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目的研究RhoC基因沉默对肝癌细胞生长和转移潜力的影响。方法基因重组法构建小干扰RNA表达载体,沉默肝癌细胞RhoC基因表达;平板克隆实验检测细胞生长潜力,半定量RT-PCR法检测细胞周期蛋白和MMPs表达水平。结果RNAi组克隆形成百分数显著低于对照组(20.33±5.42%和70.58±10.10 ...
谢淑丽 +5 more
doaj
目的探讨SLE人群和正常对照干扰素调节因子5(IRF5)基因表达的差异。方法收集92例活动期的SLE病例与88名正常对照,提取外周血总RNA并反转录为cDNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应扩增IRF5基因,获得扩增体系的Ct值后,用公式2-⊿⊿Ct计算SLE组和正常对照组的IRF5的mRNA表达水平。SLE患者抗ds-DNA抗体检测采用免疫印迹法。结果利用实时荧光定量聚合酶链反应扩增得到了预期大小的IRF5基因片段;SLE组、正常对照组外周血IRF5mRNA的表达水平分别为0.232±0.076、0 ...
张旋 +5 more
doaj
siRNA沉默HOTAIR表达对人胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响
目的探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)沉默HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)基因对人胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法首先利用荧光定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测HOTAIR在人胶质瘤细胞A172和正常星形胶质细胞HA1800中的表达。然后合成si-HOTAIR ...
郭志钢 +5 more
doaj
使用FLAG标签肽及慢病毒载体共同筛选小鼠foxp3基因RNA干扰的有效靶点
【目的】筛选高效的foxp3 RNA干扰的靶点用于阻断CD4^+CD25^+ Treg细胞的免疫抑制功能。【方法】使用oligoengine软件设计foxp3基因shRNA序列,化学合成法合成4条shRNA序列,构建含foxp3的靶序列的慢病毒载体:构建出表达FLAG融合蛋白和目的基因的工具细胞293T细胞用于筛选RNA干扰的有效靶点。【结果】成功包装了4条foxp3基因靶序列相应的慢病毒颗粒;成功构建了表达融合蛋白和目的基因的293T工具细胞:在工具细胞上筛选出了2条RNAi效率分别为91.3%和95.
史艳侠 +5 more
doaj
孟鲁司特抑制呼吸道合胞病毒感染人支气管上皮细胞所致炎症的药理机制
【目的】探讨孟鲁司特抑制炎症过程中的药理机制。【方法】构建呼吸道合胞病毒感染人支气管上皮细胞 (16HBEC)炎症模型,分别用qPCR和Western-blot方法检测核因子NF-E2相关因子(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还 原酶1(NQO-1)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)的mRNA水平和蛋白水平,荧光探针DCFH-DA法检测细胞活性氧化物(ROS)的产 生。进一步通过合成Nrf2小干扰RNA(Nrf2 siRNA),下调Nrf2的表达后,探究炎症指标的变化情况。【结果 ...
江敏时 +3 more
doaj
慢病毒介导shRNA静默CXCR4对Eca109细胞转移特性的影响
【目的】 新近研究显示CXCL12/CXCR4通路在食管癌组织中有较高的表达,本研究探讨应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效静默食管癌细胞株Eca109细胞CXCR4的表达,研究CXCL12/CXCR4通路对食管癌Eca109细胞转移能力的影响65377;【方法】 以人CXCR4 mRNA编码序列作为干扰靶点,构建靶向CXCR4的vshRNA表达质粒,另构建不针对任何已知mRNA的阴性对照vshRNA表达质粒,转染相应组别细胞65377;研究分为控制组65380;阴性对照组及静默组65377 ...
doaj
[Anti-inflammatory effects of cell membrane vesicle-mediated delivery of small interfering RNA targeting tumor necrosis factor-α on dental pulp stem cells]. [PDF]
Gao R +6 more
europepmc +1 more source
[Silencing DDX17 inhibits proliferation and migration of pulmonary arterial smooth muscle cells <i>in vitro</i> by decreasing mTORC1 activity]. [PDF]
Deng X +6 more
europepmc +1 more source
[Clinical research advances for small-molecule nucleic acid drugs in the treatment of chronic hepatitis B]. [PDF]
Wang WX +4 more
europepmc +1 more source
[目的]探讨MDR1 siRNA对结肠癌细胞多药耐药性的影响。[方法]设计合成两种针对MDR1 mRNA的siRNA双链分子(#4123 MDR1 siRNA和#4029 MDR1 siRNA),并转染入COLO 320DM和HT-29结肠癌细胞,观察其对结肠癌细胞MDR1 mRNA和P-gp表达的影响。并分别与5-FU、阿霉素和长春新碱等抗肿瘤药联用,观察结肠癌细胞活力的变化。用阿霉素处理后,观察转染MDR1 siRNA结肠癌细胞的细胞内阿霉素累积浓度的变化。RT-PCR检测细胞MDR1 ...
doaj

