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, 1998 １９８５年，世界上第一批转基因鱼诞生。随后，鱼类基因转移迅速应用到培育高产、优质和抗逆的养殖鱼类新品种，并在解决发育生物学、分子生物学和生理学等方面的难题中发挥了重要作用。目前，研究者已经建立了三种成熟的鱼类基因转移方法，即显微注射、电脉冲和精子携带法，证实了转移基因在受体鱼基因组中的整合、性腺传递、表达和转译表达产物的生物活性。最近，“全鱼”生长激素（ＧＨ）基因的克隆与应用，使快速生长转ＧＨ基因鱼的研究取得了突破性进展，但仍需要解决转移基因的定点整合、稳定表达和遗传 ...
崔宗斌,朱作言
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腺病毒介导的BMP-2基因转染骨髓基质干细胞及种植异种骨支架的体外观察
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 用人骨形态发生蛋白 2腺病毒表达载体 （Ad BMP 2 ）转染的兔骨髓基质干细胞 （BMSC） ,种植BCB（去抗原牛松质骨 ）支架体外构建组织工程骨。方法 蛋白印迹法检测转染后细胞BMP 2的表达 ,ALP活性检测分析基因转染对细胞分化的影响。然后将转染后细胞接种到BCB支架上 ,扫描电镜观察细胞贴附、生长状况。结果 转染后 ,BMSC表达BMP 2 ,ALP活性明显增高。扫描电镜见转染细胞分布均匀 ,伸展良好。结论 Ad BMP 2可高效转染BM SC ,且促进细胞分化 ...
景元海 +4 more
doaj
, 2000 外源基因的引导转化是相对直接转化而言 ,包括两类蛋白分子对转移DNA的的共价结合和包被 ,涉及转移DNA复合物的形成、转移和在受体细胞核基因中的整合。认为引导转化将提高外源基因转移和整合的频率。在此认识的基础上 ...
郭骁才
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甘蓝型油菜基因BnRCH转染人HEK 293A和Hela细胞的研究
四川大学学报. 自然科学版, 2012 本研究从植物基因在动物细胞异源表达的角度入手,采用外源基因稳定转染的方法,向人胚胎肾细胞HEK 293A和人宫颈癌细胞Hela导入了BnRCH基因,获得了HEK 293A和Hela细胞的稳定转染子.使用RT-PCR、qPCR和Western blot等方法鉴定了获得的稳定转染子,确认了稳定转染子的成功建立.本研究一方面说明BnRCH虽然为植物基因,却仍然能够在动物细胞中正常表达;另一方面也为开展对BnRCH基因在动物细胞中的功能研究和应用开发建立了平台.同时,使用免疫细胞化学法和绿色荧光蛋白质(GFP ...
万谦 +5 more
doaj
, 2008 哈密瓜是新疆最具特色的瓜果之一，也是新疆最有影响的瓜果品牌。本研究试图通过转基因生物技术加速哈密瓜保鲜品种的培育，采用细菌来源的氨基环丙烷羟分子ACC脱氨酶基因导入哈密瓜直接降低乙烯合成前体ACC，抑制果实内乙烯合成，延缓哈密瓜采后的成熟时间达到保鲜的目的。成果在大量试验研究的基础上突破了相关的技术难题，建立了哈密瓜转保鲜基因的技术体系，获得了抗病毒和保鲜基因转化植株268株，转基因植株的移栽成活率达90﹪以上，获得果实2个。通过对21株基因转化植株的生理生化指标测定 ...
中国科学院新疆生态与地理研究所
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K7M2细胞转染Runx2基因后对MC3T3细胞RANKL基因表达的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的探讨转染Runx2基因后对RANKL及相关细胞因子的影响。方法将鼠骨肉瘤K7M2细胞分成3组,K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组,应用Westernblot方法检测转染是否成功,选择转染成功的细胞连同K7M2组,K7M2-neo组细胞,应用ELISA方法检测培养上清液中的IL-1α,IL-6,IL-11和PGE2的含量变化,并应用RT-PCR的方法检测应用K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组以及在K7M2-Runx2组细胞中加入IL ...
吴丹凯 +6 more
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加热对转基因和非转基因大豆胰蛋白酶抑制剂活性以及蛋白质溶解度的影响
, 2013 大豆是重要的植物蛋白和油脂来源,具有极高的营养价值,在水产饲料中得到了广泛应用。但是大豆中含有多种抗营养因子,特别是胰蛋白酶抑制剂限制了大豆及其制品在饲料中的利用。试验旨在研究加热法处理转基因和非转基因大豆对胰蛋白酶抑制剂的钝化效果及蛋白质溶解度的影响,采用60、80、100、120℃,分别加热1、2 h。结果表明:转基因大豆含有较高的胰蛋白酶抑制剂;两种大豆胰蛋白酶抑制剂活性(TIA)都随加热温度升高而降低,非转基因大豆TIA对温度更敏感;120℃、2 h能有效抑制大豆TIA ...
朱晓鸣 +5 more
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hTERT启动子调控的TRAIL基因对乳腺癌细胞株的杀伤作用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨hTERT、CMV启动子调控下TRAIL基因对乳腺癌细胞的生长抑制作用。方法脂质体法将pACCMV-EGFP-TRAIL、pAChTRET-EGFP-TRAIL转染至乳腺癌细胞MDA-MB-435,MTT法检测转染前后乳腺癌细胞的增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果pACCMV-EGFP-TRAIL转染组和pAChTRET-EGFP-TRAIL转染组OD490值明显低于空白对照组和空质粒转染组,流式细胞术检测细胞凋亡率也明显增高,并且pAChTRET-EGFP ...
刁建东, 卢振霞, 毕黎琦
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, 2016 目的:经农杆菌介导将变异链球菌表面蛋白A区与霍乱毒素B亚单位嵌合基因导入黄瓜,获得转基因黄瓜植株,为转基因可食防龋疫苗的研究提供实验基础。方法:利用双元载体pCAMBIA2301构建变异链球菌表面蛋白A区与霍乱毒素B亚单位嵌合质粒(PAcA-ctxB)的植物表达载体p2355-PAcA-CTB;电转化法导入农杆菌EHA105;采用叶盘转化法转化黄瓜,转基因植物经过卡那霉素抗性筛选、GUS基因染色、PCR及Southern blot杂交分析检测目的基因鉴定。结果:成功得到转基因黄瓜植株,卡那霉素抗性筛选 ...
洪献忠 +6 more
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抑制葡萄糖调节蛋白78基因表达逆转卵巢癌顺铂耐药作用的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的探讨以葡萄糖调节蛋白78（GRP78）基因为靶向的RNA干扰（RNAi）抑制GRP78基因的表达,对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的影响。方法以GRP78基因为靶向的pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒的构建,脂质法转染至细胞中;RT-PCR及Western blot方法检测GRP78 mRNA及蛋白表达;Western blot方法检测CHOP蛋白表达;MTT法检测不同浓度顺铂作用下细胞存活率,计算IC50及耐药指数。结果 RT-PCR及Western ...
范丽梅 +4 more
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