Results 41 to 50 of about 3,185 (150)
实时荧光定量PCR检测血清miR-7方法的建立及临床初步应用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的建立ploy（A）聚合酶加尾的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测血清miR-7,并作临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-7ploy（A）聚合酶加尾逆转录获得cDNA,进行SYBR Green Ⅰ实时定量PCR扩增检测。制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,绝对定量血清中miR-7的表达水平。结果该方法能定量检测血清miR-7表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在103copies/uL至106copies ...
陈鑫 +5 more
doaj
Establishment of ring primers real-time PCR for quantification of the mRNA expression levels of HER2 gene [PDF]
, 2013 本论文基于实时荧光定量PCR技术和环状引物技术，建立了一种乳腺癌HER2基因mRNA表达水平的环状引物EvaGreen染料实时荧光定量PCR（qPCR）检测方法。目前临床上用于检测HER2基因表达水平的方法都存在一些不足，且耗时（至少需要1~3天的时间），不利于临床诊断和治疗。因此，临床上迫切需要一种能够快速准确、简捷价廉且易于标准化的检测乳腺癌HER2基因表达水平的方法。 第一章，综述乳腺癌研究的发展过程与人表皮生长因子受体2（Humanepidermalgrowthfactorreceptor-2 ...
李怡
core
Research of Pfu polymerase improvement for Real-time fluorescent quantitative PCR [PDF]
, 2017 自从1988年Saiki等将耐热性的Taq聚合酶引入PCR反应后，极大地推动了PCR技术的推广，也带动了实时荧光定量PCR（qPCR）技术的兴起，分子生物学发展日新月异。随着技术的推广与应用，人们也逐渐发现了Taq聚合酶自身存在的缺点，其保真性差不适合高保真的PCR，复杂样本扩增能力差需要对样本进行处理以及体系的优化等等。而B族的Pfu聚合酶具有高保真性、高行进性和强耐干扰能力，但是不具有5’-3’外切活性且强3’-5’外切活性会水解游离探针影响荧光增益信号检测而不能用于qPCR ...
陆龙飞
core
Relative Quantification of Hepcidin Gene Transcripts in Pseudosciaena crocea [PDF]
, 2012 以大黄鱼(PSEudOSCIAEnA CrOCEA)管家基因18S rrnA和β-ACTIn作为内参基因,分别比较2个内参基因建立的相对定量曲线,最终确立以18S rrnA为参比基因,定量分析大黄鱼的HEPCIdIn抗菌肽基因.该相对定量分析方法所得结果与nOrTHErn-blOT方法一致.应用建立的HEPCIdIn基因的实时荧光相对定量研究方法,对大黄鱼头肾中的HEPCIdIn基因转录物进行相对定量,为今后开展鱼体内免疫相关基因的表达特性、诱导机制等工作奠定研究基础.同时,克隆得到的大黄鱼β ...
吴曼丽, 杨明, 范丹青, 蔡灵
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的探索唐氏综合征（Down’s Syndrome）的快速诊断方法。方法采用细胞遗传学分析技术对35例唐氏综合征患者（包括4例羊水标本和31例外周血标本）进行核型分析。同时采用荧光定量PCR技术对35例唐氏综合征患者和371例正常对照（含32例羊水标本和339例外周血标本）21号染色体上的D21S11位点进行PCR扩增检测。其中对10例未培养的羊水细胞（4例唐氏综合征患者和6例正常对照）进行荧光原位杂交分析。将唐氏综合征患者的荧光定量PCR检测结果和荧光原位杂交检测结果与细胞遗传学分析结果进行比较 ...
尉庭华 +5 more
doaj
[Comparison of BCR::ABL (P210) mRNA levels detected by dPCR and qPCR methods in patients with chronic myeloid leukemia]. [PDF]
Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi, 2023 Gao HL +6 more
europepmc +1 more source
实时荧光PCR同时检测金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7 [PDF]
, 2009 目的建立改良分子信标-双重实时荧光PCR同时检测金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7,应用于细菌性食物中毒的快速诊断。方法根据GeneBank公布的金黄色葡萄球菌nuc基因序列和大肠杆菌O157:H7rfbE基因序列,设计引物和改良分子信标探针,建立改良分子信标-双重实时PCR检测体系。结果双重荧光PCR反应体系检测151株金黄色葡萄球菌和27株大肠杆菌O157:H7,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰。对8762份大便、食品等标本进行检测,315份标本金黄色葡萄球菌实时荧光PCR阳性 ...
兰全学 +6 more
core
定量RT-PCR测定冠心病患者外周血中Toll样受体4的基因表达水平
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的建立检测人Toll样受体4（Toll like receptor4,TLR4）mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并用来测定冠心病患者外周血单个核细胞（PBMCs）中TLR4的基因表达水平,探讨TLR4基因表达水平与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆载体pGEM-T-TLR4作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。在GeneAmp5700型检测仪上测定了50例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者和40名健康对照者外周血中TLR4mRNA的含量 ...
耿红莲 +6 more
doaj
The cloning，expression and characterization of the Marsupenaeus japonicus ML gene (MjML) [PDF]
, 2016 日本囊对虾(Marsupenaeusjaponicus)是我国四大养殖对虾品种之一，具有重要的经济价值。日本囊对虾幼体发育过程复杂，受精卵孵化后需要经过无节幼体，溞状幼体，糠虾幼体和仔虾4个发育阶段，发育过程中蜕皮频繁，蜕皮周期较短。近年来，随着日本囊对虾养殖规模的逐步扩大，各种细菌性疾病对其养殖业的发展造成了巨大的影响，并造成了严重的经济损失。 ML(MD-2-relatedLipid-recognition)家族为一类具有保守ML单结构域的蛋白质，能够直接和脂类结合 ...
徐伊桦
core
MiR-192/-215靶向BIVM基因调控胃癌细胞生物学功能
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 ： 【目的】研究miR-192/-215通过靶基因BIVM调控人胃癌发生发展的机制。【方法】首先利用靶基因 预测网站、基因芯片、实时荧光定量PCR技术筛选出miR-192/-215的靶基因BIVM，然后构建双荧光素酶报告 质粒，验证BIVM为miR-192/-215靶基因。随后通过转染BIVM-siRNA干扰BIVM表达后，检测其对胃癌细胞增 殖、凋亡的作用。8只裸鼠随机分为BIVM-siRNA实验组和NSC-siRNA对照组，将转染BIVM-siRNA的胃癌细胞 种植于裸鼠皮下 ...
林慧娟 +5 more
doaj