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甘蓝型油菜基因BnRCH转染人HEK 293A和Hela细胞的研究

open access: yes四川大学学报. 自然科学版, 2012
本研究从植物基因在动物细胞异源表达的角度入手,采用外源基因稳定转染的方法,向人胚胎肾细胞HEK 293A和人宫颈癌细胞Hela导入了BnRCH基因,获得了HEK 293A和Hela细胞的稳定转染子.使用RT-PCR、qPCR和Western blot等方法鉴定了获得的稳定转染子,确认了稳定转染子的成功建立.本研究一方面说明BnRCH虽然为植物基因,却仍然能够在动物细胞中正常表达;另一方面也为开展对BnRCH基因在动物细胞中的功能研究和应用开发建立了平台.同时,使用免疫细胞化学法和绿色荧光蛋白质(GFP ...
万谦   +5 more
doaj  

K7M2细胞转染Runx2基因后对MC3T3细胞RANKL基因表达的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的探讨转染Runx2基因后对RANKL及相关细胞因子的影响。方法将鼠骨肉瘤K7M2细胞分成3组,K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组,应用Westernblot方法检测转染是否成功,选择转染成功的细胞连同K7M2组,K7M2-neo组细胞,应用ELISA方法检测培养上清液中的IL-1α,IL-6,IL-11和PGE2的含量变化,并应用RT-PCR的方法检测应用K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组以及在K7M2-Runx2组细胞中加入IL ...
吴丹凯   +6 more
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pAdKDR/CD/TK双自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用的试验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2017
目的探讨含KDR启动子的双自杀基因CD/TK对肝癌HepG2细胞的杀伤作用。方法观察不同前药对HepG2细胞、血管内皮细胞ECV304和LST174细胞的杀伤作用,评估KDR启动子的靶向杀伤作用。观察不同前药对转染不同自杀基因的HepG2细胞的杀伤作用,及旁观者效应。结果转染腺病毒的HepG2细胞及血管内皮ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,而感染腺病毒的LST174细胞对前药不敏感 ...
谷洋   +4 more
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转染 p53 抑癌基因体外抑制 K562 细胞克隆的形成

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999
目的: 构建 p53 表达质粒, 研究 p53基因对白血病细胞 K562 细胞生长的抑制作用。方法: 以 T4 连接酶把 2 160 bp 的 p53 cDNA 片段插入 pRc/CMV 质粒, 重组构建 pRc/p53 表达质粒,以 Lipofectin 介导pRc/p53 质粒转染K562 细胞,以甲 基纤维素半固体培养方法作 K562 细胞体外克隆培养, 观察转染 p53 基因后 K562 细胞克隆形成改变。结果: p53 cDNA 质粒 转染的 K562 细胞, 体外培养克隆形成能力明显减低 ...
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高效表达型T克隆载体的构建及其特性

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTTP)70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)和中国旱獭α干扰素基因(cwIFNA5)分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
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hTERT启动子调控的TRAIL基因对乳腺癌细胞株的杀伤作用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的探讨hTERT、CMV启动子调控下TRAIL基因对乳腺癌细胞的生长抑制作用。方法脂质体法将pACCMV-EGFP-TRAIL、pAChTRET-EGFP-TRAIL转染至乳腺癌细胞MDA-MB-435,MTT法检测转染前后乳腺癌细胞的增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果pACCMV-EGFP-TRAIL转染组和pAChTRET-EGFP-TRAIL转染组OD490值明显低于空白对照组和空质粒转染组,流式细胞术检测细胞凋亡率也明显增高,并且pAChTRET-EGFP ...
刁建东, 卢振霞, 毕黎琦
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Snail基因慢病毒载体的构建及其促进结肠癌细胞上皮间质化的研究

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2012
【目的】 构建Snail基因慢病毒载体,研究Snail基因的表达与结肠癌细胞上皮间质化的关系。【方法】 利用Gateway Technology法构建Snail基因表达质粒和空白对照质粒,行慢病毒包装,成功构建Snail基因慢病毒载体后,在结肠癌细胞系caco2中转染Snail基因质粒及空白载体对照,构建稳转细胞株caco2- Snail和caco2-vc,并在LoVo细胞中瞬时转染上述质粒,对Snail及E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达进行检测,并用划痕 ...
doaj  

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