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pink1-prkn PARK2通路与线粒体自噬和肝脏急性缺血再灌注损伤的关联研究
目的探讨pink1-prkn PARK2通路与线粒体自噬和肝脏急性缺血再灌注损伤的关联。方法选择C57BL/6小鼠,将Pink1-KO小鼠与Park2-KO小鼠杂交以产生Pink1Park2double-KO小鼠,制作肝脏急性缺血再灌注损伤模型。取肝脏组织行SP3的免疫组织化学染色。用质粒DNA或RNAi瞬时转染HK-2细胞;HK-2细胞在含20mM CCCP的无糖RKRB缓冲液诱导ATP耗竭,模拟再灌注;进行细胞凋亡分析;分离线粒体,测量线粒体DNA(mtDNA)的相对含量;测量HK ...
刘树雄, 何建
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【目的】探索组蛋白H3K27me3 甲基转移酶Ezh2 在间充质干细胞内缺失对小鼠骨骼肌细胞分化及骨骼肌线粒体的影响。【方法】构建Ezh2 间充质干细胞条件性敲除小鼠(Ezh2F/FPrx1-Cre)。HE 染色、改良Gomori 三色染色及四氮唑还原酶染色(NADH-TR)法观察细胞形态及线粒体情况。电镜观察骨骼肌细胞和线粒体超微结构。Western Blot 法检测 6 周龄小鼠骨骼肌细胞中 Ezh2、H3K27me3 和骨骼肌分化相关基因 Myogenin、Myosin、Desmin ...
武晓慧 +6 more
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Species-specific element of Oryza sativa mitochondria tRNATrp(水稻线粒体tRNATrp种属特异性元件研究)
为了研究水稻线粒体tRNATrp的种属特异性元件,在野生型水稻线粒体tRNATrp的基础上,设计并完成了 3种向人tRNATrp的突变,体外转录并用枯草杆菌和人这两种不同种属来源的色氨酰-tRNA合成酶(TrpRS)测定了这些tRNATrp分子的氨酰化活力(Kcat/KM).结果表明,与野生型水稻线粒体tRNATrp相比,3个突变体被人TrpRS氨酰化的活力分别提高了 354、407和803倍,其中以PMPH3(水稻线粒体tRNATrp的氨基酸接受茎的C2-G71和G3 ...
JINXiao-ling(金晓玲) +1 more
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目的为了研究线粒体DNA在人喉癌细胞的增殖、分化及凋亡中的影响及作用,培养线粒体DNA缺失的喉癌细胞系,为构建融合喉癌细胞,研究线粒体DNA突变和线粒体功能改变与喉癌发生之间的关系奠定基础。方法人喉癌细胞系JHUo11加入10%FBS的RPMI1640培养基中,然后在培养基中加入丙酮酸、尿苷、溴化乙锭(EtBr)以去除线粒体DNA,不加溴化乙锭的o11细胞作为对照。经过90天培养,线粒体DNA缺失的喉癌细胞通过健那绿染色后光镜观察和PCR法鉴定。结果 o11细胞经过75ng ...
王磊 +4 more
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牛磺酸对运动大鼠心肌线粒体游离钙、PLA2及脂质过氧化的影响
目的探讨牛磺酸对运动大鼠心肌线粒体损伤的保护作用。方法以大鼠力竭运动为模型,观察了牛磺酸对运动后大鼠心肌线粒体脂质过氧化水平、抗氧化酶、游离钙及磷脂酶A2(PLA2)的影响。结果力竭运动可引起大鼠心肌线粒体脂质过氧化水平和磷脂酶A,活性显著升高,心肌线粒体超氧化物歧化酶(SOD)活性和游离钙浓度的显著下降,而牛磺酸可抑制人鼠力竭运动后心肌线粒体脂质过氧化水平和磷脂酶A:活性的显著升高,抑制大鼠心肌线粒体SOD的活性和游离钙浓度的显著下降。结论牛磺酸可减少力竭运动后自由基对心肌线粒体的攻击 ...
张陵, 张钧
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目的探讨血液中的乳酸水平能否成为线粒体基因突变患者的筛查指标。方法选择2型糖尿病(2-DM)530例,横纹肌病33例,耳聋162例,健康对照120例,检测受试者血液中的乳酸水平,并行线粒体基因组DNA分析,采用PCR-RELP技术进行常见的线粒体突变位点筛查(mtDNAtRNAleu(uur)A1555G和mtDNAtRNAleu(uur)A7444G)和测序。结果线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变组(2-DM、耳聋和横纹肌病 ...
郑宗富 +4 more
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目的线粒体膜电位的缺失是线粒体凋亡途径的早期事件。我们用线粒体膜电位去极化剂(valinomycin)处理3个喉癌细胞系,研究它们的凋亡反应和细胞色素C释放的能力。方法 3个喉癌细胞系和对照细胞系HL-60经过valinomycin处理后,用细胞膜电位探针JC-1染色和凋亡特异性探针annexinV染色,用流式细胞仪分别测量它们的线粒体膜电位和凋亡率。Western印记用来检测细胞浆内的细胞色素C的释放。结果在经过24小时的处理后所有细胞均显示完全的线粒体去极化,只有对照细胞HL ...
王磊 +5 more
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【目的】探讨去琥珀酰化酶Sirtuin5(SIRT5)对受体相互作用蛋白140(RIP140)诱导的心肌线粒体能量代谢紊乱的影响。【方法】利用腺病毒感染心肌细胞诱导 RIP140 过表达,利用质粒转染诱导 SIRT5 基因过表达,siRNA 干扰敲低 RIP140、SIRT5表达;qRT-PCR和Western blot检测SIRT5、RIP140的表达变化;qRT-PCR检测线粒体编码基因的表达情况, TMRE染色法评估线粒体膜电位,试剂盒检测细胞耗氧和ATP生成情况。所有数据均来自至少3次的独立实验。
陈艳芳, 刘培庆
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肌萎缩侧索硬化症(ALS)是一种典型的神经退行性疾病,其特征是大脑和脊髓中的运动神经元进行性病变。虽然DNA测序技术筛查出众多的ALS致病基因,拓宽了人们对ALS疾病发生的认识,但是这些功能各异的基因导致ALS疾病进程的分子机制仍是有待阐明的。随着基础研究的不断进展,人们发现线粒体的损伤,线粒体的动力学异常以及线粒体自噬等与神经退行性疾病如ALS的发病具有重要联系。在本篇综述中,我们主要讨论了ALS致病基因导致线粒体功能障碍的可能机制,旨在强调线粒体功能障碍在ALS疾病发展中的重要作用。
郑志隆, 郭兴
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目的本文设计并合成了一个具有高活性的抗坏血酸过氧化物模拟酶-次血红素六肽,并探讨了次血红素六肽对离体心肌线粒体氧化损伤的保护作用。方法以Vc/Fe3+/MT自由基诱导损伤体系建立了离体心肌线粒体氧化损伤模型,以膜脂质过氧化产物丙二醛(MDA),线粒体膨胀度和细胞色素C氧化酶(CCO)活性为指标研究了次血红素六肽对心肌线粒体的抗氧化保护作用。结果线粒体氧化损伤模型而中MDA生成量随着时间的延长而增大,表现为532nm处光吸收值的上升;DhHP-6保护组MDA生成量程度明显降低;DhHP ...
彭燕 +4 more
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