Results 81 to 90 of about 3,185 (150)
基于episomal CRISPR/Cas9 载体的基因敲入方法
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 【目的】研究一种在哺乳动物细胞中高效的基因敲入方法，比较带有oriP-EBNA1 序列的episomal CRISPR/Cas9载体与普通CRISPR/Cas9载体的基因敲入效率是否有差别。【方法】首先利用慢病毒载体构建稳定表达红色荧光蛋白DsRedE2的人胚肾细胞系（293FT）与人诱导多能干细胞系（hiPS）；利用CRISPR/Cas9序列设计网站，设计和合成靶向DsRedE2的向导RNA（sgRNA），分别克隆至带有oriP-EBNA1的episomal CRISPR ...
邹征伟, 赖兴强, 李伟强
doaj
Nitric oxide enhances phosphate nutrition in rice seedlings by regulating phosphate uptake and translocation [PDF]
, 2017 磷是生物体所必需的大量元素之一，其参与构成的化合物、生物大分子广泛参与到各种生命活动当中，有重要的生理功能。但是土壤中可供植物直接利用的磷含量十分的有限，致使磷成为植物生长和粮食产量的主要限制因素。因此，研究植物磷积累的分子机制，寻找促进植物磷营养的方法有重要的意义。 一氧化氮（NO）作为一种气体信号分子，参与调节植物多种代谢活动。虽然一氧化氮参与植物非生物胁迫的调节作用已经得到证实，但是其对磷吸收的调节机制尚不明确。本试验以水稻为材料，通过施加NO供体硝普钠（sodiumnitroprusside ...
李鹏飞
core
多重methylight在结直肠癌相关基因ALX4和SEPT9 甲基化检测中的应用
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2015 摘 要: 【目的】 探讨多重methylight方法在检测结直肠癌(CRC)外周血ALX4? SEPT9 基因甲基化状态中的价值,为CRC无创检测提供新方法?【方法】 采用不同的荧光报告基团标记ALX4? SEPT9 基因甲基化探针,利用高敏感性?高特异性的多重实时定量甲基化特异性PCR方法(MSP,methylight),同时检测ALX4? SEPT9基因在CRC外周血中的甲基化情况?【结果】 ALX4?
doaj
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2019 【目的】探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子（CFTR）对内脏脂肪组织前脂肪细胞增殖和分化的调控作用。【方法】分别采用CFTR基因敲除小鼠（CFTRKO）4、8周龄及同周龄野生型对照鼠，分离内脏脂肪组织前脂肪细胞，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测增殖分化转录因子表达变化。采用地塞米松-异丁基甲基黄嘌呤-胰岛素（DMI）诱导3T3-L1细胞建立前脂肪细胞分化模型，采用免疫印迹（Western blot）技术检测CFTR及分化因子蛋白表达变化；并进一步转染CFTR沉默及过表达病毒，采用免疫印迹 ...
晋晨晨 +3 more
doaj
Effects of Calcium and Simulated Acid Rain on Four Calcium-related Genes Expression of Sensitive and Tolerant Trees [PDF]
, 2013 对外界环境的适应是植物生长和发育过程中非常重要的特征。现今，酸雨已经是世界范围的严重环境问题，中国亦不例外。研究植物对酸雨响应的分子机制是酸雨研究的重要内容。本实验中，我们选取了在我国南方广泛分布的木本植物作为研究对象，分别是枫香（LiquidambarformosanaHance）、木荷（SchimasuperbaGardnetChamp）、马尾松（PinusmassonianaLamb）以及南方红豆杉（Taxuswallichianavar.mairei(Lemée&H.Léveillé)L.K ...
朱华建
core
野生动物学报为研究梅花鹿（Cervus nippon）DLX5基因的结构和功能，进一步探究其与梅花鹿茸角骨化机制间的关系，采用RT-PCR技术对梅花鹿DLX5基因进行克隆，获得包含全部编码区的cDNA序列，对该基因的氨基酸序列进行生物信息学分析并构建系统进化树，通过KEGG富集分析其信号通路，运用实时荧光定量RT-PCR检测该基因在鹿茸生长不同时期的表达情况。结果表明：梅花鹿DLX5基因编码区长为870 bp，共编码289个氨基酸。DLX5蛋白为可溶性的不稳定蛋白，有2个保守结构域，主要定位于细胞核 ...
王鹏 +5 more
doaj
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 【目的】旨在通过体内研究，探讨内质网应激的主要标志物，活化转录因子4（ATF4）在小梁网功 能障碍、细胞凋亡中所起的作用，以期为阐明原发性开角青光眼（POAG）的发病机制提供新的思路。【方法】选 取6～8周大的C57BL/6J小鼠47只，实验组（24只，24眼）单眼前房注射ATF4腺病毒，对照组（23只，23眼）单眼 前房注射GFP腺病毒。在注射后的不同时间点，分别取实验组和对照组小鼠的前房角组织，用冰冻切片和免疫 荧光染色法观察病毒荧光及内质网应激相关蛋白ATF4和C/EBP同源蛋白（CHOP）
薛然, 李晶明, 陈果, 钟毅敏
doaj
Leukemia fusion genes and gene mutation detection methods based on real-time quantitative PCR platform [PDF]
, 2012 白血病是造血系统的恶性疾病，随着科学技术的发展，白血病的研究也由形态学步入到分子生物学。研究发现白血病的发生是多因素、多基因、多阶段的复杂的生物学现象。引起白血病最为常见的原因是染色体异常（通常形成融合基因）及基因突变，其中很多融合基因或者基因突变可作为分子标记物，用于预后判断、治疗方案的选择、微小残留病的监控及靶向治疗。本论文基于实时荧光定量PCR平台，建立了两种方法，一种用于检测融合基因，一种用于检测基因突变，以期可以用于临床辅助治疗或诊断。 第一章绪论 本章回顾了白血病发现及研究历史 ...
赵晓明
core
实时荧光定量 PCR检测野生型p53介导蛋白磷酸酶mRNA 在非小细胞肺癌中的表达
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 荧光染料Ⅰ(SYBR GreenⅠ)是一种较为常用的非探针类定量PCR的方法,其结果具有一定特异性65377;本研究的目的是建立检测野生型p53介导蛋白磷酸酶(Wip1)mRNA的SYBR GreenⅠ实时定量PCR的方法,了解肺癌组织及其远癌正常肺组织中Wip1的表达水平,研究肺癌组织中Wip1的表达水平与各种临床病理特征之间的关系65377; 【方法】 利用相对定量的方法检测44例肺癌及相应远癌正常肺组织中Wip1 mRNA相对于β-actin mRNA的表达量,进行相对定量分析65377;
doaj
TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR快速检测光滑念珠菌
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的采用TaqMan-MGB探针作为检测信号,建立快速检测光滑念珠菌的实时荧光定量PCR方法。方法以光滑念珠菌核糖体RNA编码基因（rDNA）中的内转录间隔区2（ITS2）作为靶基因,设计特异性引物和TaqManMGB探针。在梯度光滑念珠菌纯菌液标本中评价所建方法灵敏度和重复性;在102株光滑念珠菌临床分离株、非光滑念珠菌的其他4种念珠菌临床分离株、7种细菌临床分离株和人基因组的DNA中评价所建方法特异度;并在模拟光滑念珠菌血症的血标本中初步探讨其临床应用价值 ...
郭毅 +4 more
doaj