqDNA 聚合酶一步法获得TGF-β1#br# 基因片段的RT-PCR 扩增产物
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997 摘 要 以组织细胞中提取的总RNA 为模板, 加入TaqDNA 聚合酶和一对以TGF-β 1 cDNA 为模板设计的 引物, 经变性、退火、延伸共30 次循环后, 可以得到以cDNA 为模板的扩增产物。实验证实TaqDNA 聚合酶具有 逆转录酶活性, 用一步常规聚合酶链反应即可获取逆转录聚合酶链反应的TGF-β 1 468 bp 扩增产物。
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997 摘 要 根据大鼠脑型一氧化氮合酶( bNO S)和内皮型一氧化氮合酶( eNO S)的cDNA序列分别设计特异 引物,用逆转录聚合酶链反应( RT- PCR)方法检测2种NO S在脑、肝脏和前列腺中的m RN A表达差异。结果 表明: bNOS在小脑、大脑皮质和海马中有表达,并且在肝脏和前列腺组织中也有表达: eNOS在肝组织中有表 达,在小脑、大脑皮质和海马等脑组织中均有表达,但前列腺组织中未检测到m RNA表达。2种NOS在上述组 织中的广泛分布提示NO具有多种复杂的 ...
高国全 姚志彬 马涧泉
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