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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的探讨内毒素（LPS）相关受体CD14、Toll样受体4（TLR4）和MD-2基因共转染人小肠上皮细胞株（HIC）的最佳转染条件。方法用核糖核酸酶保护法（RPA）检测基因转染效率,分别研究质粒DNA的量、FuGENE 6转染试剂与质粒DNA的比例、转染试剂-质粒DNA复合物与靶细胞的作用时间及培养液中血清存在与否对转染效果的影响。结果FuGENE 6转染试剂转染HIC的最佳转染条件是:每种质粒DNA的量为2.0μg（使用6 cm培养皿）、转染试剂与质粒DNA的比例为4∶1、转染试剂 ...
张道杰, 蒋建新, 陈永华
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的构建含基因NLRC3的重组真核载体pcDNA3.1/myc-hisA-NLRC3。方法利用基因重组技术将NLRC3基因插入到真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisA中,经酶切,PCR,测序及Western确定重组体质粒构建成功并转染。结果重组真核载体pcDNA3.1/myc-hisA-NLRC3构建成功。并将重组体转染至hUMSC细胞中并进行单克隆筛选扩增。结论重组真核载体pcDNA3.1/myc-hisA-NLRC3构建成功,并成功转染到hUMSC中,为下一步研究NLRC3的转染研究奠定基础。
宛莹, 张世冬, 梁爽, 聂德志
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 【目的】将G250抗原cDNA片段转染入sp2/0细胞中并获得稳定表达,为G250基因疫苗研究提供实验工具。【方法】用脂质体转染法将鉴定好的重组质粒转染入sp2/0细胞中,经G418筛选得到稳定表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光、Western blot检测G250基因在sp2/0细胞中的表达。【结果】转染2周后,筛选出阳性sp2/0细胞克隆,通过RT-PCR证实有G250mRNA转录,间接免疫荧光可以见到阳性细胞,Western blot证实有G250抗原表达。【结论 ...
张亚东 +5 more
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, 1997 以油菜(Brassica napus L.)的下胚轴和子叶为转化受体,建立了油菜的高效转化系统。在此基础上,将抗除草剂溴苯腈基因(bxn基因)导入油菜,获得了抗溴苯腈转基因油菜。分子检测实验证明,转基因油菜中含有bxn基因。转基因油菜可抗高达10~(-3)mol ...
罗鹏 +1 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western
边学海 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的本研究旨在探讨E1A基因对乳腺癌细胞凋亡的影响,为乳腺癌E1A基因治疗的可行性提供理论和实验依据。方法①构建E1A基因真核表达质粒pEGFP-E1A:通过酶切反应获得E1A基因,琼脂糖凝胶回收后,连接入pEGFP-C1载体EcoRⅠ和BamHⅠ位点中。②E1A基因转染乳腺癌细胞系:脂质体介导将E1A基因转入乳腺癌细胞系SK-BR-3细胞株,经筛选获得稳定表达E1A基因的转染试验组细胞。③RT-PCR检测E1A基因的mRNA表达、west-ern-blot检测E1A蛋白表达。流式细胞仪观察细胞凋亡率 ...
杨新宇 +3 more
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, 1998 １９８５年，世界上第一批转基因鱼诞生。随后，鱼类基因转移迅速应用到培育高产、优质和抗逆的养殖鱼类新品种，并在解决发育生物学、分子生物学和生理学等方面的难题中发挥了重要作用。目前，研究者已经建立了三种成熟的鱼类基因转移方法，即显微注射、电脉冲和精子携带法，证实了转移基因在受体鱼基因组中的整合、性腺传递、表达和转译表达产物的生物活性。最近，“全鱼”生长激素（ＧＨ）基因的克隆与应用，使快速生长转ＧＨ基因鱼的研究取得了突破性进展，但仍需要解决转移基因的定点整合、稳定表达和遗传 ...
崔宗斌,朱作言
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的制备YWHAZ重组腺病毒及逆转录病毒,在293T细胞中验证基因表达情况。方法将YWHAZ基因分别克隆至腺病毒穿梭质粒pacAd5CMV-IRES-GFP及逆转录病毒质粒pLXSN-IRES-GFP,并用酶切鉴定、PCR及测序验证后分别转染至HEK 293T及Ampho293细胞,构建重组腺病毒及逆转录病毒。重组病毒分别感染293T细胞,观察荧光验证病毒侵染效果,RT-PCR检测YWHAZ基因表达情况。结果 PCR、酶切鉴定及测序分析,重组腺病毒及逆转录病毒构建正确 ...
王雅雯, 于宏, 王世宝, 黄映辉
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, 2005 本发明涉及微生物的基因转移方法,具体地说是将外源基因导入一种可结块生长的丝状固氮蓝藻的基因转移方法。为了克服目前用于表达外源基因的蓝藻存在的不结块的问题,从近七十个藻株中筛选到一种结块漂浮生长的丝状固氮蓝藻建立基因转移体系,使藻体可从培养液中直接捞取或用普通尼龙网过滤收获 ...
孔任秋, 徐旭东
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, 2000 根据本实验室转基因鱼育种研究的现状，讨论了“转基因鱼离市场还有多远”这一令人关注的问题。转草鱼生长激素重组基因（ＣＡｇｃＧＨ）鲤鱼具有明显的快速生长和饵料节省效应，鱼体有高干物质含量及高蛋白低脂肪的生化组成，是一种优质食用鱼。把一种鱼的基因转移到另一种鱼，即转“全鱼”基因后，受体鱼基因组改变的程度，仅相当于两种鱼杂交的１０万分之一左右，因而它对水生态系统的胁迫作用是轻微的，充其量可视为与相应杂交鱼实质等同。我国研制了世界第一尾转基因鱼。现在 ...
朱作言,曾志强
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