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【目的】构建神经营养素-3(NT-3)基因转染的施万细胞。【方法】NT-3基因重组腺病毒(AdvNT-3)扩增、纯化和测定后,转染体外培养的施万细胞(SCs)。用免疫细胞化学和ELISA方法分别检测NT-3基因转染SCs的NT-3表达及培养液中NT-3的含量。【结果】实验中获得的AdvNT-3中外源基因序列与大鼠NT-3的DNA序列完全一致,与未基因转染SCs相比,NT-3基因转染SCs的NT-3阳性增强,培养液中NT-3含量增高。【结论】通过腺病毒介导可以获得NT-3过量表达的基因转染SCs。
郭家松
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阳离子脂质体介导的肺癌细胞基因转染效率的比较研究 [PDF]
【目的】提高阳离子脂质体介导的肺癌细胞基因转染效率。【方法】采用表达E .coli β -半乳糖苷酶的pCMVβ 报 告基因质粒及组化染色评价阳离子脂质体的转染效率。优化脂质体介导肺癌细胞基因转染效率的条件包括:脂质体∶DNA 电 荷比率, DNA 转染剂量, 阳离子脂质体的类型。【结果】当阳离子脂质体∶DNA 电荷比率(+/ -)为3∶1 时, pCMVβ 的剂量为 4 μg/ 孔(24 孔板)时, 阳离子脂质体DOSPER 介导肺癌细胞株SPC-A-1 转染效率最高, 达(11.9 ±0.9)%
李 芳, 区敬华, 童大跃
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腺病毒介导血管内皮细胞生长因子基因体外转染骨髓间充质干细胞 [PDF]
【目的】探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后目的基因表达情况及对MSCs增殖分化的影响。【方法】构建含VEGF基因的腺病毒表达载体,利用贴壁法分离培养MSCs后,用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效果和转染率,用免疫组化、Western-Blot和ELISA方法分别检测VEGF基因转染MSCs后VEGF的表达情况。【结果】腺病毒介导的VEGF基因对于MSCs具有很高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicyties of ...
华平 +6 more
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强型黄色荧光蛋白和VEGF 双基因载体在肝细胞共转染表达 [PDF]
【目的】构建携带加强型黄色荧光素蛋白(EYFP)和人类血管内皮生长因子(VEGF)的双基因真核表达载体 pIRES-EYFP/ VEGF121 , 用EYFP 作标记基因, 研究外源性VEGF121 基因在大鼠原代培养肝细胞转染表达, 为实时监测 VEGF121基因修饰肝细胞移植后状态提供基础。【方法】将pcDNA3VEGF121中VEGF121定向克隆到pIRES-EYFP , 构建重组质 粒pIRES-EYFP/ VEGF121 , 经酶切、PCR 扩增和部分DNA 序列分析证实后 ...
王金林 +3 more
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【目的】 用流式细胞仪(FCM)快速检测外源性血管内皮生长因子基因(VEGF基因)在大鼠原代培养肝细胞转染表达,根据结果优化其转染表达条件?【方法】 以加强型黄色荧光素蛋白(EYFP)为标记,用FCM快速检测重组质粒pIRES-EYFP/VEGF121在大鼠原代培养肝细胞中转染表达,根据结果优化pIRES-EYFP/VEGF121转染表达条件?【结果】 pIRES-EYFP/VEGF121得以成功构建,并转染大鼠原代培养肝细胞;优化的转染表达条件:在细胞数密度0.1×106/mL,质粒孵育时间30 ...
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转染 p53 抑癌基因体外抑制 K562 细胞克隆的形成 [PDF]
目的: 构建 p53 表达质粒, 研究 p53基因对白血病细胞 K562 细胞生长的抑制作用。方法: 以 T4 连接酶把 2 160 bp 的 p53 cDNA 片段插入 pRc/CMV 质粒, 重组构建 pRc/p53 表达质粒,以 Lipofectin 介导pRc/p53 质粒转染K562 细胞,以甲 基纤维素半固体培养方法作 K562 细胞体外克隆培养, 观察转染 p53 基因后 K562 细胞克隆形成改变。结果: p53 cDNA 质粒 转染的 K562 细胞, 体外培养克隆形成能力明显减低 ...
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ABSTRACT Diabetic wound infections are a common complication of diabetes, which severely impact patients' quality of life. Effective treatment of diabetic wound infections remains one major challenge in the clinic, partially due to the formation of bacterial biofilm and antibiotic resistance.
Liang Zhou +8 more
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目的探讨klotho基因转染对脂肪间充质干细胞(ADSCs)增殖的影响。方法将含有klotho全长基因的真核质粒转染至从脂肪组织分离的ADSCs中,采用CCK-8法测定转染后细胞增殖率,western blot法检测转染后细胞周期蛋白D1的表达变化,流式细胞术检测转染前后ADSCs的细胞周期变化。结果转染klotho基因96h后AD-SCs的细胞增殖率为170.50%;流式细胞术检测结果显示,ADSCs转染klotho基因S期和G2期细胞明显增多;west-ern ...
韩冬, 徐煌, 郑永霞, 肖燕萍
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ABSTRACT Photocatalytic molecular oxygen (O2) activation provides a sustainable approach to produce singlet oxygen (1O2) for organic contaminants detoxification. However, the charge carriers‐involved pathway usually suffers from unsatisfactory 1O2 production efficiency owing to energy loss caused by photogenerated hole‐mediated superoxide species (•O2−
Yan‐Biao Shi +8 more
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重组腺病毒介导RECK基因在大肠癌细胞中的表达及抑制癌细胞浸润能力的实验研究
目的 研究重组腺病毒介导RECK基因转染大肠癌细胞后基因的表达情况,并观察转染细胞浸润能力变化。方法 构建了RECK基因的复制缺陷型重组腺病毒载体adRECK ,以adRECK转染大肠癌癌细胞株后,用RT PCR法检测RECK基因在大肠癌中的表达。并用Boyden小室测试转染细胞的侵袭性。结果 RECK基因在转染细胞中有效的表达。被转染细胞浸润能力明显下降。结论 重组腺病毒介导RECK基因能够在大肠癌细胞中有效的表达,转染病毒的大肠癌浸润能力明显下降。
杨德君 +4 more
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