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Studies on Population Genetic Structure of Chiloscyllium plagiosum in the neritic waters of Southeastern China [PDF]
, 2009 本文通过设计引物进行PCR扩增并测序，获得并分析条纹斑竹鲨(Chiloscylliumplagiosum，Bennett）的线粒体基因组(mtDNA）中细胞色素b基因(cytb)及控制区(controlregion)基因的全序列，探讨了条纹斑竹鲨琼海、湛江、厦门、平潭4个群体的遗传结构特点和群体分化，主要结果如下： 1.条纹斑竹鲨mtDNA的cytb全序列长度为1146bp。共发现20个变异位点，变异主要发生在三联密码子的第三个碱基上，在碱基组成上呈现显著的反G偏倚，在密码子使用上也存在明显偏倚性 ...
傅蒙娜
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pshuttle-Egr1-Smac质粒对MCF-7细胞的辐射致敏作用及细胞周期进程的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的研究含辐射敏感Egr-1启动子介导Smac基因的重组质粒pshuttle-Egr1-hSmac对辐射人乳腺癌MCF-7细胞的致敏作用及细胞周期进程的影响。方法将其质粒经脂质体转染到MCF-7细胞中,24 h后利用克隆形成法计算存活分数,评价细胞的辐射敏感性;利用流式细胞术检测X射线照射后细胞周期进程的变化。结果 MCF-7细胞转染质粒24 h后,经0、2、4、6、8和10 Gy X射线照射后14 d,对照和pshuttle组细胞存活分数基本一致,而转染质粒的细胞存活分数明显低于对照组 ...
梁硕 +6 more
doaj
The function of four lifespan-related genes in Caenorhabditis elegans [PDF]
, 2014 线粒体中折叠环境的变化通过影响核基因的编码诱导线粒体的伴侣蛋白的表达，从而引起线粒体非折叠蛋白反应(UPRmt)。这些反应将会导致蛋白折叠能力的增加，抑制蛋白进入细胞或者抑制蛋白表达，增加蛋白质降解水平，潜在的引起细胞死亡。在秀丽隐杆线虫线粒体中，非折叠蛋白反应（UPR）通过影响dve-1、UBL-5和ZC376.7的诱导和定位，激活伴侣分子如HSP60的表达，所以dve-1可以调控UPR通路，调节线粒体功能，从而影响细胞寿命。DVE-1在线虫胚胎发育和线粒体形态的维持方面都发挥着重要的作用 ...
陈帅帅
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重组腺病毒载体Ad-LMP-1的构建及其转染 MSC后成骨活性
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2010 【目的】 快速构建大鼠LIM矿化蛋白-1基因重组腺病毒载体,转染MSC,探讨LMP-1基因对MSC成骨分化和成骨活性的影响65377; 【方法】 从大鼠成骨细胞内提取总RNA,并设计LMP-1特异性引物进行RT-PCR,获取LMP-1基因后利用Invitrogen公司的TOPO定向克隆技术创建入门克隆pENTR/D-LMP-165377;转化TOP10细菌后,挑取阳性克隆摇菌提取质粒,入门克隆再与表达载体pAD/CMV/V5-DEST进行同源重组反应得到病毒载体pAD/CMV/V5-LMP-1 ...
doaj
Current Status and Expectation on Research for Ellobiid [PDF]
, 2012 耳螺(EllObIId)是一类特殊的原始有肺类软体动物,大多嗜盐,主要分布于海陆过渡区的高潮带和潮上带。耳螺在软体动物进化史上具有特殊地位,并且因其对环境变迁和人为干扰十分敏感,可作为环境评估的重要指标种。过去2个多世纪,众多学者已经对耳螺的形态学、解剖学、分类学和生态学等开展了系统的研究。本文概述了耳螺研究的3个阶段:起步阶段(18世纪末至20世纪30年代初)、发展阶段(20世纪30年代初至70年代末)和成熟阶段(20世纪80年代至今),最后总结了耳螺研究中存在的不足,并对未来研究方向进行展望 ...
刘毅 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue目的 构建带有FLAG标签的BPIFC基因真核表达载体，建立稳定转染BPIFC基因的HaCaT细胞系。方法 设计引物通过PCR扩增出BPIFC基因片段，利用DNA重组技术将该基因片段定向插入pcDNA3.1-flag-N真核表达载体中，并对重组质粒进行双酶切及DNA测序鉴定。验证正确的重组质粒通过PI Max线性转染的方法转染至HaCaT细胞，通过G418筛选建立BPIFC稳定转染的HaCaT细胞系，并通过RT-PCR法和Western-blot法分别测定BPIFC mRNA和蛋白的表达量。结果 ...
陆娇娇 +5 more
doaj
人TIM-1和TIM-3 mRNA实时SYBR Green Ⅰ定量RT-PCR检测方法的建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的建立实时SYBR Green I定量RT-PCR检测人TIM-1和TIM-3mRNA的方法。方法从人外周血单个核细胞提取的总RNA中逆转录扩增人TIM-1和TIM-3的cDNA,将将纯化的人TIM-1和TIM-3的扩增产物分别与pMD18-T Simple载体进行连接,转化宿主菌DH5α,提取重组质粒DNA,PCR鉴定并测序分析。纯化质粒并检测260nm吸光值,确定重组质粒原液的拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度标准品,进行实时荧光定量PCR实验。结果建立了TIM-1和TIM ...
陈治中 +3 more
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Population Genetics Research of Chiloscyllium plagiosum and Scoliodon laticaudus in China's Southern Coast [PDF]
, 2008 以鲨、鳐类为代表的软骨鱼类主要生活在海洋中，大约有1100种。作为食物链的顶级捕食者和海洋生态系统的重要组成部分，软骨鱼类会对许多其他海洋生物的种群结构产生影响。因此，当软骨鱼类遭到过渡捕捞后将严重影响海洋生态系统中生物群落组成及生态环境。 研究发现，相对于硬骨鱼类，大部分鲨、鳐类具有生长缓慢、成熟期长、生殖力低的特点。这些特点导致其具有较低的内禀增长率以及在捕捞压力下较低的种群恢复能力。因此，大部分软骨鱼类种群只能承受中等捕捞强度的渔业开发，否则将导致种群数量急剧减少甚至种群崩溃 ...
陈骁
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靶向存活素的RNAi联合X射线照射对肺腺癌移植肿瘤的抑制作用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的利用RNAi、RT-PCR和Western blot技术,探讨靶向存活素的基因沉默联合X射线照射对肺腺癌移植瘤的抑制作用及相关机制。方法根据Genbank中存活素（Survivin）的cDNA序列设计RNAi序列,构建shRNA真核表达载体pGenesil-2-Survivin,经过酶切,测序鉴定后,将经脂质体包裹的pGenesil-2-Survivin注射到裸鼠移植肺腺癌瘤体内,并联合5 Gy X射线照射,利用RT-PCR和Western blot技术检测移植肿瘤内Survivin ...
李长锋 +4 more
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慢病毒介导靶向PRL-3 基因的siRNA 抑制肝癌细胞的侵袭性
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2010 【目的】 探讨肝再生磷酸酶-3(PRL-3)的表达对肝癌细胞侵袭能力的影响65377;【方法】 设计65380;合成4对针对PRL-3 基因siRNA 的寡核苷酸序列,分别构建质粒,转染293T 细胞,据其对PRL-3 的抑制率,筛选最有效的PRL-3 基因RNAi 靶序列,设计并合成其siRNA 的双链DNA Oligo,与含绿色荧光蛋白(GFP)编码基因的pGCL-GFP 线性化载体连接产生重组慢病毒质粒LV-PRL3-SiRNA,并行PCR 和测序鉴定65377;将LV-PRL3-SiRNA ...
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