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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的探讨去除高丰度蛋白质对脑脊液差异蛋白鉴定的影响。方法应用Cibacron-blue-3G-A亲和层析柱去除脑脊液中含量最多的高丰度蛋白质-白蛋白,然后对去除白蛋白前后的脑脊液样本,以及经过Cibacron-blue-3G-A亲和层析柱吸附后洗脱下来的脑脊液样本,分别进行双向凝胶电泳,对比分析各样本差异蛋白点的分布情况。结果 Cibacron-blue-3G-A亲和层析柱通过结合去除了脑脊液中的大部分白蛋白,但是同时也去除了一些其它可能有意义的蛋白质,而且在去除白蛋白后 ...
金涛, 张凯, 孙莉, 张颖
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应用蛋白质组学及噬菌体抗体库技术筛选大肠癌特异性抗原及抗体方法的建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 构建大肠癌患者转移淋巴结Fab段噬菌体抗体库并结合蛋白质组学相关技术进行初步筛选大肠癌特异性抗原蛋白及相应的噬菌体抗体。方法 取大肠癌患者系膜转移淋巴结 ,提取总RNA ,RT PCR扩增重链Fd和轻链cDNA ,将扩增产物依次插入载体pComb3,电转感受态大肠杆菌XLI Blu ,加噬菌体VCSM13超感染。以二维凝胶电泳分离大肠癌细胞和正常大肠粘膜蛋白组并转至PVDF膜 ,将银染胶图用Melanie 112 DE分析软件进行分析 ,以大肠癌组织匀浆为靶抗原对初级抗体库进行三轮淘洗 ...
王旭东 +4 more
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运用蛋白质组学技术研究结肠粘膜、腺瘤及腺癌组织蛋白的差异表达
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 ［目的］通过比较结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌组织之间的蛋白质组表达差异，寻找结肠腺癌相关的蛋白质，筛选结肠癌早期诊断的分子标志物。［方法］运用比较蛋白质组学技术，对8例结肠癌患者（伴有腺瘤）的正常粘膜、腺瘤、腺癌组织提取的总蛋白进行双向电泳（2-D），分析凝胶图片选择两两间差异表达超过2倍的蛋白质进行MALDI-TOF/TOF质谱分析和生物学信息分析。［结果］成功建立结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌的双向凝胶电泳图谱，在凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为3066 、2986和3289 ...
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2005 【: 目的】研究低剂量三氯乙烯对人 L-02 肝细胞蛋白质表达谱的影响, 以助于阐明三氯乙烯引起细 胞早期应答反应的分子机制。【方法】L-02 肝细胞暴露于低剂量( 3 μmol/L) 三氯乙烯24 h 后, 提取细胞总蛋 白, 双向电泳分离蛋白质, 软件分析凝胶图像, 基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOFMS) 对相关异常变化斑点进行鉴定。【结果】和对照组比较, 低剂量三氯乙烯处理后L-02 肝细胞蛋白质表达发 生改变, 初步鉴定出7 个差异蛋白 ...
黄海燕 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的初步分析胶质瘤细胞分泌的exosome蛋白组成,探讨胶质瘤来源exosome的潜在免疫调节功能,从而为进一步利用exosome对胶质瘤进行免疫治疗提供理论依据。方法采用差速离心法从U251胶质瘤细胞培养上清液和Ⅲ级星形胶质瘤囊液中分别提纯exosome,用透射电镜鉴定;利用二维电泳分离、分析exosome内蛋白质,并用质谱技术鉴定了部分蛋白质。结果胶质瘤细胞可以产生exosome,其平均直径约100 nm。二维电泳图显示U251细胞分泌的exosome含有270个蛋白点,与数据库相符的有66个 ...
金铮 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的应用蛋白质组学相关技术筛选多发性骨髓瘤（MM）患者尿液中差异表达的蛋白质,寻找与MM诊断相关的疾病标志物。方法收集MM组、疾病对照组（肾脏疾病）、健康对照组尿液各8例,TCA沉淀法提取尿液蛋白质后建立双向凝胶电泳图谱;Image Master软件筛选差异蛋白质;利用MALDI-TOF-MS获得肽质量指纹图谱,通过Mas-cot软件进行数据库搜索,得到蛋白质鉴定结果。结果筛选出57个差异蛋白点,43个在MM组上调,14个下调。对其中30个差异蛋白点进行分析,鉴定出甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19 ...
房亚哲 +7 more
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双向凝胶电泳－飞行时问质谱法分析促癌剂TPA诱导NIH3T3细胞表达变化的蛋白质
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】寻找并鉴定在TPA处理后小鼠成纤维细胞NIH3T3中表达发生变化的蛋白质，为阐明TPA 在诱导细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。（方法l用TPA刺激NIH3T3细胞，分别提取实验组和对照组 的NIH3T3细胞的总蛋白质，通过聚丙烯酰胺凝胶双向电泳，硝酸银染色后用软件分析寻找差异表达的蛋白质， 并对差异蛋白质进行质谱鉴定。（结果l软件分析显示TPA处理后的NIH3T3细胞中有明显的差异表达蛋白质， 质谱鉴定表明TPA处理后，表达上调的蛋白质有线粒体基质蛋白Pl前体、微管蛋白beta-5链 ...
江培洲
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 找出有坐骨神经痛的腰椎间盘突出症患者血清蛋白质组最明显的改变,揭示椎间盘突出可能的病理机制65377; 【方法】 选择有坐骨神经痛的腰椎间盘突出症患者10例作为病例组,志愿者10例作为对照组,取血,提取分离纯化血清蛋白,双向电泳,找到表达上差异最明显蛋白质,进行质谱鉴定65377;所得差异蛋白应用酶联免疫吸附试验对另外10例腰椎间盘突出症患者及10例正常人血清表达浓度进行检测65377; 【结果】 在双向电泳图谱上有6个蛋白质的表达在两组间存在明显差异65377 ...
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 用蛋白组学方法,通过对膝关节骨关节炎患者及正常人群血清蛋白的比较,寻找差异表达蛋白并探讨其与骨关节炎致病机理的关系65377; 【方法】 选取2007年10月到12月10例在中山大学附属第三医院骨科住院治疗的膝关节骨关节炎患者为实验组;10名性别相同,年龄65380;身体质量指数值相约的健康志愿者为对照组,分析2组双向电泳结果,并对差异表达蛋白进行质谱鉴定65377; 【结果】 通过双向电泳图普比较发现7个差异表达蛋白,其中6个在关节炎组中呈低表达,1个呈高表达65377;经质谱鉴定为分别为 ...
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1986 1983年,我室建立了两株能分泌抗登革热Ⅱ型（DEN-2）病毒单克隆抗体（MCAb）的杂交瘤细胞株。本文进一步分析了这两株McAb的若干特性。包括①两株McAb与DEN-2病毒感染的C6/36细胞裂解物进行双向免疫抗散,形成融合的沉淀线;②两株McAb都能沉淀DEN-2病毒感染的C6/36细胞裂解物中的分子量约为60K的抗原;③这两株McAb能抑制由蔗糖密度梯度离心纯化的DEN-2病毒的红细胞凝集性;④对DEN-2病毒感染的C6/36细胞作间接免疫荧光染色,呈膜抗原染色阳性。这些结果表明 ...
吴美雄
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