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目的探讨p16基因转染对大肠癌细胞生长及对放射敏感性的作用。方法以脂质体介导外源性P16基因转染大肠癌SWWC细胞系,照射后MTT法测定OD值,计算细胞生长抑制率。结果p16基因转染大肠癌SWWC细胞发生周期阻滞,照射后转染组细胞生长抑制率增加,与对照组有明显差异。结论p16基因转染对大肠癌SWWC细胞具有明显抑制作用,可提高大肠癌细胞对放射的敏感性。
梁显军 +4 more
doaj
转植基因(transgene)在受体鱼基因组中以多拷贝串联方式的多位点随机整合,严重制约转基因鱼纯系的快速建立和转植基因的遗传稳定性,是转基因鱼研究亟待解决的问题。转植基因定点整合技术是解决上述问题的重要途径。转植基因定点整合技术,即基因打靶技术,在小鼠基因功能研究中得到广泛应用,并取得重要研究进展。本研究旨在针对鱼类胚胎发育特点,建立鱼类转植基因定点整合技术,以实现转植基因在受体鱼基因组有效靶位的单拷贝定点整合,籍此快速培育转植基因稳定整合的转基因鱼纯系。鱼类植基因定点整合研究包括两个方面 ...
汪亚平
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【目的】 研究Bcl-xl基因对成人神经母细胞廇SH-SY5Y细胞毒性的影响.【方法】 将构建好的Bcl-xl基因重组真核表达载体pIRES2-EGFP/Bcl-xl转染SH-SY5Y细胞,并分为正常组、pIRES2-EGFP空质粒转染组、pIRES2-EGFP/Bcl-xl质粒转染组,利用凋亡诱导剂硝普钠(50 μmol/L)诱导各组细胞凋亡,行Hoechst33258细胞染色对比观察各组细胞凋亡情况,通过MTT法分析各组细胞存活率?RT-PCR与Western blotting检测转染后Bcl ...
杨炼红 +5 more
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自1984 年第一例转基因鱼在我国诞生以来,转基因鱼研究取得长足进步。研究表明外源基因可以整合、表达,并能遗传给后代,然而外源基因整合位点难以控制,遗传不稳定等问题仍未解决。所幸我国鱼类核移植技术较为成熟,结合细胞基因转移、基因打靶和核移植技术 ...
赵浩斌,陈尚萍,朱作言
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目的研究RNA干扰(RNAi)对BEL7402细胞的N-ras基因表达的干扰效应。方法建立装载靶向N-ras基因小干扰性RNA(siRNA)的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染BEL7402细胞株,以转染空载细胞作为对照;采用RT-PCR和Western blot检测N-ras基因的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果转染siRNA的表达载体可以抑制内源N-ras基因在转录和转译上的表达。N-ras基因的表达抑制与BEL7402细胞的凋亡相关联。结论转染siR ...
赵岳 +4 more
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转人生长激素基因(hGH)红鲤F_4代鱼中转植基因的多态性与整合图式研究
鱼类转基因定向育种技术正日渐成熟,转基因鱼走向市场已为期不远。然而,人们对转植基因在受体鱼中的行为,与对其它转基因动物一样,缺乏足够的了解,尚不能实现外源基因的定点整合与受控表达。这个问题已严重制约转基因鱼纯系的建立进程。对转植基因整合机制的了解,最直接的途径是克隆转植基因及其整合位点顺序。本文通过克隆转人生长激素基因(hGH)红鲤F_4代鱼中转植基因及相关的整合位点,试图从分子水平上揭示转植基因在受体鱼中的形态,有效整合位点的顺序特征,转植基因在世代传递过程中的行为,以及外源基因何时能" ...
曾志强
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目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1对膀胱癌细胞T24的生物学影响。方法将构建好的含771 bp大小的基因片段的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/KiSS-1及空载体pcDNA3.1(+)用阳离子脂质体介导采用基因转染技术转染膀胱癌细胞T24,观察KiSS-1mRNA的表达、细胞生长能力、增殖情况及细胞侵袭力的变化。结果pcDNA3.1(+)/KiSS-1成功转染T24细胞,KiSS-1 mRNA表达阳性,而正常细胞和空载体组为阴性;转染目的基因后细胞生长曲线 ...
袁子杰, 杨杰
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本发明公开了一种水稻代谢轮廓分析及代谢差异研究的方法,采用液相色谱-质谱联用技术对水稻种子提取物进行分析得到水稻代谢轮廓谱,然后用多变量统计方法研究转基因水稻和非转基因水稻的代谢轮廓数据的整体差异,并发现对代谢表型差异有重要贡献的化合物,为转基因水稻的非预期效应和安全性评价提供依据。本发明的分析方法简单,快速,重复性好,适合于实际样品的批量分析 ...
赵春霞 +5 more
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目的: 使用多聚阳离子脂质体载体( lipofectAMINE)在体外建立转γ -干扰素( IFN-γ )基因的大鼠肝细胞模型。方 法: 利用 lipofectAMINE 在体外将 IFN-γ基因转染大鼠肝细胞。分别以 RT-PCR 和 ELISA 方法检测所转IFN-γ基因在大鼠肝细胞 的转录和表达情况。结果: 以 lipofectAMINE 为载体的 IFN-γ基因转染大鼠肝细胞后, 可被有效的转录并产生具有生物活性的 IFN-γ。结论: IFN-γ基因可被成功转染入大鼠肝细胞并可有效表达 ...
王 坤 郭 英 闵 军 陈积圣
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通过有性繁殖转移人生长激素基因鲤鱼(P_1),获得了转基因鲤鱼的子一代(F_1)和子二代(F_2);外源基因在转基因P_1与普通鲤鱼杂交产生的F_1代和转基因F_1代自交产生的F_2代鱼中的存在率分别为45.4%和66.7%;外源基因拷贝数在子代个体之间存在很大差异,从每细胞2拷贝到每细胞200拷贝不等;外源基因在转基因鱼子代中仍可表达具有生物功能的产物,人生长激素(hGH ...
李国华 +7 more
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