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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的应用胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因转染雪旺氏细胞,观察GDNF基因在雪旺氏细胞内的表达效果,以及对雪旺氏细胞的营养作用。方法将雪旺氏细胞分为空白对照组、载体组、空载体组,通过阳离子脂质体介导,将GDNF基因转染雪旺氏细胞。用细胞增殖实验（MTT）、免疫组化、流式细胞仪观察在24h、48h、72h各组转染后对细胞的营养作用。结果在载体组细胞的生长状况较其他两组增殖良好。免疫组化可见GDNF在载体组细胞内呈现高表达。流式细胞仪观察基因转染后对雪旺氏细胞有明显的营养作用 ...
杜文彦 +3 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的探讨siRNA对人肝癌HepG2细胞MDM2基因表达的抑制作用及对增殖的影响。方法体外合成针对MDM2基因的siRNA质粒,转染HepG2细胞株;应用RT-PCR和western blot方法检测siRNA对MDM2和P53基因和蛋白表达的影响,并用MTT法检测siRNA对细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期。结果和空白组比转染siMDM2-1,2的HepG2细胞的MDM2基因和蛋白表达减低,而P53基因和蛋白表达增加。阴性对照质粒组的基因表达未见明显改变。转染siRNA ...
赵燕颖 +4 more
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四川大学学报. 自然科学版, 2013 生物信息学分析推测了水稻OsHAD1基因属于HAD(haloacid dehalogenase)超级家族水解酶.为研究其功能,本实验设计构建了OsHAD1-RNAi载体,通过农杆菌介导的方法转化水稻,成功获得了转基因植株.结果表明,转基因植株与野生型(日本晴)相比,转基因植株从T0代到T2代结实率均有20%～50%的降低;实时荧光定量PCR分析显示,T2代独立转基因植株中OsHAD1基因的表达量均有50%以上的下调;花粉染色结果显示,转基因植株花粉染色异常,败育率高,平均败育率达71.19 ...
任鹏飞 +6 more
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腺病毒介导的BMP-2基因转染骨髓基质干细胞及种植异种骨支架的体外观察
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 用人骨形态发生蛋白 2腺病毒表达载体 （Ad BMP 2 ）转染的兔骨髓基质干细胞 （BMSC） ,种植BCB（去抗原牛松质骨 ）支架体外构建组织工程骨。方法 蛋白印迹法检测转染后细胞BMP 2的表达 ,ALP活性检测分析基因转染对细胞分化的影响。然后将转染后细胞接种到BCB支架上 ,扫描电镜观察细胞贴附、生长状况。结果 转染后 ,BMSC表达BMP 2 ,ALP活性明显增高。扫描电镜见转染细胞分布均匀 ,伸展良好。结论 Ad BMP 2可高效转染BM SC ,且促进细胞分化 ...
景元海 +4 more
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Linchuang shenzangbing zazhi, 2014 目的 构建重组人Orail基因真核表达载体,观察其在小鼠肾小球足细胞株（MPC5）中的表达。方法 根据GenBank数据库检索到的人Orail基因序列,人工合成法合成Orail基因编码区（coding sequence,CDS）全长序列,克隆至质粒表达载体PG-CMV-IRES-EGFP,构建重组质粒载体PG-CMV-Orail,通过PCR、双酶切及基因测序等方法进行鉴定;以脂质体转染法将重组质粒转染至MPC5细胞,应用荧光显微镜观察绿色荧光检测转染效率,RT-PCR、Western ...
魏冬月
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1998 目的: 研究小鼠 B7 基因转染对小鼠肝癌细胞 Hepal-6 细胞株细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。方法: 用逆转录病毒载体,将 小鼠B7 基因导入小鼠肝癌细胞 Hepal-6 细胞株中,经G418 筛选,获得高表达 B7分子的阳性细胞克隆,采用CTLA-4Ig 的间接免疫荧光法检测 B7 分子的表达情况,并观察了B7 基因转染对细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。结果:①亲本小鼠肝癌细胞株 Hepal-6 不表达 B7 分子,转 染 B7 基因的 Hepal-6 细胞高表达 B7 分子;②转染 B7
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pAdKDR/CD/TK双自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用的试验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2017 目的探讨含KDR启动子的双自杀基因CD/TK对肝癌HepG2细胞的杀伤作用。方法观察不同前药对HepG2细胞、血管内皮细胞ECV304和LST174细胞的杀伤作用,评估KDR启动子的靶向杀伤作用。观察不同前药对转染不同自杀基因的HepG2细胞的杀伤作用,及旁观者效应。结果转染腺病毒的HepG2细胞及血管内皮ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,而感染腺病毒的LST174细胞对前药不敏感 ...
谷洋 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTTP）70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因（EGFP）和中国旱獭α干扰素基因（cwIFNA5）分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
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hTERT启动子调控的TRAIL基因对乳腺癌细胞株的杀伤作用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨hTERT、CMV启动子调控下TRAIL基因对乳腺癌细胞的生长抑制作用。方法脂质体法将pACCMV-EGFP-TRAIL、pAChTRET-EGFP-TRAIL转染至乳腺癌细胞MDA-MB-435,MTT法检测转染前后乳腺癌细胞的增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果pACCMV-EGFP-TRAIL转染组和pAChTRET-EGFP-TRAIL转染组OD490值明显低于空白对照组和空质粒转染组,流式细胞术检测细胞凋亡率也明显增高,并且pAChTRET-EGFP ...
刁建东, 卢振霞, 毕黎琦
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999 目的: 构建 p53 表达质粒, 研究 p53基因对白血病细胞 K562 细胞生长的抑制作用。方法: 以 T4 连接酶把 2 160 bp 的 p53 cDNA 片段插入 pRc/CMV 质粒, 重组构建 pRc/p53 表达质粒,以 Lipofectin 介导pRc/p53 质粒转染K562 细胞,以甲 基纤维素半固体培养方法作 K562 细胞体外克隆培养, 观察转染 p53 基因后 K562 细胞克隆形成改变。结果: p53 cDNA 质粒 转染的 K562 细胞, 体外培养克隆形成能力明显减低 ...
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