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, 1997 以油菜(Brassica napus L.)的下胚轴和子叶为转化受体,建立了油菜的高效转化系统。在此基础上,将抗除草剂溴苯腈基因(bxn基因)导入油菜,获得了抗溴苯腈转基因油菜。分子检测实验证明,转基因油菜中含有bxn基因。转基因油菜可抗高达10~(-3)mol ...
罗鹏 +1 more
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, 2016 有性生殖的关键过程是通过减数分裂产生生殖细胞,而减数分裂的一个重要环节是进行基于DNA双链断裂的同源染色体重组。在同源染色体重组过程中,SPO11蛋白催化产生DNA双链断裂,从而起始同源染色体的重组。因此,研究SPO11基因缺失在减数分裂过程中所引起的基因表达变化有助于在转录组水平上了解该基因的作用。本研究通过对嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)野生型和SP011敲除细胞株在接合生殖时期2 h、3 h、4 h、5 h四个时间点的转录组进行高通量测序 ...
闫冠雄 +5 more
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野生动物学报, 2015 根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用Kpn I和Xho I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达。结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达 ...
张晓明 陈 武 彭仕明
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, 2001 对Xa2 1在转基因水稻新汕B后代R1、R2 群体的遗传方式及稳定性进行初步分析 .特异PCR分析从分子水平表明Xa2 1基因已稳定遗传至R1代 ,自交R1代的抗感带型分离比为 3:1,揭示出Xa2 1基因在转基因水稻中按孟德尔方式遗传 .Hyg培养基发芽和田间接菌鉴定显示 ,Xa2 1转基因水稻对Hyg和白叶枯病的抗性多数在后代中出现3:1的分离 ,对白叶枯病的抗病性呈连续分布 ,能传递至较高世代 ,并且能在R2 代获得纯合株系 .图 3表 3参 ...
王芋华,刘勇,王世全,罗科,李平 +1 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 【目的】将G250抗原cDNA片段转染入sp2/0细胞中并获得稳定表达,为G250基因疫苗研究提供实验工具。【方法】用脂质体转染法将鉴定好的重组质粒转染入sp2/0细胞中,经G418筛选得到稳定表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光、Western blot检测G250基因在sp2/0细胞中的表达。【结果】转染2周后,筛选出阳性sp2/0细胞克隆,通过RT-PCR证实有G250mRNA转录,间接免疫荧光可以见到阳性细胞,Western blot证实有G250抗原表达。【结论 ...
张亚东 +5 more
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, 2000 外源基因的引导转化是相对直接转化而言 ,包括两类蛋白分子对转移DNA的的共价结合和包被 ,涉及转移DNA复合物的形成、转移和在受体细胞核基因中的整合。认为引导转化将提高外源基因转移和整合的频率。在此认识的基础上 ...
郭骁才
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, 2007 本发明公开了一种不育转基因鱼的制备方法，以鲤鱼肌动蛋白基因启动子作为启动子，以反义的２８６ｂｐ鲤鱼鲑鱼型促性腺激素释放激素基因互补脱氧核糖核酸片段［包括ｓＧｎＲＨ十肽、促性腺激素释放激素相关肽编码区和６４ｂｐ的３′非编码区序列］为靶位基因，草鱼生长激素基因３′侧翼序列为终止顺序，构建鲑鱼型促性腺激素释放激素反义ＲＮＡ表达载体，采用显微注射法将重组ＤＮＡ片段导入鲤鱼受精卵，聚合链式酶反应及放射免疫检测筛选获得不育转基因鱼。本发明方法易行，操作方便 ...
汪亚平, 朱作言, 胡炜, 黎双飞
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多药耐药基因转染人骨髓间充质干细胞及对其化疗保护作用的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的探讨逆转录病毒介导多药耐药基因（mdr1）体外转染人骨髓间充质干细胞（MSCs）能否提高其对化疗药物的耐受性。方法采用percoll密度梯度离心法自骨髓中分离MSC并进行纯化和扩增;脂质体转染法将携带有mdr1基因的逆转录病毒载体导入293T包装细胞,获得的病毒上清感染MSC,流式细胞术测定mdr1基因编码产物P-糖蛋白（P-g170）的表达水平;罗丹明（Rh123）排泌试验检测P-g170的功能活性;MTT法测定转染MSC对化疗药物耐受性。结果mdr1基因导入骨髓MSC后稳定表达P ...
叶明珠, 韩丽英, 岳鑫, 李荷莲
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, 1998 １９８５年，世界上第一批转基因鱼诞生。随后，鱼类基因转移迅速应用到培育高产、优质和抗逆的养殖鱼类新品种，并在解决发育生物学、分子生物学和生理学等方面的难题中发挥了重要作用。目前，研究者已经建立了三种成熟的鱼类基因转移方法，即显微注射、电脉冲和精子携带法，证实了转移基因在受体鱼基因组中的整合、性腺传递、表达和转译表达产物的生物活性。最近，“全鱼”生长激素（ＧＨ）基因的克隆与应用，使快速生长转ＧＨ基因鱼的研究取得了突破性进展，但仍需要解决转移基因的定点整合、稳定表达和遗传 ...
崔宗斌,朱作言
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western
边学海 +6 more
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