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KiSS-1基因对膀胱癌细胞系T24生物学行为影响的研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1对膀胱癌细胞T24的生物学影响。方法将构建好的含771 bp大小的基因片段的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/KiSS-1及空载体pcDNA3.1(+)用阳离子脂质体介导采用基因转染技术转染膀胱癌细胞T24,观察KiSS-1mRNA的表达、细胞生长能力、增殖情况及细胞侵袭力的变化。结果pcDNA3.1(+)/KiSS-1成功转染T24细胞,KiSS-1 mRNA表达阳性,而正常细胞和空载体组为阴性;转染目的基因后细胞生长曲线 ...
袁子杰, 杨杰
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外源基因转染对大肠癌细胞及放射敏感性的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的探讨p16基因转染对大肠癌细胞生长及对放射敏感性的作用。方法以脂质体介导外源性P16基因转染大肠癌SWWC细胞系,照射后MTT法测定OD值,计算细胞生长抑制率。结果p16基因转染大肠癌SWWC细胞发生周期阻滞,照射后转染组细胞生长抑制率增加,与对照组有明显差异。结论p16基因转染对大肠癌SWWC细胞具有明显抑制作用,可提高大肠癌细胞对放射的敏感性。
梁显军   +4 more
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Bcl-xl基因对硝普钠诱导SY5Y细胞凋亡的抑制作用

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2012
【目的】 研究Bcl-xl基因对成人神经母细胞廇SH-SY5Y细胞毒性的影响.【方法】 将构建好的Bcl-xl基因重组真核表达载体pIRES2-EGFP/Bcl-xl转染SH-SY5Y细胞,并分为正常组、pIRES2-EGFP空质粒转染组、pIRES2-EGFP/Bcl-xl质粒转染组,利用凋亡诱导剂硝普钠(50 μmol/L)诱导各组细胞凋亡,行Hoechst33258细胞染色对比观察各组细胞凋亡情况,通过MTT法分析各组细胞存活率?RT-PCR与Western blotting检测转染后Bcl ...
杨炼红   +5 more
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RNA干扰抑制人肝癌细胞N-ras基因表达的研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的研究RNA干扰(RNAi)对BEL7402细胞的N-ras基因表达的干扰效应。方法建立装载靶向N-ras基因小干扰性RNA(siRNA)的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染BEL7402细胞株,以转染空载细胞作为对照;采用RT-PCR和Western blot检测N-ras基因的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果转染siRNA的表达载体可以抑制内源N-ras基因在转录和转译上的表达。N-ras基因的表达抑制与BEL7402细胞的凋亡相关联。结论转染siR ...
赵岳   +4 more
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转γ -干扰素基因大鼠肝细胞模型的建立

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999
目的: 使用多聚阳离子脂质体载体( lipofectAMINE)在体外建立转γ -干扰素( IFN-γ )基因的大鼠肝细胞模型。方 法: 利用 lipofectAMINE 在体外将 IFN-γ基因转染大鼠肝细胞。分别以 RT-PCR 和 ELISA 方法检测所转IFN-γ基因在大鼠肝细胞 的转录和表达情况。结果: 以 lipofectAMINE 为载体的 IFN-γ基因转染大鼠肝细胞后, 可被有效的转录并产生具有生物活性的 IFN-γ。结论: IFN-γ基因可被成功转染入大鼠肝细胞并可有效表达 ...
王 坤 郭 英 闵 军 陈积圣
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SARA低表达对Activin A/Smads环路活性的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2019
目的探讨下调Smad锚捉蛋白(SARA)表达对Activin A/Smads环路活性的影响。方法利用RNA干扰技术,设计靶向大鼠SARA基因的短发卡RNA(shRNA),瞬时转染激活素A(ActA)高表达的大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。转染48h后倒置荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR、Western blot检测SARA基因的表达情况。对阳性转染组及阴性转染组细胞换液3h后,Western blot检测Smad3总蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果靶向SARA基因的SARA-shRNA及对照NC ...
石晓花   +8 more
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抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1和PPARγ mRNA表达的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的观察抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1(Transcription Sp1,)和过氧化物酶体增殖体激活受体(Peroxisome Proliferator-Activated Receptorγ,PPARγ)mRNA表达的影响。方法把pc DNA3.1抵抗素基因真核表达载体转染入HepG2肝细胞,用RT-PCR方法进行Sp1和PPARγ)mRNA表达的检测。结果抵抗素基因转染HepG2细胞后,Sp1的表达明显增强,P0.05。结论抵抗素基因转染HepG2细胞后,可明显增强Sp1的表达 ...
金正贤, 赵虹, 杜珍武, 张桂珍
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强型黄色荧光蛋白和VEGF 双基因载体在肝细胞共转染表达

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002
【目的】构建携带加强型黄色荧光素蛋白(EYFP)和人类血管内皮生长因子(VEGF)的双基因真核表达载体 pIRES-EYFP/ VEGF121 , 用EYFP 作标记基因, 研究外源性VEGF121 基因在大鼠原代培养肝细胞转染表达, 为实时监测 VEGF121基因修饰肝细胞移植后状态提供基础。【方法】将pcDNA3VEGF121中VEGF121定向克隆到pIRES-EYFP , 构建重组质 粒pIRES-EYFP/ VEGF121 , 经酶切、PCR 扩增和部分DNA 序列分析证实后 ...
王金林   +3 more
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细胞内氯通道4基因siRNA表达载体的构建及其沉默效应

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的构建针对细胞内氯通道4(CLIC4)的短链干涉RNA(siRNA)及其表达载体,转染细胞后观察其对CLIC4基因的干涉作用。方法设计CLIC4靶向的发夹状siRNA,据此设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接到pSilencer3.1-H1载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体转染法转染大鼠神经胶质瘤细胞C6,通过RT-PCR检测CLIC4基因表达水平的变化。结果酶切鉴定与DNA测序分析证明CLIC4基因的siRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明CLIC4基因的表达水平明显降低 ...
袁兆新   +8 more
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阳离子脂质体介导的外源基因转染小鼠脾细胞的方法学探讨

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002
【目的】探讨高效阳离子脂质体介导外源基因转染体外生长的小鼠脾细胞的方法。【方法】用新型阳离子脂质 体DOSPER 包裹携带lac Z 报告基因的质粒pCAGGS-lacZ 按3 种方法转染小鼠脾细胞, ①常规方法直接转染;②脾细胞经刀 豆球蛋白A(Con A)活化后再按常规方法转染;③用黏附辅助脂质体法(adhesion-assisted lipofection , AAL)转染脾细胞。转染 效率用X-gal 染色法测定。【结果】上述3 ...
何承伟
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