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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的以蛋白质组学相关技术进行初步筛选人源性大肠癌Fab段噬菌体抗体库,建立一种寻找特异性大肠癌抗原蛋白及相应的噬菌体抗体的方法。方法以二维凝胶电泳分离大肠癌组织和正常大肠粘膜组织蛋白组并将获得的2-DE凝胶电转至PVDF膜。然后以大肠癌组织匀浆为靶抗原对我们构建的人源性大肠癌Fab段噬菌体初级抗体库进行三轮淘洗,再用富集抗体库和PVDF膜进行Western-Blot印记实验。结果经Western-Blot印记实验我们发现了至少八个大肠癌表达而正常大肠粘膜不表达的有噬菌体抗体特异性结合活性的抗原蛋白 ...
王旭东 +4 more
doaj
Bone Proteomic Analysis About Chinese Medicine Action On Rat Ovariectomy Model of Osteoporosis. [PDF]
, 2006 目的:用蛋白质组学的方法对绝经后骨质疏松症和中药作用机理进行研究,有利于临床防治该疾病。方法:建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型,设立中药治疗组及假手术对照组,6周后骨质疏松症模型成功,行骨形态学检查,提取骨组织蛋白质样品,双向电泳分离,得到各组骨组织总蛋白质分子解剖图谱,用图像分析软件,分析各组间差异蛋白质点,MADITOF/MS质谱分析,结合蛋白质生物信息库(Matrix science Ltd database),对各蛋白质初步鉴定。结论:鉴定了3个差异蛋白,分别为P1硫氧还蛋白过氧化酶1 ...
何伟 +7 more
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胃癌细胞SGC-7901双向电泳系统的建立及优化 [PDF]
, 2006 文蛤抗癌活性多肽对多种癌细胞有抑制效应,具有良好的药物开发前景.双向电泳技术的进步为药物的开发提供了理想的技术平台.我们通过对胃癌细胞SGC-7901总蛋白双向电泳技术的建立以及初步优化对一些环节如样品处理的方法、上样量的选择、电泳参数的设置、凝胶浓度和SDS凝胶电泳染色方法等进行了优化得到了分辨率较好的胃癌细胞的蛋白图谱 ...
冷波, 康劲翮, 贺量, 陈清西
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2010 【目的】 优化双向凝胶电泳的实验步骤,总结出一套适用于原发性肝癌组织的双向凝胶电泳技术65377;【方法】 对双向电泳实验中的关键环节:样本处理65380;上样方法65380;聚焦条件等进行研究与优化,考马斯亮蓝染色后进行凝胶图像比较65377; 【结果】 采用7 mmol /L尿素65380;2 mol /L硫脲65380;40 g/L CHAPS65380;100 mmol /L DTT65380;5 g/L (pH 3-10) IPG buffer,1 mmol /L PMSF作为裂解液 ...
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的探讨去除高丰度蛋白质对脑脊液差异蛋白鉴定的影响。方法应用Cibacron-blue-3G-A亲和层析柱去除脑脊液中含量最多的高丰度蛋白质-白蛋白,然后对去除白蛋白前后的脑脊液样本,以及经过Cibacron-blue-3G-A亲和层析柱吸附后洗脱下来的脑脊液样本,分别进行双向凝胶电泳,对比分析各样本差异蛋白点的分布情况。结果 Cibacron-blue-3G-A亲和层析柱通过结合去除了脑脊液中的大部分白蛋白,但是同时也去除了一些其它可能有意义的蛋白质,而且在去除白蛋白后 ...
金涛, 张凯, 孙莉, 张颖
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, 2002 人类基因组计划即将提前完成，人类将进入后基因组——功能基因组时代。作为以功能执行者－蛋白质为研究对象的蛋白质组学将是21世纪整体细胞生物学新的最重要的内容,而且将为医药、农业和工业的革新提供崭新的思路。 论文采用蛋白质组学方法对水产养殖动物的重要致病菌——嗜水气单胞菌的分子解剖图谱、免疫原性蛋白、与传代和耐药有关的功能蛋白质组学进行较系统的研究。 实验首先初步构建了一张嗜水气单胞菌总蛋白质的分子解剖图谱，通过对124个蛋白质的肽质量指纹图谱分析，鉴定了40个蛋白质，其中17个为嗜水气单胞菌的蛋白 ...
吴谋胜
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 【目的】建立盘状红斑狼疮皮损和正常皮肤角质形成细胞的双向电泳图谱，分析二者蛋白质的表达差异及特点。【方法】运用固相pH梯度双向凝胶电泳分离6例盘状红斑狼疮患者皮损及正常皮肤角质形成细胞总蛋白，考马斯亮蓝染色后用ImageMaster 2D图象软件比较分析，识别差异蛋白。【结果】盘状红斑狼疮皮损和正常对照电泳图谱平均蛋白点分别为1566±32和1682±38，平均匹配点数为1286±14 和1314±21，匹配率为82.12%和78.12%。分辨差异蛋白点共22个，11个在皮损高表达，2个在皮损组低表达 ...
doaj
Proteomic analysis of the developmental mechanisms at early mouse embryos [PDF]
, 2007 胚胎发育是一个严格控制的，由一系列的细胞增殖，分化和凋亡组成的精确过程。胚胎植入后的早期阶段是胚胎发育的一个重要时期，在这段时间里，内细胞团迅速增殖并且分化形成胚外外胚层和胚胎的三个胚层，由此引发了一系列的器官分化和组织形成。由于胚胎解剖和收集上的困难，目前关于早期胚胎发育的机理还不是特别清楚。我们在国际上首先利用蛋白组学方法研究在小鼠胚胎发育早期的蛋白质表达差异，鉴定了一系列的在E6.5和E7.5胚胎之间差异表达的蛋白质，揭示了在小鼠胚胎植入后早期胚胎发育的相关分子生物学机制;此外 ...
林水宾
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, 2008 以一株芘降解新鞘氨醇单胞菌(Novosphingobium pentaromativoransUS6-1)为模式菌株,为了追踪其在有芘和没有芘诱导下差异表达蛋白,对该菌株蛋白的超声破碎提取条件进行了优化.结果表明,在4℃环境下,功率为40 W,工作时间与间隔时间均为5 s,超声总次数为60次时菌体破碎效果最佳.与IEF(Isoelectric focusing electrophoresis)自制胶相比,IPG(Immobilized pHgradient)胶分离得到的蛋白点数量更多,质量更好 ...
田蕴, 郑伟, 郑天凌, 黄君
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应用蛋白质组学及噬菌体抗体库技术筛选大肠癌特异性抗原及抗体方法的建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 构建大肠癌患者转移淋巴结Fab段噬菌体抗体库并结合蛋白质组学相关技术进行初步筛选大肠癌特异性抗原蛋白及相应的噬菌体抗体。方法 取大肠癌患者系膜转移淋巴结 ,提取总RNA ,RT PCR扩增重链Fd和轻链cDNA ,将扩增产物依次插入载体pComb3,电转感受态大肠杆菌XLI Blu ,加噬菌体VCSM13超感染。以二维凝胶电泳分离大肠癌细胞和正常大肠粘膜蛋白组并转至PVDF膜 ,将银染胶图用Melanie 112 DE分析软件进行分析 ,以大肠癌组织匀浆为靶抗原对初级抗体库进行三轮淘洗 ...
王旭东 +4 more
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