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血清中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸的检测

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1984
乙型肝炎病毒(HBV)是属于嗜肝DNA病毒(Hepadna)的一种,完整病毒颗粒(Dane颗粒)的核心部分,含有双股环状脱氧核糖核酸(DNA),近年来对HBV DNA的研究取得迅速发展,HBV DNA克隆成功,而且可以用切口翻译方法把32P标记上克隆的HBV DNA,把它作为探针与血清中提取的DNA杂交,检测血清标本中是否存在HBV DNA,提供一种极为灵敏的检测血清中HBV的方法,我们开展了这个检测项目,应用斑点杂交试验直接检查血清标本的HBV DNA。
郑锡澄
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羽翈中DNA和糖皮质激素共提取技术的研究

open access: yes野生动物学报
羽毛是鸟类研究、监测和管理中常用的非损伤性材料,可从中提取DNA和激素进行遗传和生理分析。然而,作为高度角化的组织,羽翈中的DNA和激素含量极低,提取较为困难。本研究开发一种能够从羽翈中同时提取总DNA和糖皮质激素的方法,命名为DH-CoEx。以丹顶鹤(Grus japonensis)、绿孔雀(Pavo muticus)为代表的大型鸟类廓羽、尾上覆羽和以栗鹀(Emberiza rutila)、小鹀(E.pusilla)为代表的小型鸟类飞羽、绒羽进行测试和评估。结果显示:DH ...
于梦佳   +9 more
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儿茶酚O-甲基转移酶基因多态性分析方法探讨

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的建立限制性片段长度多态性(RFLP)和变性高效液相色谱(DHPLC)分析儿茶酚O-甲基转移酶(COMT)基因多态性的方法,探讨分析基因多态性与临床疾病发生风险关系的方法学。方法从子宫内膜癌患者和对照组的全血和蜡块包埋组织提取DNA,应用RFLP和DHPLC法检测COMT基因第4号外显子第158位密码子G/A的多态性,并结合DNA测序法分析两种方法的一致性。结果全血和蜡块组织提取的DNA均可扩增PCR产物,且可行酶切反应;所有全血和小部分蜡块DNA20PCR产物可行DHPLC分析 ...
赵晓苗   +5 more
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佳木斯地区原发性高血压合并高尿酸血症与MTHFR基因多态性的相关性研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2020
目的探讨MTHFR基因的基因多态性与原发性高血压合并高尿酸血症易感性之间的关系。方法选取符合要求的392例患者作为研究对象,其中对照组(n=102)、原发性高血压组(n=109)、高尿酸血症组(n=86)和原发性高血压合并高尿酸血症(n=95)。用DNA提取试剂盒提取入组人群的DNA,再通过聚合酶链反应-高分辨率溶解曲线(PCR-HRM)的方法进行基因分型,记录结果并分析原发性高血压合并高尿酸血症与MTHFR C677T基因多态性的相关性。结果在各实验组中,MHTFR C677T基因的CT ...
隋小芳   +8 more
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PCR反应体系中Mg2+浓度对从石蜡包埋组织中提取DNA进行PCR反应的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2004
目的 探讨PCR反应体系中Mg2 + 浓度对从石蜡包埋组织中提取DNA进行PCR反应的影响。方法 从石蜡包埋组织中提取DNA ,PCR反应扩增甲状腺髓样癌RET基因第 13外显子 ,分析PCR反应体系中Mg2 + 浓度分别为1 5mmol L、2 0mmol L、2 5mmol L、3 0mmol L、4 0mmol L时PCR反应产物中目的基因含量及对PCR产物基因序列测定的影响。结果  5种条件扩增的目的基因经纯化后DNA含量分别为 4 8ng μl(1 5mmol L)、2 6 6ng ...
盖宝东   +8 more
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16S rRNA基因序列用于临床非典型细菌的补充鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2022
目的 利用16SrRNA基因序列分析方法鉴定临床非典型细菌,为临床细菌分类鉴定新方法提供补充。方法提取细菌的DNA,自行设计引物并利用PCR技术扩增细菌16SrRNA基因片段,并对扩增片段进行序列测定,利用Blast等在线软件进行序列同源性分析。结果 在32株临床非典型细菌中,3株细菌可以鉴定到“属”,29株细菌可以鉴定到“种”,其中2株可以鉴定到“亚种”。结论 16SrRNA基因序列分析法是有效的病原细菌分类鉴定的补充。
白志鹏   +7 more
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成骨细胞条件性FKBP8基因敲除小鼠模型构建

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2019
目的建立成骨细胞条件性FKBP8基因敲除小鼠模型、为研究FKBP8基因在骨质疏松症中的作用机制提供动物模型。方法设计基因敲除策略,获得纯合子小鼠和野生型对照小鼠。提取鼠尾DNA,PCR扩增之后琼脂糖凝胶电泳鉴定小鼠基因型。提取小鼠原代成骨细胞蛋白质,利用Western blot技术检验FKBP8基因的表达。结果成功构建成骨细胞条件性FKBP8小鼠敲除模型,PCR结果显示基因型为BGLAP-Cre/FKBP8flox/flox,Western blot结果显示FKBP8基因蛋白表达敲除效果明显 ...
王红   +4 more
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人Regucalcin cDNA真核表达载体的构建及表达

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的构建人regucalcin(RGN)全长cDNA的真核表达载体,观察其在人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)中表达。方法用RT-PCR技术扩增获得人HK-2细胞RGN全长cNDA,将扩增的产物连接入pMD18-T克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法将RGN基因定向连接到真核表达载体pEGFP-N1中,构成pEGFP-RGN,将pEGFP-RGN转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确 ...
徐洪   +4 more
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吉林省先天性耳聋散发病例GJB2基因的突变分析

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的探讨吉林省先天性耳聋散发病例GJB2基因的突变状况。方法抽取静脉血,应用酚-氯仿抽提法进行基因组DNA的提取,GJB2基因的PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物是否有异常带型。结果扩增的PCR产物经琼脂糖凝胶电泳表明均获得了约为724 bp的特异扩增条带,41例NSHI患者中GJB2基因的PCR扩增产物无呈异常带型者。结论吉林省内先天性耳聋散发病例中GJB2基因的突变频率较低,可能低于国内其他地区。
金慧   +6 more
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DNA 引物酶的提取分离与引物合成活性的研究

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997
摘 要 以小鼠艾氏腹水癌细胞经超声破碎的提取液为材料, 依次用DE-52 和P-11 层析柱进行离子线性洗脱, 分别在KCl浓度为0.17~ 0.2 mol/ L 和0.25 ~ 0.27 mol/ L 处DNA 引物酶被洗脱下来。用大肠杆菌大片段DNA 多聚 酶Ⅰ 延长引物法检测DNA 引物酶比活性为8753 U/ mg ,酶总获得为22.1 %。放射自显影法检测引物合成活性显示 引物酶合成了不同长度的引物。
朱孝峰 刘宗潮 谢冰芬 潘启超 冯公侃 李奕荪
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