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蛋白激酶和蛋白酶的底物筛选及特异性分析的蛋白质组学新方法研究
本论文致力于发展蛋白激酶和蛋白酶的底物筛选及特异性分析的蛋白质组学新方法,揭示蛋白激酶介导的磷酸化修饰和蛋白酶介导的降解修饰的信号调控机制,有助于发现新的药物靶点,实现疾病的靶向治疗。针对目前基于化学方法分离富集含有特定氨基酸序列肽段较难的问题,我们利用蛋白酶与底物的特异性识别作用,建立了一种选择性富集含有特定氨基酸序列肽段的酶化学方法,从血清中富集到168条含有PKA特异性作用模体K/R-X1-2-S/T的肽段,特异性为67.2%。针对目前利用合成肽段库确定激酶特异性的方法中肽段合成过程复杂 ...
王春丽
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ABC转运蛋白主要包括P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白和乳腺癌耐药蛋白,它们属于同一家族,具有保守的功能结构域和多样化的生物学功能。ABC转运蛋白部分成员的过表达与肿瘤细胞的多药耐药性(MDR)密切相关,是导致化疗失败的主要原因。随着对MDR机制认识的深入,针对多药耐药蛋白的特异结构域已设计出多种形式的MDR逆转药物。近年来发现,ABC转运蛋白广泛存在于多种正常的组织和器官,参与药物和内、外源毒素的吸收、分布和排泄,行使解毒和防御保护的作用。因此,通过转植ABC转运蛋白基因有可能降低经济鱼类 ...
崔宗斌 +3 more
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目的借助生物信息学技术探究骨质疏松中铁死亡的基因靶点并利用体外实验验证骨质疏松中铁死亡关键基因,探讨铁死亡在骨质疏松中的作用机制。方法在基因芯片公共数据库中筛选骨质疏松相关基因数据集GSE35958并进行数据矫正分析;在FerrDb数据库中筛选铁死亡相关基因,并与数据集GSE35958差异表达基因取交集得到骨质疏松中铁死亡相关差异表达基因,然后进行差异表达基因的基因本体(GO)与京都基因和基因组数据库(KEGG)富集分析;分析差异表达基因的Spearman相关系数,并绘制蛋白质-蛋白质相互作用网络 ...
夏 玉双 +6 more
doaj +1 more source
生产具有荧光活性和链霉亲和素标记的藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法及应用
本发明涉及藻蓝蛋白类荧光蛋白质领域,具体为一种生产具有荧光活性和链霉亲和素标记的藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法及应用,通过将链霉亲和素合成基因、藻蓝蛋白亚基合成基因、催化酶合成基因、色基合成基因、标签合成基因等重组于同一表达质粒中,实现多基因的组合表达,通过对诱导、纯化条件的优化,制备具备稳定荧光活性的融合蛋白。采用单一质粒完成荧光活性融合藻胆蛋白的组合表达,避免多质粒在工程菌株中的稳定性及各基因表达的不同步问题,减少发酵过程中的抗生素的使用,有效提高了荧光蛋白质的稳定性 ...
秦松, 焦绪栋
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【目的】探讨伊马替尼(Ima)在体外对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症表型的影响。【方法】RAW264.7细胞在LPS(0.1μg/mL)或/和Ima(1μmol/L,5μmol/L)处理后,通过Q-PCR方法检测细胞因子IL-1β、IL-10、CCL2、iNOS、TNF-α和Arg1的mRNA表达变化;采用Western Blot检测iNOS蛋白表达变化以及NF-κB和MAPK信号通路活化情况;利用ELISA法检测细胞上清IL-1β、CCL2、IL-10和TNFα的蛋白表达情况 ...
doaj
论文以双偏振光干涉分析仪(Dual Polarization Interferometry,DPI)为主要手段,结合蛋白质分子结构特征,研究了蛋白质在固-液界面的吸附现象,并进一步探索了固体表面性质与蛋白质性质对吸附的影响作用,旨在为大分子蛋白质的高效分离技术提供理论基础。实验先通过将氨基硅烷修饰剂与氧化硅固相表面进行偶联,制备了带有三种配基的界面,用DPI研究了配基性质对蛋白质吸附的影响;通过控制反应时间得到不同相对含量配基的固相表面,研究了配基相对含量对蛋白质吸附行为的影响 ...
余瑾瑜
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ERK1/2 和 P38 信号通路在瘦素诱导巨噬细胞TNF- α表达中的作用
【目的】研究瘦素( leptin) 诱导小鼠腹腔巨噬细胞( PM) 分泌肿瘤坏死因子 α( TNF- α) 的影响, 以及丝裂原活化蛋白激酶( MAPK) 信号通路在这一过程中的作用。【方法】体外培养小鼠 PMs, 按瘦素不同浓度和/或MAPK特异性抑制剂 PD98059、U0126、SB203580、SP600125 进行分组。分别收集培养细胞和上清液, 用酶联免疫吸附试验( ELISA) 测定培养上清中 TNF- α水平, 用蛋白印迹( Western blot) 方法测定细胞内 p- ERK1/2、
doaj
本发明涉及食品生物技术领域,具体的说是一种藻蓝蛋白微胶囊及其制备方法。藻蓝蛋白微胶囊由壁材和心材组成,壁材为海藻酸钠和壳聚糖;心材为藻蓝蛋白。本发明得到的蓝色素微胶囊为100%水溶性,包埋率为50-60%;不仅提高了藻蓝蛋白的稳定性,并可通过微胶囊的缓释作用来增强藻蓝蛋白的生理功能。该制备方法操作简单,所用原料均为食品领域许可原料,不仅为藻蓝蛋白以多种产品形式的出现提供了新的思路 ...
刘冰, 秦松, 闫鸣艳, 焦绪栋
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目的应用生物信息学的方法探讨趋化素样因子超家族成员(chemokine-like factor-like MARVEL transmembrane domain containing member/chemokine-like factor superfamily member,CMTM/CKLFSF,CMTM)在胰腺癌中异常表达的临床病理特征,并分析相关基因共表达的意义。方法通过GEPIA2、HPA和Kaplan-Meier plotter数据库分析CMTM家族成员在胰腺癌中的表达和预后价值 ...
黄冠宁 +5 more
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目的研究γ-谷氨酰环转移酶(γ-Glutamylcyclotransferase,GGCT)表达能否作为预测分化型甲状腺癌(differentiated thyroid carcinoma,DTC)预后的生物标志物及其促进DTC进展的潜在机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative polymerase chain reaction,qPCR)及免疫组化实验评估GGCT在DTC中的表达水平及其与预后价值 ...
只璟泰 +5 more
doaj

