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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1998 目的: 研究小鼠 B7 基因转染对小鼠肝癌细胞 Hepal-6 细胞株细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。方法: 用逆转录病毒载体,将 小鼠B7 基因导入小鼠肝癌细胞 Hepal-6 细胞株中,经G418 筛选,获得高表达 B7分子的阳性细胞克隆,采用CTLA-4Ig 的间接免疫荧光法检测 B7 分子的表达情况,并观察了B7 基因转染对细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。结果:①亲本小鼠肝癌细胞株 Hepal-6 不表达 B7 分子,转 染 B7 基因的 Hepal-6 细胞高表达 B7 分子;②转染 B7
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K7M2细胞转染Runx2基因后对MC3T3细胞RANKL基因表达的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的探讨转染Runx2基因后对RANKL及相关细胞因子的影响。方法将鼠骨肉瘤K7M2细胞分成3组,K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组,应用Westernblot方法检测转染是否成功,选择转染成功的细胞连同K7M2组,K7M2-neo组细胞,应用ELISA方法检测培养上清液中的IL-1α,IL-6,IL-11和PGE2的含量变化,并应用RT-PCR的方法检测应用K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组以及在K7M2-Runx2组细胞中加入IL ...
吴丹凯 +6 more
doaj
The Construction Of High density Transient Gene Expression In Suspension-adapted Mammalian Cell and Application [PDF]
, 2010 重组蛋白在生物理化性质研究及临床前研究方面的需求越来越大。哺乳动物细胞能够进行复杂的翻译后加工修饰而表达完全生物活性的外源蛋白，从而使其表达人源蛋白具有很大的优势。近来瞬时基因表达系统的发展迅速，通过瞬时表达可以快速的获取足量的高活性重组蛋白。然而瞬时表达系统的产量一般较低，其表达水平一般不超过20mg/L，从而大体系的瞬转系统被广泛用来表达毫克至克级的蛋白，目前报道的最大瞬转系统达100L。本研究的策略是通过摸索CHO-S悬浮细胞的高密度瞬时基因转染条件，并通过Fed ...
尹柏元
core
hTERT启动子调控的TRAIL基因对乳腺癌细胞株的杀伤作用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨hTERT、CMV启动子调控下TRAIL基因对乳腺癌细胞的生长抑制作用。方法脂质体法将pACCMV-EGFP-TRAIL、pAChTRET-EGFP-TRAIL转染至乳腺癌细胞MDA-MB-435,MTT法检测转染前后乳腺癌细胞的增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果pACCMV-EGFP-TRAIL转染组和pAChTRET-EGFP-TRAIL转染组OD490值明显低于空白对照组和空质粒转染组,流式细胞术检测细胞凋亡率也明显增高,并且pAChTRET-EGFP ...
刁建东, 卢振霞, 毕黎琦
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pAdKDR/CD/TK双自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用的试验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2017 目的探讨含KDR启动子的双自杀基因CD/TK对肝癌HepG2细胞的杀伤作用。方法观察不同前药对HepG2细胞、血管内皮细胞ECV304和LST174细胞的杀伤作用,评估KDR启动子的靶向杀伤作用。观察不同前药对转染不同自杀基因的HepG2细胞的杀伤作用,及旁观者效应。结果转染腺病毒的HepG2细胞及血管内皮ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,而感染腺病毒的LST174细胞对前药不敏感 ...
谷洋 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTTP）70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因（EGFP）和中国旱獭α干扰素基因（cwIFNA5）分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
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抑制葡萄糖调节蛋白78基因表达逆转卵巢癌顺铂耐药作用的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的探讨以葡萄糖调节蛋白78（GRP78）基因为靶向的RNA干扰（RNAi）抑制GRP78基因的表达,对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的影响。方法以GRP78基因为靶向的pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒的构建,脂质法转染至细胞中;RT-PCR及Western blot方法检测GRP78 mRNA及蛋白表达;Western blot方法检测CHOP蛋白表达;MTT法检测不同浓度顺铂作用下细胞存活率,计算IC50及耐药指数。结果 RT-PCR及Western ...
范丽梅 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999 目的: 构建 p53 表达质粒, 研究 p53基因对白血病细胞 K562 细胞生长的抑制作用。方法: 以 T4 连接酶把 2 160 bp 的 p53 cDNA 片段插入 pRc/CMV 质粒, 重组构建 pRc/p53 表达质粒,以 Lipofectin 介导pRc/p53 质粒转染K562 细胞,以甲 基纤维素半固体培养方法作 K562 细胞体外克隆培养, 观察转染 p53 基因后 K562 细胞克隆形成改变。结果: p53 cDNA 质粒 转染的 K562 细胞, 体外培养克隆形成能力明显减低 ...
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的探讨内毒素（LPS）相关受体CD14、Toll样受体4（TLR4）和MD-2基因共转染人小肠上皮细胞株（HIC）的最佳转染条件。方法用核糖核酸酶保护法（RPA）检测基因转染效率,分别研究质粒DNA的量、FuGENE 6转染试剂与质粒DNA的比例、转染试剂-质粒DNA复合物与靶细胞的作用时间及培养液中血清存在与否对转染效果的影响。结果FuGENE 6转染试剂转染HIC的最佳转染条件是:每种质粒DNA的量为2.0μg（使用6 cm培养皿）、转染试剂与质粒DNA的比例为4∶1、转染试剂 ...
张道杰, 蒋建新, 陈永华
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[Advances in the construction and application of a novel liver organoid model for hepatitis B virus infection]. [PDF]
Zhonghua Gan Zang Bing Za ZhiLi H, Xiang KH.
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