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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究RNA干扰（RNAi）对BEL7402细胞的N-ras基因表达的干扰效应。方法建立装载靶向N-ras基因小干扰性RNA（siRNA）的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染BEL7402细胞株,以转染空载细胞作为对照;采用RT-PCR和Western blot检测N-ras基因的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果转染siRNA的表达载体可以抑制内源N-ras基因在转录和转译上的表达。N-ras基因的表达抑制与BEL7402细胞的凋亡相关联。结论转染siR ...
赵岳 +4 more
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实时荧光定量RT-PCR技术检测siRNA对HBV复制的干扰效果
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的运用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测小RNA分子（small interfering RNAs,siRNA）对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）复制的抑制作用。方法在HepG2.2.15细胞内导入筛选的三条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平。结果导入特异siRNA分子的细胞中HBV的mRNA表达量明显降低。结论实时荧光定量RT-PCR技术能准确可靠的检测mRNA的表达水平 ...
陈小卫, 焦京, 周美娟, 丁振华
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的探讨小分子Survivin干扰RNA（siRNA-Survivin）逆转人肺癌耐药细胞（A549DDP）耐药性的研究。方法应用RT-PCR法及Western-blot方法证明Survivin基因在人肺腺癌耐药细胞系（A549DDP）细胞系呈现高表达;并采用脂质体为转染介质,将Survivin小片段RNA导入A549DDP细胞沉默Survivin基因;应用MTT法观察顺铂、多西他赛、吉西他滨、表阿霉素对沉默Survivin基因后的A549DDP细胞的细胞增殖抑制及半数抑制浓度的变化。结果 1,Sur ...
李亚荣 +5 more
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HMGB1小干扰RNA对鼻黏膜上皮细胞HMGB1/TLR4信号通路的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2023 目的 研究采用小干扰RNA(si-RNA)沉默高迁移率族蛋白1(HMGB1)对人鼻黏膜上皮细胞(HNECs)Toll样受体4(TLR4)及其下游信号通路的影响。方法 体外培养人鼻黏膜上皮细胞，分为空白对照组、si-HMGB1组、脂多糖(LPS)组和LPS+si-HMGB1组。RT-PCR检测HNECs中HMGB1 mRNA的表达。Western blot检测4组细胞HMGB1、TLR4表达以及通路下游核因子-κB(NF-κB)和白介素1β(IL-1β)的表达水平 ...
刘洋, 鲍羿岐, 崔娜, 朱学伟
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的观察特异的小干扰RNAs（small interfering RNAs,siRNAs）对胃癌细胞胰岛素样生长因子-Ⅰ受体（In-sulin-like growth factor-Ⅰ receptor,IGF-ⅠR）基因表达的抑制作用,研究其对肿瘤增殖的影响。方法设计并体外合成2条靶向IGF-ⅠR的siRNAs,脂质体法瞬时转染MGC803细胞,转染前后均使用WesternBlot法检测IGF-ⅠR的表达水平,MTT法检测细胞增殖,细胞计数并描记生长曲线。结果MGC803细胞中有IGF-ⅠR的强烈表达。
牛海静 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的寻找人肝癌细胞N-ras基因的RNA干涉有效靶点。方法利用计算机网络资源及Oligo6.0、BlastResearch等生物学软件在N-ras基因编码区寻找RNAi有效靶点,并设计用于体内转录形成以U6启动子的siRNA发夹结构的DNA。结果成功筛选出RNA干涉的有效序列14个,并设计出siRNA发夹结构的DNA。结论这种对人肝癌细胞N-ras基因的RNAi有效靶点的筛选为进一步研究奠定了理论基础。其工作的开展将在RNAi治疗、肝癌N-ras基因功能研究、新药开发等方面发挥重要作用。
徐凯成 +4 more
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SIK2 shRNA重组腺病毒载体构建及其在3T3-L1脂肪细胞的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建特异性小鼠盐诱导基因（Salt induced kinase2,SIK2）的shRNA腺病毒载体,干扰脂肪细胞中SIK2的表达。方法设计3对靶向SIK2的shRNA,插入穿梭质粒pENTR/U6载体,转染3T3-L1脂肪细胞,通过Real-timePCR方法筛选最佳沉默SIK2效果的穿梭质粒,经腺病毒同源重组后,重组小鼠SIK2shRNA腺病毒载体经脂质体转染HEK293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-SIK2-shRNA,并进行大量扩增和纯化。纯化的腺病毒感染成熟的3T3 ...
杜静 +5 more
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Circ_0018478通过编码HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2022 目的探究环状RNA circ_0018478调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用和可能机制。方法RT-qPCR检测健康器官捐献者（n=18）和心衰（n=28）患者心肌中circ_0018478及其宿主基因含E3泛素蛋白连接酶4的HECT和RLD结构域（HERC4）的表达水平。荧光原位杂交（FISH）实验和核质RNA定量检测circ_0018478的细胞分布情况，放线菌素D干预实验和核糖核酸外切酶（RNase R）消化实验检测circ_0018478的RNA稳定性 ...
丰嘉欣 +7 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 人乳头瘤病毒（HPV）通过表达病毒癌基因,干扰机体正常信号转导、细胞因子活化及扰乱有效的细胞免疫应答形成了癌症发病的确切因素,但此过程需要经历长期且极其复杂的系列分子事件和多种编码基因与非编码基因的参与,并且在不同的感染部位,致癌的几率和病理过程差异很大[1,2];近年来,随着微小RNA（miRNA）的基因表达调控网络的逐渐发现,miRNA在肿瘤的发生 ...
丁建龙, 吴文安, 孟凡旭, 邓萍
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Lipid nanoparticle delivery of siRNA targeting Cyp2e1 gene attenuates subacute alcoholic liver injury in mice. [PDF]
Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban, 2023 Wu S, Chen Q, Wang Y, Yin H, Wei Y.
europepmc +1 more source