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降钙素原单克隆抗体的制备及鉴定应用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2020
目的表达和纯化降钙素原(PCT)基因的融合蛋白,制备PCT融合蛋白的鼠源性单克隆抗体。方法根据GenBank数据库中降钙素原氨基酸序列设计引物,从TT细胞中扩增出降钙素原的全长片段,将其克隆至pEASYE1原核表达载体,构建重组表达质粒pEASY-E1-PCT;利用大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞转化阳性克隆质粒中,以IPTG作为诱导剂诱导表达融合蛋白,通过His镍离子亲和层析纯化目的蛋白,纯化的目的蛋白免疫BALB/c小鼠,获取单克隆抗体并纯化,ELISA法检测抗体效价及交叉鉴定 ...
孙晶莹   +5 more
doaj  

Thalidomide combined with co-stimulatory molecules blockade prolongs survival of cardiac allografts in alloantigen-primed mice [PDF]

open access: yes, 2015
目的:体内预存的各种记忆细胞是器官移植中的重要障碍。记忆细胞对侵入的病原体产生强烈的免疫反应,但同时会导致移植物发生排斥。研究发现,沙利度胺在初次器官移植中具有抑制免疫排斥反应的作用,但其作用机制仍不明确。沙利度胺在器官移植中的潜在作用,很有可能使其成为作用于新靶点、高效低毒的免疫抑制剂。这里,我们拟研究沙利度胺联合共刺激分子阻断剂对皮肤预致敏小鼠心脏移植物生存期的作用,并探讨其在免疫记忆中的作用机制。 方法:首先通过同种异体皮肤移植得到预致敏小鼠,然后随机将皮肤预致敏小鼠分成4组,每组6只。对照组 ...
朱茂述
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抗胎儿血红蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的制备和鉴定抗胎儿血红蛋白(fetal hemoglobin,HbF)单克隆抗体(mAb),为相关疾病的研究提供支持与工具。方法用脐带血红细胞裂解物免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(NS-1)融合制备杂交瘤,经筛选和三次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体。用ELISA以及western blot等方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力)。结果筛选到3株可稳定分泌抗HbF单克隆抗体的杂交瘤细胞6A5、5C8、2C8,腹水效价分别为1×10-6、2×10-6和4×10-
程伟   +4 more
doaj  

抗肺癌单克隆抗体在裸鼠移植瘤中的放射免疫显像 [PDF]

open access: yes, 1995
抗肺癌单克隆抗体在裸鼠移植瘤中的放射免疫显像俞浩,瞿跃进,颜江华,盛荣宗,林月华俞丹,苏新辉,毛利娜,苏金华,杨善民我们用131I标记抗肺癌单克隆抗体(MCAb3d3)在移植人肺腺癌裸鼠中进行显像,并研究裸鼠体内生物学分布,现将结果报道如下.材料和方..
俞丹   +9 more
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Applying TALEN and CRISPR/Cas9 Technique to Knock out the PD1 Gene in Human Primary T Lymphocytes [PDF]

open access: yes, 2016
过继性细胞免疫治疗(adoptivecellularimmunotherapy)是将患者自体免疫细胞在体外处理,然后筛选并大量扩增具有高度特异性的肿瘤杀伤性免疫效应细胞,再回输到患者体内杀灭肿瘤的一种治疗方法,过继性T细胞治疗是一种很有前景的癌症治疗方法。体内T细胞在进行免疫应答时,T细胞活化需要双重信号的协同作用,分别是抗原呈递信号和协同刺激信号。协同刺激分子通过为淋巴细胞提供正性或负性的调控信号参与机体的免疫调控。肿瘤细胞会利用体内免疫调节过程,表达或分泌的一些分子,对T细胞进行负向调控 ...
李剑
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人乳腺珠蛋白单克隆抗体制备及生物特性鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的构建重组hMAM蛋白,通过杂交瘤技术获得特异性的抗hMAM的单克隆抗体,并鉴定其生物特性。方法克隆表达hMAM 8-93AA、20-52AA、43-70AA、56-82AA、67-93AA区段的抗原,以纯化的pBV220/hMAM(8-93AA)为免疫原,杂交瘤技术筛选出能稳定分泌抗hMAM单克隆抗体的细胞株。采用Western blotting和免疫组织化学染色方法鉴定其表位和特异性。结果获得6个高纯度的重组抗原,通过pBV220/hMAM(8-93AA)免疫小鼠后 ...
杨锡琴   +8 more
doaj  

抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的特异性及其识别抗原表位的初步鉴定 [PDF]

open access: yes, 2006
为了明确抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体的特异性,并鉴定其识别表位,首先在E.coli中表达了人类冠状病毒229E(HCoV-229E)和OC43(HCoV-OC4)N蛋白,用Westernblotting和间接免疫荧光方法分别检测了4株抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体(1-1C2、1-1D6、2-8F11和2-2E5)与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白的交叉反应情况,而后应用12种重组截短型SARS-CoVN蛋白对上述4种单克隆抗体的识别表位进行了初步定位。结果显示:(1 ...
夏宁邵   +8 more
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铕螯合剂对甲胎蛋白单克隆抗体标记的研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2018
目的探究自合成铕螯合剂对甲胎蛋白单克隆抗体的标记方法。方法经EDC和NHS活化的铕螯合剂偶联甲胎蛋白单克隆抗体,通过透析收集标记抗体,检测荧光强度和免疫活性,计算回收率和标记率。结果标记抗体荧光强度高,免疫活性无明显变化,回收率为94%,标记率为15。结论自合成的铕螯合剂可用于甲胎蛋白单克隆抗体的标记,标记效果理想,可进一步建立均相时间分辨荧光免疫分析方法。
孙延文   +5 more
doaj  

The preparation of monoclone antibody for HBcAg ARD and development of HBcAg diagnostic reagent [PDF]

open access: yes, 2016
乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV)感染可以引起急性或慢性肝炎,并可进而引发肝硬化、原发性肝细胞癌等严重疾病。乙型肝炎病毒感染已成为一个全球性的健康问题。 目前HBVDNA定量、肝功能检查及乙肝两对半检测是国内医院最常用的乙肝诊断及病情判断与治疗的方法。三种方法综合判断,更能客观反映体内HBV病毒复制、肝脏的损伤及机体免疫状态,对乙肝的正确的诊断、治疗及判断预后具有重要的临床意义。目前的两对半检测的血清学标志物主要有HBsAg、HBsAg抗体、HBeAg、HBeAg抗体和HBcAg抗体,
熊丽霞
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抗绿脓杆菌单抗制备及对小鼠绿脓杆菌感染的保护性作用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2005
目的制备抗绿脓杆菌单克隆抗体,观察其对绿脓杆菌感染的烧伤小鼠及正常小鼠的保护作用。方法应用NS-1细胞和经绿脓杆菌免疫后的BALB/C小鼠脾细胞制备杂交瘤细胞株,收集其分泌的抗体,观察其对绿脓杆菌感染的Ⅲ°烧伤小鼠及正常小鼠的免疫保护作用。结果该单克隆抗体可预防绿脓杆菌感染。结论我们的研究结果为抗绿脓杆菌单克隆抗体在临床上应用的可行性提供了实验室基础。
温剑平   +3 more
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