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, 2019 接种疫苗是预防、控制甚至消灭传染病最为有效的方法。疫苗在发展过程中逐渐形成了一系列疫苗品种和疫苗研究技术。随着结构生物学、反向遗传学、生物信息学等学科和技术的快速发展,疫苗研发正逐步迈入新抗原发现及免疫原精准设计的崭新阶段。经过近几十年的发展,我国疫苗研究技术逐步提升,质量水平持续提高,研发品种更为丰富,与国外差距逐渐缩小,初步形成了基础研究技术库、应用转化和产业化的全链条体系。但与发达国家相比,我国在疫苗研发技术和疫苗新品种方面还存在一定的差距。为全面提升我国疫苗研究水平,今后要深耕疫苗基础研究 ...
于振行, 李少伟, 苏月, 范红
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTTP）70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因（EGFP）和中国旱獭α干扰素基因（cwIFNA5）分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因转染大鼠内皮祖细胞的方法,分析转染VEGF基因对内皮祖细胞生长的影响。方法分离大鼠骨髓内皮祖细胞并诱导其分化,采取FITCUEA-I和Dil-Ac-LDL双染色法验证;采用腺病毒包装VEGF165基因,按照不同比例转染内皮祖细胞后,通过荧光显微镜观察质粒自带绿色荧光蛋白验证转染效率;以未转染及转染空载体为对照;采用MTT法验证转染VEGF165基因对内皮祖细胞增殖的影响 ...
王伟 +5 more
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腺病毒介导CD40Ig基因转染联合骨髓细胞输注诱导大鼠心脏移植物耐受的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 研究CD4 0Ig基因转染联合骨髓细胞输注对大鼠心脏移植免疫耐受诱导的影响。方法 构建可表达CD4 0Ig的腺病毒载体Ad CD4 0Ig。建立大鼠心脏移植模型 ,将实验动物分为 5组 :A ,对照组 ,无任何处理 ;B组 ,单纯输注供者骨髓细胞 ;C ,单纯输注Ad CD4 0Ig ;D ,Ad CD4 0Ig和供者的骨髓细胞联合输注 ;E :输注对照腺病毒Ad Lacz。观察心脏移植物的存活时间、并MLR检测及移植物组织学检查。结果 5组移植物的存活时间分别为 :8 34± 0 35天、9
徐衍盛, 肖序仁, 李峰永
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转基因溶瘤性单纯疱疹病毒对人类乳腺癌细胞及其干细胞的溶瘤作用
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2011 【目的】 通过体外实验观察溶瘤性单纯疱疹病毒(HSV)载体G47Δ对人类原代乳腺癌细胞及乳腺癌干细胞毒效应,探讨其对人乳腺癌的治疗作用【方法】 选取6例浸润性导管癌组织,体外培养人原代乳腺癌细胞及人原代乳腺癌干细胞,将G47Δ按不同感染复数(MOI),即MOI=0.01和MOI=0.1加入各实验组中,观察每天细胞的生长情况G47Δ含有LacZ基因,其表达产物可被X-gal染色检测 【结果】 G47Δ病毒在乳腺癌细胞中可复制和传播通过X-gal染色法得以证实 ...
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以KDR为启动子的双自杀基因系统诱导结肠癌细胞凋亡的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的研究以KDR为启动子的双自杀基因系统CDglyTK诱导结肠癌细胞凋亡的实验研究。方法用联合基因AdKDR-CDglyTK腺病毒转染表达KDR不同的人结肠癌细胞HCT116和LS174T,检测转染效率;RT-PCR检测双自杀基因CDglyTK的表达;用梯度浓度的前药5-FC及GCV处理,MTT法检测双自杀基因系统对HCT116和LS174T的细胞毒性作用;流式细胞术观察细胞凋亡变化;免疫组织化学法检测caspase-3蛋白的表达。结果携带双自杀基因的重组腺病毒载体成功转染结肠癌细胞。RT ...
王朝阳, 黄宗海
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腺病毒介导的IL-24基因转移对系膜细胞分泌细胞因子IL-6、TNF-α的影响
Linchuang shenzangbing zazhi, 2014 目的 探讨腺病毒介导的白细胞介素24(interleukin-24,IL-24)基因转移对系膜细胞分泌细胞因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6、TNF-α的影响。方法 通过逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法构建IL-24腺病毒载体,并经序列分析证实。腺病毒载体在293细胞中扩增。分组培养系膜细胞:
王晓浪
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慢病毒载体介导siRNA对裸鼠移植人肺腺癌A549抑瘤作用的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的研究慢病毒载体介导siRNA抑制survivin基因表达后对人肺腺癌A549细胞体内增殖能力的影响以及对裸鼠移植人肺腺癌的抑瘤活性。方法应用裸鼠成瘤实验测定致瘤能力的改变,采用RT-PCR和Western-blot测定干扰后survivin基因及其蛋白的表达水平;流式细胞术检测肺癌细胞凋亡指数和增殖指数。结果靶向survivin基因的siRNA可以有效抑制survivin基因的表达,使survivin-mRNA表达减少50%-80%,蛋白表达减少60%;流式细胞术检测细胞凋亡率明显提高 ...
赵岐刚, 田小侠, 李鹏, 司磊
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】研究灭活后的柯萨奇病毒 B1 在原代培养骨骼肌细胞中对报道基因 pCDNA3-LacZ 转移效率的影响。【方 法】①用聚乙二醇沉淀和蔗糖低温超速离心法提纯并用β-丙内酯灭活病毒; ②分别用不同浓度的转铁蛋白聚赖氨酸( TfpL)+ LacZ、灭活 CVB1+LacZ 以及灭活 CVB1+TfpL+LacZ 在肌肉细胞进行基因转移, 以报告基因产物 β-半乳糖苷酶染色阳性的 细胞数作为基因转移效率指标。【结果】灭活 CVB1+TfpL+LacZ 在肌肉细胞中使基因转移效率由 TfpL +LacZ ...
陈国俊 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的已有研究显示HER2基因过表达乳腺癌细胞对曲妥珠单抗（TZB）产生抵抗性与LC3的过表达相关,本研究通过RNAi沉默耐TZB的SKBR3（SKBR3-TR）细胞LC3的表达,探讨HER2阳性乳腺癌对TZB抵抗的机制。方法以SKBR3乳腺癌细胞及SKBR3-TR细胞为研究对象,检测两组细胞中LC3表达情况。以SKBR3-TR细胞为研究对象,通过慢病毒载体沉默SKBR3-TR细胞LC3的表达,实时定量PCR（Realtime20PCR）、蛋白免疫印迹检测LC3mRNA、蛋白的表达及水平,通过CCK ...
万广稳 +5 more
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