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MicroRNA-99b-5p通过抑制成纤维细胞生长因子21表达促进心肌细胞肥大
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2022 目的研究微小RNA microRNA-99b-5p（miR-99b-5p）对心肌细胞肥大表型的调节作用及机制。方法实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测人心肌组织（包括健康对照者、心力衰竭患者心肌组织）以及横向主动脉缩窄（TAC） 手术小鼠心肌中miR-99b-5p的表达水平。血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）处理原代乳小鼠心肌细胞（NMVCs）后，利用鬼笔环肽染色呈现心肌细胞大小，RT-qPCR检测miR-99b-5p表达水平。利用RT-qPCR及蛋白质免疫印迹法检测转染miR-99b-5p ...
陈丽文 +7 more
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siRNA对VEGFR2的表达抑制及对HL60细胞和人内皮细胞的影响
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】为探索治疗白血病的新思路研究了小干扰RNA（siRNA）对肿瘤细胞株HL60和人血管内皮细胞（EC）株EA·hy926血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）基因表达的抑制作用。【方法】制备并筛选VEGFR2基因的最有效siRNA，并据此设计shRNA寡核苷酸链，构建pENTR^TM／U6干扰表达载体。瞬时转染细胞．采用MTF法、RT-PCR法及Western blot测定VEGFR2表达抑制情况。【结果】VEGFR2 siRNAa、b、c抑制HL60细胞效率分别为77．5％、45．0％、80．
郭海霞 +5 more
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小干扰RNA抑制PTTG基因对人胰腺癌细胞PANC-1侵袭能力的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的研究PTTG基因沉默对胰腺癌细胞侵袭力的影响,探讨其与胰腺癌细胞侵袭性的关系及调控机制。方法阳离子脂质体转染PTTG siRNA对PANC-1中的PTTG基因进行干扰;利用RT-PCR和Western blot技术检测其基因沉默效应;通过Transwell小室法测定PANC-1细胞侵袭能力的改变。结果转染PTTG siRNA后,PANC-1细胞中PTTG的mRNA转录和蛋白表达受抑,显著低于未经处理的PANC-1细胞 ...
王宁, 王冠军, 刘洁
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肌球蛋白重链7基因来源的miR-208b-3p促进心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2023 目的探究肌球蛋白重链7基因来源的微小RNA-208b-3p（miR-208b-3p）对心肌成纤维细胞纤维化表型的调控作用。方法通过miRNA 表达谱芯片分析18周龄的糖尿病db/db小鼠和db/m对照小鼠心肌中差异的miRNAs。通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-208b-3p 在血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）和高糖/葡萄糖氧化酶（G/Go）处理的C57BL/6乳小鼠心肌细胞（NMVCs）和心肌成纤维细胞（mCFs）中的表达；利用CCK8细胞增殖实验、流式细胞术和纤维化相关蛋白 ...
张梦珍 +7 more
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靶向干扰Survivin基因对结直肠癌细胞PTTG蛋白的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的探讨重组载体介导的Survivin小干扰RNA（siRNA）对人结肠癌细胞株Lovo中PTTG蛋白的影响。方法运用靶向Survivin siRNA真核表达载体转染结肠癌Lovo细胞,western blot检测PTTG蛋白的表达水平。结果 Survivin基因沉默后24-72h,与正常对照组相比,Survivin和PTTG蛋白表达均明显降低,差异具有统计学意义 ...
史美龙
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咪达唑仑通过下调circASXL1抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2023 目的 探讨咪达唑仑对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的可能机制。方法 体外培养胃癌HGC-27细胞，用不同剂量(10、20、40μmol/L)咪达唑仑干预24 h后，CCK-8法、克隆形成实验、Transwell分别检测细胞增殖抑制率、克隆数、迁移及侵袭，蛋白质印迹法检测细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达，qRT-PCR法检测细胞中circASXL1表达。分别以53例癌旁组织、胃黏膜上皮细胞GES-1为对照，qRT-PCR法检测53例胃癌组织和HGC-27细胞中circASXL1表达。同时，
汪峻羽, 卢想, 佟凯, 程若竹
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的观察小干扰RNA（siRNA）转染Hela细胞后,对IER5基因抑制效果,筛选出高效的siRNA转染质粒。方法利用siRNA设计软件,将设计好的RNA片断插入到siRNA表达质粒载体PsilencerTM 3.1-H1 hygro中,测序正确后转染至Hela细胞中。利用Real-time PCR的方法 ,测定siRNA对Hela细胞中IRE5的抑制效果。结果在mRNA水平及Western blot测试,IER5-siRNA-Hela细胞的IER5基因mRNA表达抑制效果明显。从细胞形态上讲,IER5-
李莉 +8 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的构建携带人肝癌细胞CDK2基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体;方法设计能表达CDK2特异性的小干扰RNA(siRNA),构建pAKD-shRNA-CDK2重组质粒,采用磷酸钙共转染法将重组质粒pAKD-shRNACDK2、包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共转染AAV-293细胞,采用定量PCR方法对病毒进行滴度测定;结果三质粒共转染AAV-293细胞48h后,荧光显微镜下检测到GFP绿色荧光,表明共转染成功,测定病毒平均滴度为3.56×1012v.g/ml ...
于水澜, 姜颖, 于英君, 宋高臣
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LncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖及迁移能力的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的研究lncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖及迁移的作用。方法利用脂质体转染小干扰RNA以沉默lncRNA FOXD2-AS1基因,通过MTT、平板克隆形成实验和transwell小室等实验方法检测胶质瘤细胞的增殖及迁移。结果对照组在96h增殖率为19.8%±1.09%、20.3%±1.12%,沉默lncRNA FOXD2-AS1基因后的增殖率为7.59%±0.615%、17.9%±0.720%,差异有统计学意义。对照组的克隆形成数为119.3±11.0、162.3±50.2 ...
上官文兵 +3 more
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MiR-134 在MA 诱导神经元损伤中的表达及其对神经诱发动作电位的影响
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2017 摘要：【目的】探讨微小非编码RNA分子miR-134在甲基苯丙胺（MA）诱导PC12神经细胞损伤中的表达变化及其对神经兴奋性的影响，为理解MA导致神经损伤的机制提供实验基础。【方法】将处于对数生长期的PC12细胞分为对照组和 MA组。MA组应用800 μmol/L MA处理，建立体外神经元损伤模型，观察培养神经细胞损伤及细胞凋亡情况；采用实时荧光定量PCR技术测定miR-134的表达水平变化；并构建miR-134干扰载体，抑制miR-134后分析神经诱发动作电位的变化。【结果 ...
李涛 +7 more
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